丹芪六君顆粒對荷瘤小鼠化療后胃腸道不良反應影響的實驗研究

林青 樊衛(wèi)飛 王峻

（江蘇省老年醫(yī)院，江蘇南京 210024）

丹芪六君顆粒對荷瘤小鼠化療后胃腸道不良反應影響的實驗研究

林青 樊衛(wèi)飛 王峻

（江蘇省老年醫(yī)院，江蘇南京 210024）

目的：探討丹芪六君復方顆粒對荷瘤鼠化學藥物治療后胃腸道不良反應的影響。方法：小鼠隨機分為正常組、模型組、奧美拉唑鈉組和丹芪六君顆粒高、低劑量組，除正常組外其余各組小鼠均接種腫瘤細胞并予順鉑腹腔注射，各組分別用藥14d。觀察用藥前后各組小鼠的體重、進食量、瘤重，統(tǒng)計抑瘤率。結(jié)果：丹芪六君顆粒高劑量組能夠顯著提高化療小鼠的體重；丹芪六君顆粒高、低劑量組均可以明顯提高化療小鼠的進食量，降低瘤重；丹芪六君顆粒高、低劑量組小鼠瘤重顯著低于奧美拉唑鈉組；丹芪六君顆粒高劑量組抑瘤率顯著高于奧美拉唑鈉組。結(jié)論：丹芪六君顆粒能顯著緩解荷瘤小鼠化療后胃腸道不良反應，增加體重，增加進食量，抑制瘤塊生長速度。

荷瘤小鼠 化療 胃腸道反應 丹芪六君顆粒

化療是治療中晚期惡性腫瘤的常用方法，單純化療往往引起較嚴重的不良反應，其中最為常見的是胃腸道的不良反應，出現(xiàn)惡心嘔吐、食欲減退、腹脹脘滿、大便不調(diào)等癥狀，進一步導致體重下降，形體消瘦，生活質(zhì)量減退，不能進一步耐受治療等。丹芪六君顆粒是在古方六君子湯基礎上加紫丹參、黃芪而成。古方主治脾胃氣虛兼有痰濕阻絡，癥見惡心嘔吐、胸脘痞悶、四肢無力、大便不調(diào)等，其所治療諸癥恰恰為化療中常見。本研究在古方基礎上加用丹參、黃芪，取其活血化瘀、益氣扶正之用，通過建立荷瘤小鼠模型，進一步探討丹芪六君顆粒對化療后荷瘤小鼠胃腸道反應、體重、瘤重及存活情況的影響。

1 實驗材料

1.1 實驗動物清潔級昆明小鼠50只，雄性，體重（20±2）g，購自上海伊萊克斯實驗動物中心。

1.2 瘤株腹水型S180瘤株、L929細胞株由江蘇省腫瘤醫(yī)院中心實驗室提供。

1.3 藥品及試劑注射用奧美拉唑鈉（阿斯利康制藥有限公司，規(guī)格：40mg/支，批號：H20030945）；丹芪六君顆粒主要由丹參顆粒、黃芪顆粒、黨參顆粒、白術顆粒、茯苓顆粒、甘草顆粒、陳皮顆粒、半夏顆粒組成，劑量比為2∶2∶1∶1∶1∶0.5∶1∶1，顆粒劑購自江陰天江藥業(yè)有限公司；注射用順鉑粉針劑（齊魯制藥有限公司，規(guī)格：20mg/支，批號：H37021357）。

2 實驗方法

2.1 分組與造模[1]將小鼠隨機分為5組，每組10只，分別為：正常組、模型組、丹芪六君顆粒高劑量組、丹芪六君顆粒低劑量組、奧美拉唑鈉組。除正常組外其余各組大鼠均接種腫瘤細胞并化療。

無菌條件下抽取傳代第8天的S180小鼠的腹水，按1∶3比例用生理鹽水稀釋，反復沖打，充分混勻，在顯微鏡下計數(shù)，用生理鹽水調(diào)整細胞濃度為1×107/mL，取0.2mL（含瘤細胞數(shù)2×106個）于每鼠右側(cè)腋窩下碘酊消毒后皮下接種。瘤株接種前，均用0.2%臺盼藍染色，計算活細胞數(shù)為95%～98%。從抽取腹水時開始，到移植完最后一只小鼠的總時間控制在60min內(nèi)。小鼠接種癌瘤株第10天，用生理鹽水將20mg順鉑稀釋成0.25mg/mL順鉑注射液，小鼠腹腔注射0.2mL/只，連續(xù)注射5d。

2.2 給藥正常組：不給藥；模型組：生理鹽水0.4mL/（kg·d）灌胃。根據(jù)人與小鼠藥物等效劑量（按體表面積換算）的2.5倍和10倍決定中藥顆粒組的給藥劑量。丹芪六君顆粒高劑量組：丹芪六君顆粒16g/（kg·d）灌胃；丹芪六君顆粒低劑量組：丹芪六君顆粒4g/（kg·d）灌胃；奧美拉唑鈉組：奧美拉唑鈉75mg/（kg·d）灌胃。

各組小鼠灌胃容積均為0.02mL/g，1次/d，連續(xù)14d。均于瘤細胞接種后第2天開始用藥，末次給藥24h后斷頸處死小鼠，稱取重量，剝?nèi)×鰤K以檢測相關指標。

2.3 觀察指標（1）小鼠用藥前后一般情況及體重、進食量變化；（2）瘤塊的重量，計算抑瘤率[2]：抑瘤率（%）=（模型組瘤重-給藥組瘤重）/模型組瘤重×100%。

3 實驗結(jié)果

3.1 一般情況比較與正常組小鼠比較，其余各組小鼠均逐漸出現(xiàn)進食量減少，體重減輕，毛發(fā)稀疏，運動遲緩等現(xiàn)象，以丹芪六君顆粒高劑量組最輕，丹芪六君顆粒低劑量組表現(xiàn)次之，奧美拉唑鈉組表現(xiàn)介于中間，模型組表現(xiàn)最差。

3.2 各組小鼠用藥前后體重的比較用藥前各組小鼠體重差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。用藥14d后，正常組與丹芪六君顆粒高劑量組小鼠體重與用藥前比較顯著增高（P＜0.01），其他組體重變化不顯著。用藥后，與模型組、奧美拉唑鈉組比較，正常組和丹芪六君顆粒高、低劑量組小鼠體重顯著增加（P＜0.01）。丹芪六君顆粒高劑量組小鼠體重顯著高于低劑量組（P＜0.01）。見表1。

表1 各組小鼠用藥前后平均體重的變化（±s）

表1 各組小鼠用藥前后平均體重的變化（±s）

注：與本組用藥前比較，**P＜0.01；與模型組用藥后比較，▲▲P＜0.01；與奧美拉唑鈉組用藥后比較，△△P＜0.01；與丹芪六君顆粒低劑量組用藥后比較，##P＜0.01。

組別動物數(shù)（只）體重（g）用藥后17.63±2.5丹芪六君顆粒高劑量組1019.45±1.727.26±3.1**▲▲△△##丹芪六君顆粒低劑量組1019.10±2.319.82±2.2▲▲△△奧美拉唑鈉組1017.84±2.716.95±2.1用藥前正常組917.42±2.428.13±2.5**▲▲△△模型組1016.52±2.6

3.3 用藥后各組小鼠進食量、瘤重的變化及各組抑瘤率比較

與模型組比較，正常組和丹芪六君顆粒高、低劑量組小鼠進食量顯著增加（P＜0.01）；與奧美拉唑鈉組比較，丹芪六君顆粒高劑量組進食量顯著增加（P＜0.01）。與模型組比較，丹芪六君顆粒高、低劑量組和奧美拉唑鈉組小鼠瘤重顯著降低（P＜0.01或P＜0.05）；與奧美拉唑鈉組比較，丹芪六君顆粒高、低劑量組小鼠瘤重顯著降低（P＜0.05）。丹芪六君顆粒和奧美拉唑納都有抑制腫瘤生長的作用，丹芪六君顆粒高劑量組抑瘤率明顯高于奧美拉唑鈉組（P＜0.05）。見表2。

表2 用藥后各組小鼠進食量、瘤重、抑瘤率的比較

4 討論

化療是腫瘤的主要治法之一，針對惡性腫瘤細胞無限增殖、分化異常的特點，化療藥物可起到“細胞毒”和“促進分化”等作用，達到殺死癌細胞、抑制癌細胞生長繁殖和促進癌細胞分化之目的。但正常的組織細胞也遭到不同程度的損害，尤其是生長活躍的胃腸道黏膜上皮細胞，從而出現(xiàn)嚴重的消化道反應，如惡心嘔吐、口腔炎、食欲減退、腹部不適及便秘等，加劇了患者化療后的損傷，阻礙了臨床進一步化療的可能。

國外研究早已發(fā)現(xiàn)質(zhì)子泵抑制劑（PPIs）對多種人惡性腫瘤細胞株具有化療增敏作用，并能選擇性地誘導癌細胞凋亡，對正常細胞則無明顯影響[3]。Yeo等[4]發(fā)現(xiàn)泮托拉唑可選擇性地誘導胃癌細胞凋亡，對正常胃黏膜細胞則無作用，瘤內(nèi)注射泮托拉唑的裸小鼠，腫瘤體積顯著小于對照組，并可見大規(guī)模腫瘤細胞凋亡。沈永華等[5]實驗發(fā)現(xiàn)給予奧美拉唑或泮托拉唑灌胃的荷瘤裸小鼠，血清TNF-α和IL-6水平顯著低于癌性惡病質(zhì)組，體質(zhì)量和攝食、飲水量亦有不同程度的改善。所以，本研究選擇質(zhì)子泵抑制劑奧美拉唑作為西藥對照組進行對照。

中醫(yī)學認為化療藥物多為苦寒之品，易損及脾胃，而脾胃乃后天之本，氣血生化之源，人體的生長發(fā)育都有賴于脾胃所運化的水谷精微的滋養(yǎng)。脾氣不足，則運化失司，水濕內(nèi)停，痰濁內(nèi)生，精氣不升，濁氣不降，日久痰瘀阻絡發(fā)生毒副反應。減輕化療后胃腸道不良反應的研究已成為臨床化學藥物治療研究的熱點，在各種方法中，中醫(yī)藥復方制劑已經(jīng)日益受到人們的重視。本研究選方是在古方六君子湯基礎上加紫丹參、黃芪而成[6]，功能以健脾化濕、化瘀通絡、益氣扶正為主。

現(xiàn)代藥理分析發(fā)現(xiàn)，丹參主要成分為丹參酮，能增強巨噬細胞的吞噬功能，具有抗炎作用，能調(diào)節(jié)蛋白代謝和免疫功能，可抗凝、改善血液黏稠性；黃芪的主要成分為黃芪皂苷、黃芪多糖等，具有擴張血管，保護血管內(nèi)皮細胞，改善微循環(huán)的作用，還具有較好的促進血管生成的作用[7-8]；黨參含菊糖，能直接促進特異性免疫淋巴細胞的分化、增殖，提高非特異免疫的NK細胞活性，增強巨噬細胞的吞噬能力，提高機體的免疫能力；白術對化療導致的白細胞降低有明顯提升作用；茯苓內(nèi)含有的茯苓聚糖是提高人體免疫功能的多糖物質(zhì)；半夏有很好的鎮(zhèn)吐作用。

本研究結(jié)果表明，奧美拉唑鈉并沒有顯著改善化療小鼠的進食量，從而也就不能夠增加化療小鼠的體重。無論低劑量還是高劑量丹芪六君子顆粒均可以提高化療小鼠的進食量，但低劑量丹芪六君子顆粒沒有增加小鼠的體重，而高劑量丹芪六君子顆粒能夠顯著提高化療小鼠的體重，與正常小鼠間無顯著性差異。奧美拉唑鈉和丹芪六君子顆粒均對化療有輔助作用，3組的瘤重均顯著低于模型組，3組的抑瘤率均顯著高于模型組，而其中丹芪六君子顆粒的這種輔助作用更強，且與劑量有依賴性。

綜上，丹芪六君顆粒能明顯改善化療后小鼠的全身狀況，減輕胃腸道反應，在一定程度上促進進食量，增加體重，改善生存質(zhì)量，抑制腫瘤生長率。本研究所用丹芪六君子顆粒按照常規(guī)臨床經(jīng)驗配方混合，配方比例是否為最佳以及在延長生存期方面的作用機制還有待進一步研究。

[1]張宏方，馬居里，郭蘭生，等.中藥調(diào)衡方對S180荷瘤小鼠抗腫瘤的實驗研究.陜西中醫(yī)，2005，26（1）：85

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[5]沈永華，陳敏，沈衛(wèi)東，等.質(zhì)子泵抑制劑對SGC-7901胃腺癌裸小鼠癌性惡病質(zhì)的作用.胃腸病學，2011，16（1）：11

[6]劉春安，彭明.抗癌中草藥大辭典.武漢：湖北科學技術出版社，l994：340

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R73-354文獻識別碼A

1672-397X（2014）03-0078-03

林青（1982-），女，醫(yī)學碩士，住院醫(yī)師，研究方向：中醫(yī)內(nèi)科學基礎與臨床（風濕免疫方向）。

樊衛(wèi)飛，fwfei1974@qq.com

2013-10-31

編輯：吳寧

2011年江蘇省中醫(yī)藥局課題（LB11002）