鼻舒適片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

陽文武，肖 琦

（重慶市萬州區(qū)食品藥品檢驗(yàn)所，重慶 萬州 404100）

鼻舒適片是由蒼耳子、野菊花、鵝不食草、白芷、防風(fēng)、墨旱蓮、白芍等11味藥組方，收載于《國家藥品標(biāo)準(zhǔn)·中藥成方制劑（第7冊）》，具有清熱消炎、通竅的功效，用于治療慢性鼻炎引起的噴嚏、流涕、鼻塞、頭痛，過敏性鼻炎，慢性鼻竇炎。原標(biāo)準(zhǔn)收載有3個鑒別項，包括撲爾敏的薄層和2個化學(xué)鑒別，檢驗(yàn)項目不夠全面，為更有效地控制其質(zhì)量，提高標(biāo)準(zhǔn)，筆者采用薄層色譜法對方中蒼耳子、野菊花、鵝不食草進(jìn)行定性鑒別，并采用高效液相色譜法對方中白芷的歐前胡素進(jìn)行含量測定?，F(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

島津LC－20A型高效液相色譜儀；硅膠G薄層板（青島海洋化工廠）；聚酰胺膜（青島海洋化工廠）。歐前胡素對照品（批號為110826－201013，含量以99．6%計，供含量測定用）、蒙花苷對照品（批號為111528－200606）、蒼耳子對照藥材（批號為120947－200405）、野菊花對照藥材（批號為 120927－200310）、鵝不食草對照藥材（批號為121551－200902）均由中國藥品生物制品檢定所提供；鼻舒適片（廣東省博羅先鋒藥業(yè)集團(tuán)有限公司，批號分別為 000045，000057，000069）；甲醇為色譜純，水為超純水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2．1 薄層色譜鑒別

蒼耳子[1－3]：取本品 12片，加甲醇 25 mL超聲處理 20 min，濾過，濾液濃縮至2 mL作為供試品溶液。另取蒼耳子對照藥材1 g及按處方比例除去蒼耳子的陰性樣品2 g，同法制成對照藥材溶液及陰性對照品溶液。照薄層色譜法[2010年版《中國藥典（一部）》附錄ⅥB]試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各5～10 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇－冰醋酸－水 (4∶1∶5)上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置氨蒸氣中熏至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)，而陰性對照品溶液無干擾(圖1 A)。

野菊花[1，4]：取本品 15 片，加甲醇 25 mL，超聲處理 30 min，濾過，濾液濃縮至2 mL作為供試品溶液。另取野菊花對照藥材1 g及按處方比例除去野菊花的陰性樣品2 g，同法制成對照藥材溶液及陰性對照品溶液。再取蒙花苷對照品，加甲醇制成每1 mL含0．2 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法[2010年版《中國藥典（一部）》附錄Ⅵ B]試驗(yàn)，吸取上述4種溶液各2 μL，分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上，以乙酸乙酯－丁酮－三氯甲烷－甲酸－水(15∶15∶6∶4∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以 2%三氯化鋁溶液，熱風(fēng)吹干，置紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液和對照品溶液色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，而陰性對照品溶液無干擾（圖1 B）。

鵝不食草[1，5－6]：取本品 15 片，加二氯甲烷 30 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。另取鵝不食草對照藥材1 g及按處方比例除去鵝不食草的陰性樣品2 g，同法制成對照藥材溶液及陰性對照品溶液。照薄層色譜法[2010年版《中國藥典（一部）》附錄Ⅵ B]試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各 5 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠 G薄層板上，以石油醚（60～90 ℃ ）－ 二氯甲烷（3∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%的硫酸乙醇溶液，在110℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，而陰性對照品溶液無干擾（圖 1 C）。

2．2 含量測定[1]

2．2．1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

圖1 薄層色譜圖

色譜柱：迪馬 C18柱（250 mm ×4．6 mm，5 μm）；流動相：甲醇 －水（60 ∶40）；流速：1．0 mL ／min；檢查波長：300 nm。理論板數(shù)按歐前胡素峰計算應(yīng)不低于3 000。

2．2．2 溶液制備

取本品 10片，除去包衣，研細(xì)，混勻，稱取約 0．5 g，精密稱定，置50 mL具塞錐形瓶中，精密加入甲醇 10 mL，密塞，稱定質(zhì)量，超聲處理（250 W，頻率 33 kHz）1 h，放冷，再稱定質(zhì)量，用甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。精密稱取歐前胡素對照品適量，加甲醇制成每1 mL含約20 μg的溶液，作為對照品溶液。按處方工藝制備不含白芷的樣品，同供試品溶液制備方法制成陰性對照品溶液。

2．2．3 方法學(xué)考察

專屬性試驗(yàn)：分別精密吸取對照品溶液、供試品溶液和陰性對照品溶液各10 μL，依法進(jìn)樣測定。結(jié)果陰性對照品溶液無干擾，見圖 2。

圖2 高效液相色譜圖

線性關(guān)系考察：分別精密吸取質(zhì)量濃度為0．023 43 g／L的歐前胡素對照品溶液 1，5，10，15，20，25 μL，進(jìn)樣，測定峰面積，以峰面積對進(jìn)樣量進(jìn)行回歸，得回歸方程 Y＝2×106X＋460，r＝0．999 7(n ＝6)。結(jié)果表明，歐前胡素進(jìn)樣量在 0．023 43 ～0．585 75 μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系。

精密度試驗(yàn)：精密吸取對照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，每次10 μL。結(jié)果的 RSD＝0．98%（n＝6），表明儀器精密度良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一供試品溶液，每2 h進(jìn)樣1次，連續(xù)進(jìn)樣5次。結(jié)果峰面積的 RSD＝1．2%，表明供試品溶液中歐前胡素在10 h內(nèi)穩(wěn)定。

重復(fù)性試驗(yàn)：取同一批樣品6份，按樣品溶液制備方法操作，測定歐前胡素峰面積。結(jié)果的 RSD＝1．8%，表明方法重復(fù)性良好。

加樣回收試驗(yàn)：精密稱取已知含量的樣品6份，分別加入歐前胡素對照品適量，按2．2．2項下方法處理，依法測定，計算回收率，結(jié)果見表1。

表1 歐前胡素加樣回收試驗(yàn)結(jié)果(n＝6）

2．2．4 樣品含量測定

取本品3批，按含量測定方法進(jìn)行測定，外標(biāo)法計算。結(jié)果批號分別為000045，000057，000069的樣品中歐前胡素的含量分別為 0．086，0．085，0．082 mg ／片。

3 討論

提取溶劑選擇：分別用50%甲醇、70%甲醇作為提取溶劑，結(jié)果表明以甲醇為提取溶劑所測得含量最高。

提取方式考察：對超聲處理1 h及水浴回流1 h兩種提取方式進(jìn)行考察，結(jié)果表明以超聲處理所測得含量較高。

超聲處理時間考察：分別用甲醇超聲30，60，75 min，結(jié)果表明超聲處理60 min所測得含量較高，且與超聲處理75 min所測得含量相當(dāng)，故最終選擇以甲醇超聲60 min來制備供試品溶液。

檢測波長的選擇：取歐前胡素對照品溶液在200～400 nm波長之間進(jìn)行紫外光譜掃描，測得其最大吸收波長為300 nm，故以300 nm為檢測波長。

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