林敏娟 陳功明 王振磊 胡盼盼 吳翠云*
棗樹(Ziziphus jujuba Mill.)原產(chǎn)我國,是我國 第一大干果樹種,栽培面積和產(chǎn)量均占世界的99%。棗樹是南疆發(fā)展生態(tài)節(jié)水型林果業(yè)的首選良種,但由于棗樹落花落果嚴(yán)重,坐果率低,嚴(yán)重影響產(chǎn)量和農(nóng)民收入?;ǚ凵盍兔妊柯适怯绊懽年P(guān)鍵因子,近幾年,關(guān)于紅棗花粉生活力、花粉萌發(fā)、花粉量和花粉育性[1-6]的研究較多,花粉生活力和花粉萌發(fā)受環(huán)境因子的影響較大,新疆與內(nèi)地的氣候差異較大,目前未見關(guān)于新疆引進(jìn)的棗品種的花粉萌發(fā)的研究報道。因此本研究以三個棗品種為研究,對其花粉量和花粉萌發(fā)特性進(jìn)行研究,以其為提高棗的坐果率和雜交育種提定的供理論依據(jù)。
供試材料取自塔里木大學(xué)園藝試驗站,共3個品種,分別為駿棗1號、媽媽棗、猴頭棗,2011年7月采嫁接當(dāng)年新生棗頭棗吊上蕾黃期花朵,用冰盒帶回實驗室。用鑷子撥開花瓣,取出花藥,薄攤于培養(yǎng)皿上,室溫下自然晾干,第二天,將花藥雜碎,使花粉充分散開。
1.2.1 花粉生活力的測定
采用I-KI染色法鑒定花粉的生活力。測定時每份花粉觀察3個視野,不少于100個花粉數(shù),深藍(lán)色的為有生活力的花粉,黃色的為無生活力的花粉。
1.2.2 花粉量的測定
花粉量的測定采用血球計數(shù)器法。取不同蕾黃期的花蕾各90枚,撥取充分成熟飽滿未開裂的花藥90枚,平均放入洗干凈的三個青霉素小瓶內(nèi),自然干燥,待花粉自然散開后,每瓶滴入1%六偏磷酸鈉溶液2 ml,加蓋震蕩,是花粉成懸浮狀,吸取0.2 ul懸浮液于血球計數(shù)板上,顯微鏡下觀察400個小方格的花粉粒數(shù),每品種重復(fù)六次,取平均值,計算單個花藥花粉數(shù)量(N)。
N=(400個小方格內(nèi)總花粉數(shù) ×1 000×2/0.2)/30
1.2.3 培養(yǎng)基的選擇本實驗對硼酸、蔗糖和瓊脂濃度進(jìn)行了篩選。①硼酸濃度分別為0%,0.005%,0.01%和0.02%,蔗糖和瓊脂濃度分別為15%和1%。
②蔗糖濃度分別為5%,10%,15%和20%,硼酸和瓊脂濃度分別為0.01%和1%。
③瓊脂濃度分別為0.5%,1%,1.5%和2%,蔗糖和硼酸濃度分別為15%+0.01%。
1.2.4 花粉萌發(fā)率及花粉管長度測定
采用離體培養(yǎng)法[7]。培養(yǎng)時將花粉用頭發(fā)絲播于盛有培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿上,重復(fù)三次,播種后將載玻片放在墊有濕脫脂棉的盒子中,于27℃黑暗條件下進(jìn)行恒溫培養(yǎng)。24小時后在400(10×40)倍下鏡檢,統(tǒng)計花粉發(fā)芽率。每個載玻片上選取5個視野,重復(fù)3次,觀察花粉總量在1000個以上。在顯微鏡下測量花粉管長度,每個載玻片上選取10個花粉管進(jìn)行測量。
花粉發(fā)芽率=(花粉管長度大于花粉直徑的花粉數(shù)量/觀察花粉數(shù)量)×100%。
表1 不同棗品種花粉量和生活力比較
由表1可知,不同棗品種花粉生活力和花粉量差異顯著,駿棗1號、媽媽棗和猴頭棗品種間花粉量差異不顯著,媽媽棗花粉生活力最強(qiáng)(36.30%)。
對駿棗1號、媽媽棗和猴頭棗在不同硼酸濃度下花粉的發(fā)芽率和花粉管長度進(jìn)行了研究。由表2可以看出,硼酸對花粉萌發(fā)和花粉管伸長有一定的作用。在0~0.02%范圍內(nèi),隨著培養(yǎng)基中硼酸濃度的增加,駿棗1號的花粉發(fā)芽率逐漸增加;媽媽棗在硼酸濃度 0.005%時,花粉發(fā)芽率最高(7.58%);猴頭棗在硼酸濃度0.01%時,花粉發(fā)芽率最高(17.68%),超過0.01%時,花粉萌發(fā)受到抑制。0-0.02%范圍內(nèi),硼酸對駿棗1號和猴頭棗花粉管的伸長有明顯的促進(jìn)作用;硼酸濃度超過0.005%時,媽媽棗花粉管伸長受到抑制。硼酸濃度0.01%時適合棗花粉萌發(fā)試驗。顯著性測驗表明0~0.02%范圍內(nèi),硼酸對花粉萌發(fā)和花粉管伸長影響顯著,不同品種間略有差異。
表2 硼酸濃度對棗花粉萌發(fā)和花粉管長度的影響
表3 不同蔗糖濃度對棗花粉萌發(fā)和花粉管長度的影響
蔗糖可為花粉萌發(fā)和花粉管生長提供糖源,培養(yǎng)基中糖濃度過低或過高都不利于花粉的萌發(fā)[8,9],由表3 可知,在一定的范圍內(nèi),蔗糖促進(jìn)棗花粉萌發(fā)和花粉管伸長。在5~15%濃度范圍內(nèi),隨著培養(yǎng)基中蔗糖濃度的增加,駿棗1號和媽媽棗花粉發(fā)芽率增加,蔗糖濃度超過15%時,花粉萌發(fā)受到抑制;猴頭棗則在蔗糖濃度超過10%,花粉萌發(fā)受到抑制。當(dāng)蔗糖超過一定濃度時抑制花粉管的伸長,蔗糖濃度10%時,駿棗1號和媽媽棗的花粉管最長,分別為251.03μm和334.29μm,而猴頭棗花粉管則在蔗糖濃度15%時最長(363.11μm)。蔗糖濃度10~15%時有利于棗花粉萌發(fā)和花粉管伸長。顯著性測驗表明,蔗糖濃度對花粉萌發(fā)和花粉管伸長影響顯著。
表4 不同瓊脂濃度對棗花粉萌發(fā)和花粉管長度的影響
在一定濃度范圍內(nèi),瓊脂促進(jìn)棗花粉萌發(fā)和花粉管伸長。由表4可知,培養(yǎng)基中瓊脂濃度1.0%時,駿棗1號、媽媽棗和猴頭棗花粉發(fā)芽率最高,分別為10.79%、7.07%和10.57%;駿棗1號和媽媽棗花粉管最長,分別為244.33μm和204.62 μm,而猴頭棗則在瓊脂濃度2%時花粉管最長(226.72μm)。瓊脂濃度1%時,有利于棗花粉萌發(fā)和花粉管伸長。顯著性測驗表明,瓊脂濃度對花粉萌發(fā)和花粉管伸長影響顯著。
棗花粉萌發(fā)率的高低和花粉管長度,直接影響棗的育性和產(chǎn)量。研究結(jié)果表明,較合適的硼酸濃度為0.01%,蔗糖濃度為10~15%,瓊脂濃度為1%。棗品種花粉量、花粉生活力與花粉發(fā)芽率沒有顯著的相關(guān)性,這與劉玲[1]、張俊娥[3]的研究結(jié)果相同,因此在生產(chǎn)中選擇授粉樹時一定要同時考慮花粉量和花粉發(fā)芽率兩個影響因子。在一定濃度范圍內(nèi),蔗糖促進(jìn)花粉萌發(fā)和花粉管伸長,這與刁永強(qiáng)、趙長星、黃家興[10-12]等人的研究結(jié)果一致;一定濃度的硼酸有利于花粉萌發(fā)和花粉管的生長,這與劉孟軍、張紹鈴、符碧[8,13-14]等人研究結(jié)果一致。棗不同品種花粉量、花粉發(fā)芽率和花粉管長度明顯不同,這與品種特性有關(guān)。
[1] 劉玲,王玖瑞,劉孟軍,等.棗不同品種花粉量和花粉萌發(fā)率的研究[J].植物遺傳資源學(xué)報2006,7(3):338- 341.
[2] 唐寧浩,何鋼,李樊,等.3個南方棗品種花粉育性與花粉形態(tài)的觀察[J].經(jīng)濟(jì)林研究2009,27(4):70 -72.
[3] 張俊娥.中國棗品種資源花粉生物學(xué)特性研究[D].太谷:山西農(nóng)業(yè)大學(xué),2001.
[4] 何鋼,李樊,唐寧浩,等.南方棗品種花粉育性與花藥內(nèi)源激素的變化[J].中南林業(yè)科技大學(xué)學(xué)報,2010,30(10):47-50.
[5] 王堯.棗授粉生物學(xué)研究[D].保定:河北農(nóng)業(yè)大學(xué),2008.
[6] 劉平,鄒向陽,劉孟軍,等.棗、酸棗不同部位花粉發(fā)芽率的研究[J].河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2004,27(2):48-49.
[7] 王玖瑞.棗樹雄性不育和胚敗育研究[D].保定:河北農(nóng)業(yè)大學(xué),2004.
[8] 劉孟軍,彭建營.棗、酸棗花粉貯藏及其發(fā)芽特性的研究[J].北京農(nóng)學(xué)院學(xué)報,1992,7(2):172 -177.
[9] 余義和,李桂榮,王新娟,等.蔗糖和硼酸濃度對金光杏梅花粉離體萌發(fā)的影響[J].山西果樹,2006.7(4):7-8.
[10] 刁永強(qiáng),耿文娟,廖康,等.新疆野生杏花粉量及花粉活力研究初報[J].新疆農(nóng)業(yè)科學(xué),2012,49(1):40-45.
[11] 趙長星,劉成連.培養(yǎng)基種類及蔗糖濃度對部分果樹花粉發(fā)芽率的影響[J].河北林果研究,2001,16(3):240-243.
[12] 黃家興,吳杰,安建東,等.凱特杏花粉的離體培養(yǎng)及影響因子分析[J].西北植物學(xué)報,2008,28(1):52-58.
[13] 張紹鈴,陳迪新,康瑯,等.培養(yǎng)基組分及pH值對梨花粉萌發(fā)和花粉管生長的影響[J].西北植物學(xué)報,2005,25(2):225 -230.
[14] 符碧.尿素和硼及生長調(diào)節(jié)劑對荔枝花粉萌發(fā)與生長的影響[J].云南師范大學(xué)學(xué)報,2001.21(3):62-65.