多發(fā)性骨髓瘤患者血清IL-33和IL-6水平的變化及其臨床意義

高樹(shù)雨，牛淑麗

(1.康?？h人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北張家口075000；2.張家口市第四醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北張家口 075000)

多發(fā)性骨髓瘤患者血清IL-33和IL-6水平的變化及其臨床意義

高樹(shù)雨1，牛淑麗2

(1.康?？h人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北張家口075000；2.張家口市第四醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北張家口 075000)

目的檢測(cè)多發(fā)性骨髓瘤(Multip lem yeloma，MM)患者血清中IL-33和IL-6水平，探討其在疾病發(fā)展中的作用。方法選取2012年1月至2013年1月間37例多發(fā)性骨髓瘤患者和50例健康對(duì)照者作為研究對(duì)象，應(yīng)用ELISA方法檢測(cè)所有研究對(duì)象血清中IL-33和IL-6水平，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果兩組研究對(duì)象的IL-33檢出率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；IL-33水平與MM分期呈負(fù)相關(guān)，MM患者IL-33水平與健康對(duì)照者相比顯著降低，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；IL-6水平與MM分期呈正相關(guān)，MM患者IL-6水平與健康對(duì)照者相比顯著升高，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論MM進(jìn)展過(guò)程中IL-33和IL-6分泌改變可能導(dǎo)致免疫失衡而使疾病逐步惡化，其有助于病情監(jiān)測(cè)和為免疫治療提供理論依據(jù)。

IL-33；IL-6；多發(fā)性骨髓瘤；相關(guān)性

多發(fā)性骨髓瘤(Multiplemyeloma，MM)是骨髓中長(zhǎng)壽漿細(xì)胞惡性增殖性疾病。瘤細(xì)胞在骨髓發(fā)展，造成骨質(zhì)破壞，與正常漿細(xì)胞相似，MM細(xì)胞的存活及其基本細(xì)胞因子的產(chǎn)生必須依賴于與骨髓基質(zhì)細(xì)胞[1]。MM的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，累及免疫細(xì)胞，存在免疫球蛋白惡性克隆，患者有嚴(yán)重的體液免疫缺陷，除此以外患者還存在細(xì)胞免疫功能紊亂及細(xì)胞因子失衡，機(jī)體免疫狀態(tài)極其低下。IL-33是IL-1家族新近發(fā)現(xiàn)的成員，由內(nèi)皮細(xì)胞和上皮細(xì)胞表達(dá)[2]，可能調(diào)節(jié)不同器官中Th2型細(xì)胞的轉(zhuǎn)變而參與免疫調(diào)節(jié)[3]。IL-6則主要由骨髓基質(zhì)細(xì)胞分泌，參與MM細(xì)胞的生長(zhǎng)與發(fā)育。本研究檢測(cè)MM患者IL-33和IL-6水平的變化，探討細(xì)胞因子在MM發(fā)展中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2012年1月至2013年1月間于我院進(jìn)行診治的37例MM患者作為觀察組，其中男性16例，女性21例，平均年齡(59.7±6.8)歲。所有入選患者在進(jìn)行研究前7 d未接受任何MM治療。選取同期50例健康體檢者作為對(duì)照組，其中男性23名，女性27名，平均年齡(60.1±5.8)歲，其基本人口學(xué)特征與觀察組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。所有研究對(duì)象均無(wú)急性感染、炎癥性疾病、糖尿病、肥胖、神經(jīng)系統(tǒng)疾病或其他系統(tǒng)疾病。

1.2 方法所有研究對(duì)象于入院或體檢當(dāng)天抽取靜脈血，離心分離血清-20℃，并應(yīng)用ELISA檢測(cè)試劑盒(購(gòu)于美國(guó)R&D公司)檢測(cè)血清中IL-33和IL-6含量，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS13.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，正態(tài)分布數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x-±s)表示，非正態(tài)分布數(shù)據(jù)使用四分位距(Interquartile range,IQR)和范圍進(jìn)行描述。計(jì)量資料的比較采用Mann-Whitney U檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)。兩變量間的相關(guān)性分析用Spearman相關(guān)分析，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 基本特征根據(jù)Durie-Salmon分期體系對(duì)MM患者進(jìn)行分類，其中MMⅠ期9病，Ⅱ期11例，Ⅲ期17例；免疫球蛋白亞類中，21例為IgG，15例為IgA，1例為非分泌性；21例患者有溶解性骨病和/或病理性骨折。

2.2 IL-33和IL-6水平與疾病相關(guān)性19例MM患者(51.4%)和24例健康對(duì)照者(48.0%)可檢測(cè)出IL-33，兩組間檢出率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2= 0.317，P=0.729)，但兩組間IL-33水平存在區(qū)別，隨著MM分期增加，IL-33水平值逐漸降低，與對(duì)照組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。IL-33水平與MM分期呈負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為-0.628，P=0.006。隨著MM分期增加，IL-6水平值逐漸升高，與對(duì)照組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。IL-6水平與MM分期呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.593，P=0.009，見(jiàn)表1。

表1 不同研究對(duì)象IL-33和IL-6水平檢測(cè)結(jié)果

2.3 不同特征分類后MM患者的IL-33和IL-6水平比較將所有MM患者根據(jù)不同的特征進(jìn)行分類后再比較其IL-33和IL-6的水平，結(jié)果顯示腎衰MM患者血清中IL-33水平較非腎衰MM患者降低(χ2=3.882，P＜0.05)，而IL-6水平則較非腎衰MM患者升高(χ2=5.323，P＜0.05)；有無(wú)溶骨病變患者血清中兩種細(xì)胞因子差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(IL-33:χ2=0.568，P＞0.05；IL-6:χ2=0.227，P＞0.05)，見(jiàn)表2。

表2 按不同特征分類后MM患者IL-33和IL-6水平的比較

3 討論

隨著我國(guó)老齡化的逐步加快，MM患者發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，其發(fā)病機(jī)制至今仍未完全闡明，其發(fā)展涉及一系列骨髓微環(huán)境的變化，趨向于利于腫瘤的生長(zhǎng)和局部免疫控制的失調(diào)。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)MM患者CD4+和CD8+T細(xì)胞數(shù)量減少和功能減弱，且患者細(xì)胞免疫缺陷程度與生存率呈負(fù)相關(guān)[4]。MM中還存在Thl與Th2的不平衡，Thl/Th2比例在腫瘤免疫中發(fā)揮有重要作用。Ogawara等[5]研究發(fā)現(xiàn)初發(fā)、復(fù)發(fā)階段的MM患者Thl/Th2比例較健康對(duì)照組高，且與外周血β2-微球蛋白呈正相關(guān)，認(rèn)為Thl/Th2比例失常與MM疾病進(jìn)展存在相關(guān)性。細(xì)胞因子及其受體在疾病的發(fā)展、免疫系統(tǒng)的維持和正常運(yùn)轉(zhuǎn)中起著重要作用。在MM發(fā)生時(shí)，這些相互作用可能發(fā)生異常后果[2]。IL-33是不斷增加的細(xì)胞因子家族中最近添加一員，屬IL-1家族。有研究表明IL-33是各種炎癥性疾病的潛在介質(zhì)，誘導(dǎo)效應(yīng)因子的釋放，起到調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的功能[3]。IL-6是骨髓細(xì)胞的關(guān)鍵性生長(zhǎng)因子，既可刺激腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)又可抗腫瘤。通過(guò)促進(jìn)漿細(xì)胞的增殖與分化，增加免疫球蛋白的分泌；還可誘導(dǎo)多種免疫細(xì)胞增殖分化成為抗原特異性效應(yīng)細(xì)胞，起到免疫防御作用[6]。不同研究結(jié)果得出的IL-33檢出率存在區(qū)別[7]，本研究使用進(jìn)口ELISA試劑盒，檢測(cè)敏感性高，研究結(jié)果表明MM患者及健康對(duì)照者IL-33檢出率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與以往的研究有區(qū)別。研究結(jié)果顯示隨著MM分期的增加血清中IL-33濃度顯著下降，IL-6水平呈上升趨勢(shì)，與健康對(duì)照者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；IL-33水平與MM疾病分期呈負(fù)相關(guān)(相關(guān)系數(shù)為-0.628，P＜0.05)，IL-6水平與MM疾病分期呈負(fù)相關(guān)(相關(guān)系數(shù)為-0.593，P＜0.05)，疾病惡性程度越高IL-33水平越低，IL-6水平越高。IL-33使細(xì)胞免疫應(yīng)答像Th2型反應(yīng)傾斜，IL-6則在MM發(fā)揮了刺激腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的作用，血清中IL-33和IL-6水平的變化可能參與MM患者免疫系統(tǒng)功能的改變，能夠解釋MM患者中檢測(cè)到的Thl/Th2比例失常[5]。

根據(jù)不同特征將MM進(jìn)行分組后再次進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)不同組間IL-33水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；腎衰MM患者IL-6水平較非腎衰患者顯著增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，表明IL-6參與了MM患者腎損傷免疫功能紊亂進(jìn)程。

本研究結(jié)果表明在MM進(jìn)展過(guò)程中IL-33和IL-6分泌改變可能導(dǎo)致免疫失衡而使疾病逐步惡化，有助于更好地理解MM患者中細(xì)胞免疫功能的變化，維持T細(xì)胞亞群的平衡可能是控制MM發(fā)展的一種方法。血清炎性因子IL-33和IL-6對(duì)于MM病情監(jiān)測(cè)、療效評(píng)價(jià)和免疫治療提供了客觀標(biāo)準(zhǔn)，可以有效指導(dǎo)臨床診斷和治療。

[1]Andhavarapu S,Roy V.Immunomodulatory drugs inmultiplemyeloma[J].ExpertRev Hematol,2013,6(1):69-82.

[2]武燕,柳曉金,李明才.IL-33/ST2信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)及其與疾病關(guān)系的研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代免疫學(xué),2010,30(2):164-167.

[3]J?hrer K,Hofbauer SW,Zelle-Rieser C,et al.Chemokine-dependentB cell-T cell interact ions in chronic lymphocytic leukemia and multiple myeloma-targets for therapeutic intervention?[J].Expert Opinion on Biological Therapy,2012,12:425-441.

[4]曾美秀,邱國(guó)強(qiáng),韓文敏,等.多發(fā)性骨髓瘤患者外周血Th1/Th2及CD4+CD25+Tregs的表達(dá)分析[J].細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志,2010, 26(4):382-384.

[5]Ogawara H,Handa H,Ymazaki T,et al.High Thl/Th2 ratio in patientsw ithmultiplemyeloma[J].Leuk Res,2005,29(2):135-140.

[6]Ohgiya D,M atsushita H,Onizuka M,et al.Association of promyelocytic leukem ia protein w ith expression of IL-6 and resistance to treatmentinmultiplemyeloma[J].ActaHaematol,2012,128(4):213-222.

[7]Musolino C,Allegra A,Profita M,etal.Reduced IL-33 plasma levels inmultiplemyeloma patients are associated w ithmore advanced stageof disease[J].Br JHaematol,2013,160(5):709-710.

Changes of IL-33 and IL-6 level in patientswithmultip lem yeloma and their clinical significance.

GAOShu-yu1, NIUShu-li2.1.Departmentof Clinical Laboratory,People's Hospital of Kangbao,Zhangjiakou 075000,Hebei,CHINA;2. Departmentof Clinical Laboratory,the Fourth Hospital of Zhang jiakou,Zhangjiakou 075000,Hebei,CHINA

ObjectiveTo detect the serum levels of IL-33 and IL-6 in patientsw ithmultiplemyeloma,and to explore their role in disease development.MethodsFrom Jan.2012 to Jan.2013,37 patients ofmultiplemyeloma (MM)and 50 healthy controlswere selected as the research objects.ELISA was used to detect the serum levels of IL-33 and IL-6.Datawere statistically analyzed.ResultsThe detection rateof IL-33 showed no statistically significant difference between the two groups.IL-33 levelswere negatively correlated with MM stage,and IL-33 levels of MM patients decreased significantly compared w ith healthy controls(P＜0.05).IL-6 levelswere positively correlated w ith MM stage,and IL-6 level of MM patients increased significantly compared w ith healthy controls(P＜0.05).ConclusionChanges in IL-33 and IL-6 levelsmay promote the progress of MM by adjusting the cellular immunity,andmaintaining thebalanceof T cellsubgroupmay contribute to the treatmentofmyeloma disease.

IL-33;IL-6;Multip lem yeloma;Correlation

R733.3

A

1003—6350（2014）04—0529—02

2013-07-30)

高樹(shù)雨。E-mail：gaoshuyu1973@163.com

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.04.0203