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    結(jié)核性腦膜炎腦脊液中TNF—α、IL—6和IL—18表達(dá)關(guān)系的研究

    2014-06-23 11:40:42杜一琴劉忠達(dá)
    中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生 2014年14期
    關(guān)鍵詞:介素腦膜炎結(jié)核性

    杜一琴+劉忠達(dá)

    [摘要] 目的 觀察結(jié)核性腦膜炎患者腦脊液中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)和白細(xì)胞介素-18(IL-18)的表達(dá)特征,關(guān)注其臨床價(jià)值。 方法 選取120例結(jié)核性腦膜炎患者作為觀察組,應(yīng)用ELISA檢測(cè)觀察組腦脊液中TNF-α、IL-6和IL-18的表達(dá)。 結(jié)果 觀察組不同分期患者TNF-α、IL-6和IL-18的表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,觀察組中TNF-α、IL-6和IL-18的表達(dá)具有相關(guān)性。 結(jié)論 結(jié)核性腦膜炎患者腦脊液中TNF-α、IL-6和IL-18高表達(dá)及協(xié)同性對(duì)促進(jìn)患者病程的進(jìn)展可能有一定價(jià)值,聯(lián)合檢測(cè)TNF-α、IL-6和IL-18的表達(dá)可能對(duì)判斷病情程度有一定價(jià)值。

    [關(guān)鍵詞] 結(jié)核性腦膜炎;腫瘤壞死因子-α;白細(xì)胞介素-6;白細(xì)胞介素-18

    [中圖分類號(hào)] R529.3 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701(2014)14-0076-03

    結(jié)核是一種世界性的嚴(yán)重威脅人類健康的感染性疾病,發(fā)展中國(guó)家患者占90%以上[1]。結(jié)核性腦膜炎(簡(jiǎn)稱結(jié)腦)是結(jié)核病發(fā)展過程中的嚴(yán)重病變,也是神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)核病最常見的類型,被認(rèn)為是肺外結(jié)核中的重癥結(jié)核病,是由結(jié)核桿菌侵入蛛網(wǎng)膜下腔而引起軟腦膜、蛛網(wǎng)膜的病變,進(jìn)而累及腦實(shí)質(zhì)和腦血管[2]。結(jié)腦的早期診斷主要依靠腦脊液常規(guī)、生化、細(xì)胞學(xué)檢測(cè)。近來研究顯示,結(jié)腦病變進(jìn)展中多種炎性因子表達(dá)異常,尤其是腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)和白細(xì)胞介素-18(IL-18)高表達(dá)被認(rèn)為與結(jié)核的進(jìn)展有關(guān)[3]。本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)120例結(jié)腦患者腦脊液中TNF-α、IL-6和IL-18的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè),關(guān)注其相關(guān)性及對(duì)病變進(jìn)展的價(jià)值,以期為臨床工作提供理論支持。

    1 資料與方法

    1.1 臨床資料

    收集2010年1月~2011年12月在我院住院治療的結(jié)核性腦膜炎患者作為觀察組,共120例,其中男68例,女52例,年齡24~58歲,平均(39.1±4.3)歲?;颊呔?jīng)頭顱CT 和MRI 檢測(cè)、體格檢查、腦脊液檢查(細(xì)胞學(xué)、生化檢測(cè)、微生物學(xué)以及病原學(xué)等)確診。排除標(biāo)準(zhǔn):①伴有其他嚴(yán)重感染的患者;②伴有嚴(yán)重內(nèi)臟器官疾病的患者;③自身免疫缺陷患者。本組患者Ⅰ期30例,其中男16例,女14例,年齡24~57歲,平均(39.0±4.1)歲;Ⅱ期40例,其中男21例,女19例,年齡25~58歲,平均(39.1±4.2)歲;Ⅲ期50例,其中男31例,女19例,年齡25~56歲,平均年齡(39.2±4.6)歲。三組患者一般臨床資料比較中差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,具有可比性。

    1.2 TNF-α、IL-6和IL-18的檢測(cè)方法

    TNF-α、IL-6和IL-18檢測(cè)試劑盒均購(gòu)自武漢博士德生物技術(shù)有限公司。抽取患者腦脊液2 mL后,應(yīng)用ELISA法檢測(cè)TNF-α、IL-6和IL-18的表達(dá),嚴(yán)格按實(shí)驗(yàn)步驟操作,嚴(yán)格質(zhì)控。

    1.3 分期

    根據(jù)英國(guó)醫(yī)學(xué)研究委員會(huì)的分類方法分為三期[4]。Ⅰ期:無特異性癥狀和體征、無意識(shí)模糊、無神經(jīng)系統(tǒng)功能受損;Ⅱ期:腦膜刺激征、輕度神經(jīng)系統(tǒng)功能受損(如神經(jīng)麻痹)、運(yùn)動(dòng)功能異常;Ⅲ 期:驚厥或抽搐、昏睡或昏迷、嚴(yán)重神經(jīng)系統(tǒng)功能受損。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    數(shù)據(jù)均采用SAS 6.12進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,兩組間比較采用t檢驗(yàn),同時(shí)對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行線性相關(guān)分析,以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 觀察組不同分期患者腦脊液中TNF-α、IL-6和IL-18表達(dá)的比較

    觀察組中Ⅲ期患者腦脊液中TNF-α、IL-6和IL-18的表達(dá)明顯高于Ⅰ期和Ⅱ期患者,見表1。

    2.2 觀察組患者腦脊液中TNF-α、IL-6和IL-18表達(dá)的相關(guān)性分析

    經(jīng)線性相關(guān)分析顯示,觀察組患者腦脊液中TNF-α和IL-6(r=0.47, P=0.0153)、TNF-α和IL-18(r=0.48, P=0.0132)、IL-6和IL-18(r=0.45, P=0.0187)的表達(dá)均呈正相關(guān)。

    3 討論

    結(jié)核性腦膜炎是由結(jié)核桿菌引起的腦膜和脊膜的非化膿性炎癥性疾病,不僅具有較高的致死率,也具有較高的致殘率[5,6]。本病一般呈慢性經(jīng)過,其癥狀常輕重不等,其潛在的病理在機(jī)體的表達(dá)常多種多樣[7]。在病變?cè)缙?,腦膜、脈絡(luò)叢和室管膜均具有炎癥反應(yīng),腦脊液生成增多,蛛網(wǎng)膜顆粒吸收下降,形成交通性腦積水,顱內(nèi)壓升高。近來多項(xiàng)研究認(rèn)為血清及腦脊液中相關(guān)細(xì)胞因子的異常表達(dá)是促進(jìn)病變進(jìn)展的重要因素[8,9]。細(xì)胞因子是由免疫系統(tǒng)細(xì)胞以及其他類型細(xì)胞主動(dòng)分泌的一類小分子量的可溶性蛋白質(zhì),包括淋巴因子、干預(yù)素、白介素、腫瘤壞死因子、趨化因子和集落刺激因子等,是免疫細(xì)胞間以及免疫系統(tǒng)細(xì)胞與其他類型細(xì)胞間的聯(lián)系中心。能有效改變分泌細(xì)胞自身或其他細(xì)胞的行為或性質(zhì),通過與細(xì)胞特異的膜受體而起作用[3]。與結(jié)核相關(guān)的細(xì)胞因子較多,而本實(shí)驗(yàn)研究的TNF-α、IL-6和IL-18均為促炎細(xì)胞因子的典型代表。TNF-α主要由活化的單核細(xì)胞產(chǎn)生,可以促進(jìn)炎癥反應(yīng),具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能的作用。TNF-α在作用過程中還可以介導(dǎo)細(xì)胞的凋亡過程,促進(jìn)細(xì)胞的再生過程,因此其作用較為廣泛。TNF-α還可以通過受體(TNFR1和TNFR2)促進(jìn)間質(zhì)細(xì)胞的增生繁殖。多項(xiàng)研究還顯示,TNF-α可以和細(xì)胞因子一起參與機(jī)體的生長(zhǎng)發(fā)育和維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定,對(duì)介導(dǎo)感染、創(chuàng)傷及免疫應(yīng)答反應(yīng)有一定價(jià)值[9]。TNF-α高表達(dá)后還可以損傷細(xì)胞、促進(jìn)趨化因子的運(yùn)動(dòng)、調(diào)節(jié)內(nèi)環(huán)境的作用[10]。也有觀點(diǎn)認(rèn)為,TNF-α具有廣泛的生物活性,具有強(qiáng)大的抗腫瘤作用,同時(shí)可以有效地抗病毒、細(xì)菌和激活T細(xì)胞,誘發(fā)炎癥反應(yīng)的作用[11]。IL-6由184個(gè)氨基酸殘基組成,是一種特異性的糖蛋白。IL-6主要由淋巴細(xì)胞產(chǎn)生,不僅是B細(xì)胞終末分化因子,還是啟動(dòng)炎性級(jí)聯(lián)反應(yīng)的重要的促炎介質(zhì)。也有研究顯示,IL-6可以誘導(dǎo)B細(xì)胞克隆和活化作用,同時(shí)能增強(qiáng)NK細(xì)胞的殺傷作用[12]。由于肺結(jié)核患者多呈現(xiàn)細(xì)胞免疫感染性,結(jié)核分枝桿菌能夠通過對(duì)機(jī)體單核巨噬細(xì)胞合成刺激而釋放IL-6,當(dāng)其抵達(dá)機(jī)體循環(huán)系統(tǒng)后,就會(huì)引起發(fā)熱等炎癥反應(yīng)[3]。IL-18也是體內(nèi)重要的促炎介質(zhì)。IL-18在結(jié)構(gòu)上屬于IL-1家族,主要以無活性的前體方式存在于人類單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和上皮細(xì)胞中。當(dāng)其在細(xì)胞內(nèi)的胱氨酸蛋白酶作用于裂解掉IL-1B部分后成為有活性的IL-18[13]。因此其表達(dá)升高時(shí)可以對(duì)NK細(xì)胞的增殖有重要作用。有觀點(diǎn)認(rèn)為,IL-18可以誘導(dǎo)Th0細(xì)胞向Th1細(xì)胞分化,此時(shí)IL-18的功能具有多樣性[14],即不僅具有經(jīng)典的促炎癥反應(yīng)作用,還具有調(diào)節(jié)凋亡、促進(jìn)趨化性和加速免疫性疾病的進(jìn)展。本實(shí)驗(yàn)的研究結(jié)果顯示,觀察組中Ⅲ期患者腦脊液中TNF-α、IL-6和IL-18的表達(dá)明顯高于Ⅰ期和Ⅱ期患者,提示TNF-α、IL-6和IL-18與結(jié)腦病變程度和病變發(fā)展有關(guān),也提示三者高表達(dá)可能是加速病變進(jìn)展的重要蛋白。實(shí)驗(yàn)顯示,患者腦脊液中TNF-α、IL-6和IL-18之間的表達(dá)具有正相關(guān)性,提示三者具有協(xié)同正向作用,也提示三者具有密切相關(guān)的級(jí)聯(lián)反應(yīng)。結(jié)核性腦膜炎患者TNF-α、IL-6和IL-18的升高可引起細(xì)胞的損害,主要是當(dāng)結(jié)核桿菌進(jìn)入腦膜后引起大量巨噬細(xì)胞聚集,此時(shí)TNF-α大量產(chǎn)生,并刺激機(jī)體分泌大量的IL-6和IL-18,一方面通過水解細(xì)胞膜磷脂,引起腦膜完整性破壞及神經(jīng)細(xì)胞損傷,另一方面TNF-α、IL-6和IL-18可以刺激機(jī)體的相關(guān)細(xì)胞產(chǎn)生大量的氧自由基和活性氧,加重對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的損傷,而神經(jīng)細(xì)胞壞死后也可加重氧自由基的生成。也有觀點(diǎn)認(rèn)為,TNF-α、IL-6和IL-18產(chǎn)生物具有強(qiáng)大的釋放TNF-α的能力,此時(shí)TNF-α的生成明顯增多,有效激活多種級(jí)聯(lián)因子,加速炎癥反應(yīng)的發(fā)生和進(jìn)展[15-17]。endprint

    總之,結(jié)核性腦膜炎患者腦脊液中TNF-α、IL-6和IL-18高表達(dá)及協(xié)同性對(duì)確定患者病程的進(jìn)展可能有一定價(jià)值,聯(lián)合檢測(cè)TNF-α、IL-6和IL-18的表達(dá)可能對(duì)判斷病情程度有一定價(jià)值。

    [參考文獻(xiàn)]

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    (收稿日期:2013-11-14)endprint

    總之,結(jié)核性腦膜炎患者腦脊液中TNF-α、IL-6和IL-18高表達(dá)及協(xié)同性對(duì)確定患者病程的進(jìn)展可能有一定價(jià)值,聯(lián)合檢測(cè)TNF-α、IL-6和IL-18的表達(dá)可能對(duì)判斷病情程度有一定價(jià)值。

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    總之,結(jié)核性腦膜炎患者腦脊液中TNF-α、IL-6和IL-18高表達(dá)及協(xié)同性對(duì)確定患者病程的進(jìn)展可能有一定價(jià)值,聯(lián)合檢測(cè)TNF-α、IL-6和IL-18的表達(dá)可能對(duì)判斷病情程度有一定價(jià)值。

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    (收稿日期:2013-11-14)endprint

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