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    701跌打鎮(zhèn)痛膏活血化瘀實(shí)驗(yàn)研究

    2014-05-21 07:27:04郭秋平郭健敏汪玉芳鄧慧敏肖百全
    中國藥理學(xué)通報(bào) 2014年6期
    關(guān)鍵詞:明顯改善精制容積

    楊 威,郭秋平,郭健敏,汪玉芳,鄧慧敏,肖百全

    (1.廣州醫(yī)藥研究總院有限公司藥物非臨床評價(jià)研究中心,廣東廣州 510240;2.廣州白云山制藥股份有限公司白云山何濟(jì)公制藥廠,廣東廣州 510410)

    701跌打鎮(zhèn)痛膏主要由土鱉蟲、草烏、馬錢子、大黃、水楊酸甲脂等14味藥物組成,具有活血止痛,散瘀消腫,祛風(fēng)勝濕的功效,臨床上主要應(yīng)用于急、慢性扭挫傷,慢性腰腿痛,風(fēng)濕關(guān)節(jié)痛等病癥,是中國外用貼膏類出口第一產(chǎn)品。雖然701跌打鎮(zhèn)痛膏已經(jīng)上市銷售多年,在臨床上也取得了一定的療效,但是其活血化瘀作用目前尚未見相關(guān)實(shí)驗(yàn)報(bào)道。為進(jìn)一步明確701跌打鎮(zhèn)痛膏的活血化瘀作用,了解其作用特點(diǎn)而進(jìn)行本研究。

    1 材料與方法

    1.1 藥品和試劑 701跌打鎮(zhèn)痛膏,廣州白云山制藥股份有限公司白云山何濟(jì)公制藥廠市售產(chǎn)品,批號(hào)為U1045。精制狗皮膏:天津同仁堂集團(tuán)股份有限公司產(chǎn)品,批號(hào)為AX01;酚妥拉明,廣東環(huán)球制藥有限公司生產(chǎn),批號(hào)100203。

    1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SD大鼠:5-6周齡,72只,♀♂各半;ICR小鼠:5~6周齡,70只,♀♂各半,大小鼠均為SPF級(jí),均從湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司購進(jìn),實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證號(hào)為HANSLKJ20121767、HNASLK20121327。

    1.3 儀器設(shè)備 足容積測定儀,本室根據(jù)毛細(xì)管放大法自制;BX-40解剖顯微鏡和Image圖像分析系統(tǒng),Olympus。

    1.4 方法

    1.4.1 對自體血致SD大鼠足跖血腫模型的影響[1]大鼠實(shí)驗(yàn)前按右后足容積大小隨機(jī)均衡分為空白對照組、模型對照組、精制狗皮膏組、701患處給藥組、701腹部貼敷給藥低、高劑量組。除空白組動(dòng)物外,其余動(dòng)物均無菌操作下從尾靜脈取血0.15 ml,取出的血液立刻注入采血大鼠右后足跖底部造成血腫,空白對照組注射等容積的生理鹽水。注射完畢后立即給予相應(yīng)的藥物。分別測定造模后6 h、2 d大鼠的右后足足容積。造模后d 3、d 5給藥結(jié)束后,每組分別處死4、8只大鼠,切取大鼠造模部位足跖皮膚并進(jìn)行組織學(xué)觀察。大鼠給藥量為 0.36、1.44貼/kg、0.125貼/只(患部給藥),精制狗皮膏藥大鼠給藥量為0.8貼/kg?;疾糠筚N和腹部敷貼法給藥,至少保持藥物和動(dòng)物皮膚直接接觸6 h。

    1.4.2 對小鼠微循環(huán)障礙模型的影響[2]ICR小鼠按體重和性別隨機(jī)均衡分為空白對照組、模型組、狗皮膏組、酚妥拉明組、701低、中、高劑量組。分組后各組按照給藥要求進(jìn)行腹部敷貼給藥,每天1次,連續(xù)5 d。末次給藥2h后,烏拉坦(25%)溶液按7 ml·kg-1麻醉,暴露腸系膜,除空白對照組外,其余各實(shí)驗(yàn)組均滴加0.1 ml注射用鹽酸腎上腺素造成腸系膜微循環(huán)障礙模型,并在解剖顯微鏡下觀察,回盲部分別選取10~20μm之間的細(xì)動(dòng)脈和20~30μm之間的細(xì)靜脈各1支,用10×10倍鏡進(jìn)行觀察。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后采用圖像分析軟件(Image-plus 4.0)測量動(dòng)、靜脈直徑和判斷各動(dòng)物血流情況并分級(jí)。給藥方法同“1.4.1”,小鼠給藥量為0.52、1.04、2.08貼/kg,精制狗皮膏藥小鼠給藥量為 1.04貼/kg。

    1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有計(jì)量數(shù)據(jù)均輸入SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行ONE-WAY ANOVA統(tǒng)計(jì)分析,并采用ˉx±s表示。

    2 結(jié)果

    2.1 對自體血致SD大鼠足跖血腫模型的影響 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明(Tab 1-3):各實(shí)驗(yàn)組治療效果排序?yàn)?01患處給藥組>狗皮膏藥組>701貼敷高劑量組>701貼敷低劑量組。

    2.2 對小鼠微循環(huán)障礙模型的影響 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明(Tab 3):701中、高劑量組微循環(huán)障礙有明顯改善,能夠使動(dòng)、靜脈直徑增寬,與模型組相比差異有顯著性,低劑量組未見明顯改善。酚妥拉明能明顯改善模型動(dòng)物的微循環(huán)障礙。精制狗皮膏改善微循環(huán)作用不明顯,能使靜脈直徑增寬,但對動(dòng)脈直徑未見明顯改善,對于血流情況亦未見明顯改善。

    Tab 1 Effect of 701 on rats’paw volume(±s,n=12)

    Tab 1 Effect of 701 on rats’paw volume(±s,n=12)

    ##P<0.01 vs negative control group;**P<0.01 vs control group

    Group Dose/paste·kg-1 Volume of rats’feet/ml 0.19 Control - 1.61±0.20 1.77±0.21 1.62±0.13 Goupigaoyao 0.125paste/rat 1.62±0.18 2.04±0.24**## 1.74±0.17 Affected part administration 0.125paste/rat 1.62±0.18 1.91±0.19** 1.62±0.11 701 lose dose 0.36 1.61±0.20 1.76±0.20 1.59±0.18 701 high dose 1.44 1.60±0.19 1.70±0.25 1.55±0 Basic volume 6h after molding 2d after molding Negative control - 1.65±0.21 1.64±0.19 1.63±.20

    Tab 2 Results of histological examination

    Tab 3 Effect of 701 on microcirculation disturbance model(±s)

    Tab 3 Effect of 701 on microcirculation disturbance model(±s)

    ##P<0.01 vs negative control group;*P<0.05,**P<0.01 vs control group

    Group Diameter of the vein/mm Gradeof blood flow Negativecontrol 104.6±33.1** 52.5±17.4** 3.0±0.9 Diameter of the artery/mm**Control 61.5±21.9## 36.1±11.9## 1.2±0.6##701 lowdose 87.3±44.4 44.6±17.2 1.3±0.7 701 middle dose 94.7±32.2* 50.6±26.9* 1.4±0.8 701 high dose 101.5±23.1** 51.1±11.3* 1.9±0.7*Goupigaoyao 107.1±55.4* 44.5±26.9 1.4±0.8 Phentolamine 129.3±27.1** 58.8±14.9** 2.2±0.8*

    3 討論

    本研究結(jié)果表明,注射自體血6 h后,狗皮膏藥組、701患部給藥組足容積明顯增大,其它組足容積有增大的趨勢,但未見統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,該現(xiàn)象可能與自體血注射入局部組織中引起急性炎癥反應(yīng)有關(guān),但24 h后各實(shí)驗(yàn)組足容積相近,未見明顯差別,表明急性炎癥反應(yīng)得到緩解。701患部給藥3 d、5 d后與模型組相比局部病變明顯減輕,表明701跌打鎮(zhèn)痛膏對自體血腫模型具有一定的改善作用。701跌打鎮(zhèn)痛膏腹部敷貼給藥高、低劑量組也有一定的改善作用,但均弱于患部給藥組,表明701跌打鎮(zhèn)痛膏具有活血化瘀作用,且局部給藥作用強(qiáng)于全身給藥。精制狗皮膏藥也具有一定的改善作用,但弱于701跌打鎮(zhèn)痛膏。

    微循環(huán)障礙是跌打損傷局部瘀血難以快速吸收的重要原因之一,為進(jìn)一步考察701跌打鎮(zhèn)痛膏的活血化瘀作用,本研究還選用了腎上腺素誘發(fā)的小鼠微循環(huán)障礙模型進(jìn)行研究。701中劑量、高劑量能改善鹽酸腎上腺素引起的動(dòng)靜脈血管的收縮,使動(dòng)脈和靜脈管徑增寬,改善血流障礙情況,表明701跌打鎮(zhèn)痛膏具有改善微循環(huán)障礙的作用。精制狗皮膏藥也具有增加靜脈管徑的作用,但對動(dòng)脈和血流狀態(tài)未見明顯改善作用。

    根據(jù)上述研究結(jié)果可判斷701跌打鎮(zhèn)痛膏具有明顯的活血化瘀作用,特別是對局部血液循環(huán)障礙和皮下?lián)p傷出血所致的瘀血應(yīng)該具有明顯改善作用,值得進(jìn)一步深入研究和推廣應(yīng)用。

    參考文獻(xiàn):

    [1] 肖百全,朱少璇,楊 威.角叉菜膠致大鼠足腫脹模型探討及其機(jī)制研究 [J].中國實(shí)用醫(yī)藥,2008,23(3):63-4.

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    [2] 李偉霞,黃美艷,唐于平,等.大鼠急性血瘀模型造模方法的研究與評價(jià)[J].中國藥理學(xué)通報(bào),2011,27(12):1761-5.

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