水通道蛋白4抗體對視神經脊髓炎的診斷價值

陳淑媛 吳哲 付賀飛 張鳳嬌

水通道蛋白4抗體對視神經脊髓炎的診斷價值

陳淑媛 吳哲 付賀飛 張鳳嬌

目的 檢測中樞神經系統(tǒng)(CNS)脫髓鞘疾病患者血清水通道蛋白4抗體(即NMO-Ig G)的表達,并探討其對視神經脊髓炎(neuromyelitis optica,NMO)的診斷價值。方法 收集2011-01-2013-01就診于中國醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院神經內科的CNS脫髓鞘疾病患者50例﹝其中NMO患者10例,長節(jié)段橫慣性脊髓炎(longitudinally extensive transverse myelitis,LETM)患者10例,多發(fā)性硬化(multiple sclerosis,MS)患者30例﹞及30名健康人的血清,采用ELISA試劑盒檢測血清NMO-Ig G水平。結果 NMO組、LETM組、MS組及健康對照組NMO-Ig G的陽性率分別為60%(6/10)、50%(5/10)、10%(3/30)、0(0/30)。NMO組與LETM組NMO-IgG陽性率均高于MS組(＜0.05)。NMO-IgG診斷NMO的靈敏度為60%,特異度為95%(57/60)。結論 NMO和LETM患者血清NMO-IgG陽性率均較高,支持兩者同屬于視神經脊髓炎疾病譜(neuromyelitis optica spectrum disorders,NMOSD)；NMO的診斷標準仍需建立在臨床及MRI診斷的基礎之上,NMO-IgG可作為一項重要的輔助診斷指標,有助于NMO的鑒別診斷。

視神經脊髓炎；多發(fā)性硬化；水通道蛋白4抗體

視神經脊髓炎(neuromyelitis optica,NMO),又稱Devic綜合征、Devic病,是視神經和脊髓相繼或同時受累的急性或亞急性脫髓鞘病變。在過去幾十年間,對于NMO是一種獨立的疾病,還是多發(fā)性硬化(multiple sclerosis,MS)的亞型,一直存在爭議。直至2004年,隨著NMO特異性抗體NMO-IgG及其特異性靶抗原水通道蛋白4(aquaporin-4,AQP-4)的發(fā)現(xiàn),NMO被認為是一種自身免疫性水通道病,是有別于MS的獨立疾?。?-2］。2006年,該抗體被納入NMO新的診斷標準中。本研究采用ELISA試劑盒檢測患者血清NMOIgG水平,旨在探討其對NMO的診斷價值及臨床意義。

1 對象和方法

1.1 研究對象 收集2011-01-2013-01就診于中國醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院神經內科的中樞神經系統(tǒng)(CNS)脫髓鞘疾病患者50例,其中NMO患者10例,長節(jié)段橫慣性脊髓炎(longitudinallyextensive transverse myelitis,LETM)患者10例, MS患者30例。入選標準：10例NMO患者在不考慮NMO-Ig G陽性的條件下符合2006年的NMO診斷標準［3］,30例MS患者在排除了NMO及其疾病譜的前提下,符合2010年的Mcdonald MS診斷標準［4］,10例LETM患者MRI檢查結果顯示脊髓病灶大于3個椎體節(jié)段［5］。另選20～60歲健康志愿者30名為對照組,其中男10名,女20名。收集患者臨床病例資料,包括性別、起病年齡、是否伴有嚴重視神經炎(optic neuritis,ON)、MRI顯示脊髓病灶是否超過3個椎體節(jié)段。

1.2 方法

1.2.1 主要試劑和儀器：人AQP-4抗體酶聯(lián)免疫試劑盒(編號CSB-E13568h)由武漢華美生物有限公司生產。KHB ST-360酶標儀由上海科華實驗系統(tǒng)有限公司生產。其他包括湘儀產TG16-W微量高速離心機,電熱恒溫培養(yǎng)箱,系列可調節(jié)微量加樣器及吸頭,干凈的試管、量筒、容量瓶等。

1.2.2 NMO-Ig G檢測：抽取清晨空腹靜脈血,以3000 r/min(離心半徑5.5 cm)離心10 min,分離血清,置-40℃儲存?zhèn)溆?。嚴格按照AQP-4抗體酶聯(lián)免疫試劑盒說明書操作,為保證實驗的準確性,標準品及樣品均設雙孔測定,加樣時均用微量加樣器定量加取,每個血清標本更換一個吸頭,采用同一批號試劑,由同一人操作,嚴格控制反應時間、反應溫度等。采用酶標儀檢測NMO-Ig G的吸光度﹝(λ)﹞值,以對照組的平均(λ)值+3倍標準差為判斷NMO-IgG陽性的臨界值。

1.3 統(tǒng)計學處理 使用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件,計數資料以率表示,采用連續(xù)校正χ2檢驗及Fisher確切概率法,計量資料以均數±標準差表示,采用檢驗。以＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 血清NMO-IgG水平 NMO組NMO-Ig G陽性率為60%(6/10),LETM組為50%(5/10), MS組為10%(3/30),對照組為0(0/30)。NMO組和LETM組NMO-Ig G陽性率均高于MS組(＜0.05),NMO組與LETM組、MS組與對照組NMO-IgG陽性率間比較無統(tǒng)計學差異(= 1.000；=0.237)。NMO-IgG診斷NMO的靈敏度為60%,以MS為對照,其診斷NMO的特異度為90%(27/30)；以MS+對照組為對照,其特異度為95%(57/60)。

2.2 臨床及MRI比較 對NMO-IgG陽性脫髓鞘患者與陰性脫髓鞘患者的臨床特征進行比較,兩組患者間脊髓病灶超過3個椎體節(jié)段比較有統(tǒng)計學差異(＜0.05),而發(fā)病年齡、伴有嚴重ON間比較無統(tǒng)計學差異(表1)。

表1 NMO-IgG陽性與陰性脫髓鞘患者臨床及MRI特征比較

3 討論

亞洲MS患者視神經和脊髓多受累,而NMO也是以視神經和脊髓受累為主,兩者的診斷和鑒別診斷存在一定困難。但兩者發(fā)病機制、免疫病理、臨床表現(xiàn)、治療及預后均有所不同［6］,因此,早期確診對于指導臨床用藥、改善預后具有重要意義。本研究采用ELISA法檢測50例CNS脫髓鞘疾病患者血清NMO-IgG水平,結果顯示其診斷NMO的靈敏度為60%,特異度為95%,提示NMO-Ig G的檢測有助于NMO的診斷。除NMO外,在一些NMO相關性疾病中也可存在此抗體。2010年歐洲神經病學聯(lián)盟關于NMO診治的指南中明確定義了視神經脊髓炎疾病譜(neuromyelitis optica spectrum disorders,NMOSD)。NMOSD系指潛在免疫病理機制與NMO相似但臨床受累局限,不完全符合NMO者,包括：(1)受累部位局限的類型,如LETM、雙側ON和復發(fā)性孤立性ON；(2)在器官特異性或非器官特異性自身免疫疾病背景下發(fā)生的NMO；(3)伴有癥狀性或無癥狀性腦內病灶的不典型病例；(4)亞洲視神經脊髓型MS［7］。該研究結果顯示,NMO-Ig G陽性率在NMO組和MS組間有統(tǒng)計學差異,提示NMO為不同于MS的獨立的自身免疫通道病,為其鑒別診斷提供了重要生物學依據。NMO-Ig G作為一項支持診斷條件可明顯提高診斷NMO/NMOSD的特異度［8］,能夠在一定程度上鑒別NMO及其他CNS疾病,尤其是在綜合了臨床、影像、寡克隆帶等信息后仍無法確診時,NMO-IgG有助于NMO與MS的鑒別。但需要注意的是,NMO的診斷不能過度依賴于NMO-IgG檢測,而應注重結合患者臨床特點及MRI表現(xiàn)進行診斷。

作為NMO患者血清中的特異性生物學標記物,NMO-Ig G不僅有助于NMO的診斷和鑒別診斷,而且對預測NMO的預后及指導治療也有重要意義。幾項針對孤立脊髓或視神經癥狀可能發(fā)展為經典NMO患者的血清NMO-Ig G滴度變化的研究顯示,血清NMO-IgG陽性可能預示癥狀惡化或向NMO轉化［9-11］。本組10例LETM患者中5例NMO-IgG陽性,但由于開展NMO-IgG檢測的時間較短,目前還沒有較長時間的臨床隨訪結果。對于NMO-Ig G陽性的這一大類CNS脫髓鞘疾病,目前傾向于診斷為NMOSD［12］,并建議盡早給予免疫抑制治療。本研究中,LETM和NMO組間NMO-Ig G陽性率的差異無統(tǒng)計學意義,也為兩者同屬于NMOSD提供支持。另外,鑒于NMOIg G在NMO發(fā)病機制的重要作用,利用非致病性的單克隆抗體或小分子阻滯劑來阻滯NMO-IgG與AQP-4的相互作用已成為NMO治療的新的研究靶點［13-14］。

關于NMO-IgG滴度水平與NMO臨床的關系,目前的研究認為影響因素主要有脊髓病灶長、腦組織受累嚴重、視力受損嚴重、發(fā)病年齡早、預后差、復發(fā)次數、疾病活動。本次研究對50例患者的性別、起病年齡、是否伴有嚴重ON、脊髓病灶是否超過3個椎體節(jié)段進行統(tǒng)計分析,結果顯示脊髓病灶超過3個節(jié)段在NMO-Ig G陽性與陰性組間有明顯統(tǒng)計學差異,提示NMO-IgG陽性與脊髓病灶長有關。

綜上所述,NMO-IgG有助于NMO的診斷和鑒別診斷,但當患者的臨床特點及MRI表現(xiàn)與NMO-Ig G結果不符時,應結合臨床表現(xiàn)和影像學特征進行綜合診斷。

［1］Lennon VA,Wingerchuk DM,Kryzer TJ,et al.A serum autoantibody marker of neuromyelitis optica：distinction from multiple sclerosis［J］.Lancet,2004,364(9451)：2106-2112.

［2］Lennon VA,Kryzer TJ,Pittock SJ,et al.Ig G marker of optic-spinal multiple sclerosis binds to the aquaporin-4 water channel［J］.J Exp Med,2005,202(4)：473-477.

［3］Wingerchuk DM,Lennon VA,Pittock SJ,et a1.Revised diagnostic criteria for neuromyelitis optica［J］.Neurology,2006, 66(10)：1485-1489.

［4］Polman CH,Reingold SC,Banwell B,et al.Diagnostic criteria for multiple sclerosis：2010 Revisions to the McDonald criteria［J］.Ann Neurol,2011,69(2)：292-302.

［5］胡學強.對急性橫貫性脊髓炎的再認識［J］.中國神經免疫學和神經病學雜志,2011,18(4)：229-231.

［6］吳衛(wèi)平.視神經脊髓炎與多發(fā)性硬化的早期鑒別［J］.中國神經免疫學和神經病學雜志,2011,18(4)：232-523.

［7］Sellner J,Boggild M,Clanet M,et al.EFNS guidelines on diagnosis and management of neuromyelitis optica［J］.Eur J Neurol,2010,17(8)：1019-1032.

［8］Yang Y,Huang DH,Wu WP,et al.The role of aquaporin-4 antibodies in Chinese patients with neuromyelitis optica［J］.J Clin Neurosci,2013,20(1)：94-98.

［9］Weinshenker BG,Wingerchuk DM,Vukusic S,et al.Neuromyelitis optica Ig G predicts relapse after longitudinally extensive transverse myelitis［J］.Ann Neurol,2006,59(3)：566-569.

［10］Matiello M,Lennon VA,Jacob A,et al.NMO-IgG predicts the outcome of recurrent optic neuritis［J］.Neurology, 2008,70(23)：2197-2200.

［11］Akman-Demir G,Tüzün E.Prognostic implications of aquaporin-4 antibody status in neuromyelitis optica patients［J］.J Neurol,20ll,258(3)：464-470.

［12］Bizzoco E,Lolli F,Repice AM,et a1.Prevalence of neuromyelitis optica spectrum disorder and phenotype distribution［J］.J Neurol,2009,256(11)：1891-1898.

［13］Ratelade J,Verkman AS.Neuromyelitis optica：Aquaporin-4 based pathogenesis mechanisms and new therapies［J］.Int J Biochem Cell Biol,2012,44(9)：1519-1530.

［14］Tradtrantip L,Zhang H,Saadoun S,et al.Anti-aquaporin-4 monoclonal antibody blocker therapy for neuromyelitis optica［J］.Ann Neurol,2012,71(3)：314-322.

WU Zhe,Email：zhe_wu@sina.com

Objective To detect the expression of serum aquaporin-4 antibodies(NMO-IgG)in patients with central nervous system(CNS)demyelinative diseases and to analyze its diagnostic value to neuromyelitis optica(NMO).Methods The study included 10 NMO patients,10 longitudinally extensive transverse myelitis (LETM)patients,30 multiple sclerosis(MS)patients and 30 healthy people as control.The level of serum NMO-IgG was detected by ELISA.Results The positive ratios of serum NMO-IgG were 60%(6/10)in NMO patients,50%(5/10)in LETM patients,10%(3/30)in MS patients and 0(0/30)in healthy people.The positive ratios in NMO and LETM were higher than that in MS(＜0.05).The sensitivity of NMO-IgG was 60%for NMO diagnosis,and its specificity reached 95%.Conclusions The positive ratios of serum NMO-IgG were higher in NMO and LETM patients,which supports the opinion that they both belong to neuromyelitis optica spectrum disorders(NMOSD),the diagnosis of NMO should be based on clinical characteristics and MRI manifestation rather than NMO-IgG,but it can help to differentiate NMO from other CNS diseases.

neuromyelitis optica；multiple sclerosis；aquaporin-4

R744.52

：A

：1006-2963(2014)05-0332-03

2014-01-02)

(本文編輯：時秋寬)

10.3969/j.issn.1006-2963.2014.05.007

110004中國醫(yī)科大學附屬盛京醫(yī)院神經功能科(陳淑媛)；110001中國醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院神經內科(吳哲、付賀飛、張鳳嬌)

吳哲,Email：zhe_wu@sina.com