山桃根化學(xué)成分研究

諶 亮 王玉平 許春蓮 宋大鵬 尹愛武

(湖南科技學(xué)院 生命與化學(xué)工程系，湖南 永州 425199)

山桃廣泛分布于世界各地，其種子桃仁有活血化瘀的作用，其被廣泛運應(yīng)于中醫(yī)臨床中。在中醫(yī)名方：血府逐瘀湯、桃仁承氣湯、生化湯及桂枝茯芩丸中桃仁列為君藥。在我國有些地區(qū)山桃根被認為有活血通絡(luò)的作用，用于治療跌打損傷性疾病。目前未見關(guān)于山桃根化學(xué)成分的研究報道，為臨床更好地利用本資源，本研究首次對山桃根化學(xué)成分進行系統(tǒng)分離，并從中分離得到11個化合物，其分別為：棕櫚酸(1)、硬脂酸(2)、β-谷甾醇(3)、山柰酚（4）、槲皮素(5)、二氫槲皮素（6）、柚皮素（7）、山柰酚 7-O-β-D-葡萄糖苷（8）、槲皮素-7-O-α-L-鼠李糖苷（9) 、槲皮素-3, 7-二-O-α-L-鼠李糖苷（10) 、胡蘿卜苷（11)?；衔?，4，6，9，11均為首次從該植物中分離得到。

1 材料與儀器

DRX-400型核磁共振儀(以TMS為內(nèi)標(biāo))；X4型顯微熔點測定儀(未經(jīng)校正)；N-1000S-WA 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(日本EYELA)；ZF-9型暗箱式紫外透射儀(上海顧村電光儀器廠）。山桃根采于湖南永州，經(jīng)湖南科技學(xué)院黃國文博士鑒定。400～500目柱色譜用硅膠(青島海洋化工廠)；所有試劑均為分析純。

2 提取與分離

山桃根10 kg，用8倍量75%乙醇加熱回流提取1.5 h，過濾，濾渣用7倍量75%乙醇重復(fù)提取1次，合并濾液，減壓回收乙醇，濃縮液加一定量的水得清液，清液分別用石油醚（10 L×3）與乙酸乙酯（10L×3）萃取，回收溶劑得石油醚浸膏750 g，乙酸乙酯浸膏602 g。石油醚浸膏上硅膠柱，經(jīng)石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫（20∶0～0︰20），其中10～25份合并后經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析（石油醚-乙酸乙酯），分離得化合物1(174 mg)，2(132 mg)，4(164 mg)。乙酸乙酯浸膏上硅膠柱，以石油醚-丙酮梯度洗脫（30︰0～0︰30），用薄層跟蹤檢驗，合并相同組分，再反復(fù)上小硅膠柱與重結(jié)晶，得到化合物 4(201mg)，5(187 mg)，6(258 mg)，7(147 mg)，8(221 mg)，9(152 mg)，10(194 mg)，11(292 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物 1 白色片狀結(jié)晶(EtOAc)，mp.47～49 ℃。1H NMR(CDCl3, 400 MHz) δ： 0.90(3H, t, H-16)，1.61(2H, m,H-15)，1.30(24H, m, H-3～14)，1.68(2H, m, H-2)，2.35(2H, t,H-1)。13C NMR(CDCl3, 100 MHz) δ：179.2(C=O), 34.2(C-1)，24.9(C-2), 30.0(C-3～12), 31.7(C-13), 22.7(C-14), 14.4(C-15).以上波譜數(shù)據(jù)與文獻[1]報道基本一致，鑒定為棕櫚酸。

化合物2 白色粉末mp.49～51℃。溴甲酚綠反應(yīng)呈陽性，提示化合物分子結(jié)構(gòu)中存在羧基。1H NMR(CDCl3, 400 MHz) δ: 0.90(3H, t, H-18)，1.50(2H, m, H-17)，1.30(28H, m,H-3～16)，1.68(2H, m, H-2)，2.35(2H, t, H-1)。13C NMR(CDCl3, 100 MHz) δ：179.4(C=O)，34.2(C-1)，24.9(C-2)，30.0(C-3～14)，31.8(C-15)，22.8(C-16)，14.5(C-17)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻[2]報道基本一致，鑒定為硬脂酸。

化合物3 白色針晶（石油醚），mp.143～145℃。乙酸酐-濃硫酸反應(yīng)先紫紅色漸變?yōu)槲劬G色。1H NMR(CDCl3,400MHZ) δ： 0.69(3H, s, H-6)，0.81(3H, d, J=6.3 Hz, H-27)，0.83(3H, d, J=6.3 Hz, H-26)，0.86(3H, t, J=7.2 Hz, H-29)，0.94(3H, d, J=6.3 Hz, H-21)，1.01(3H, s, H-19)，5.35(1H, m,H-6)，3.52(1H, m, H-3)。13C NMR(CDCl3, 100MHZ)δ：37.1(C-1)，31.6(C-2),，71.7(C-3)，42.2 (C-4)，140.7 (C-5)，121.8 (C-6), 31.9 (C-7)，31.8 (C-8)，50.2 (C-9)，36.5 (C-10)，21.2 (C-11)，39.8 (C-12)，43.3 (C-13)，56.6 (C-14)，24.4(C-15)，28.2 (C-16)，56.0 (C-17)，12.0 (C-18)，19.5 (C-19)，36.0 (C-20)，18.8 (C-21)，33.8 (C-22)，26.0 (C-23)，45.7(C-24)，29.0 (C-25)，19.8 (C-26)，19.0 (C-27)，23.0 (C-28)，11.9 (C-29)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻[3]報道基本一致，鑒定為β-谷甾醇。

化合物4 黃色粉末 mp.267～269℃.1H NMR (CD3OD,400MHZ) δ： 6.19(1H, s, H-6), 6.35(1H, s, H-8), 8.08(2H, d,J=8.6 Hz, H-2′, 6′), 6.90(2H, d, J=8.6 Hz, H-3′, 5′).13C NMR(CD3OD, 100MHZ) δ：148.1(C-2), 137.0(C-3), 177.0(C-4),160.5(C-5), 99.5 (C-6), 165.8 (C-7), 94.5 (C-8), 158.0 (C-9),104.4 (C-10), 123.7 (C-1′), 130.8 (C-2′, 6′), 116.4 (C-3′, 5′),158.4 (C-4′).以上波譜數(shù)據(jù)與文獻[4]報道基本一致，鑒定為山柰酚。

化合物 5 黃色粉末，mp.306～309 ℃.1H NMR(CD3COCD3, 400 MHz) δ： 6.19(1H, d, J=2.5 Hz, H-6)，6.54(1H, d, J=2.5 Hz, H-8)，7.76(1H, d, J=2.5 Hz, H-2′)，6.96(1H, d, J=8.5 Hz, H-5′)，7.69(1H, dd, J=8.5, 2.5 Hz,H-6′)。13C NMR(CD3COCD3, 100MHZ) δ：146.4(C-2)，136.8(C-3)，175.9(C-4)，157.0(C-5)，99.5(C-6)，165.1(C-7)，94.8(C-8)，163.8(C-9)，104.0(C-10)，123.9(C-1′)，115.7(C-2′)，145.5(C-3′)，148.5(C-4′)，116.2(C-5′)，121.8(C-6′)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻[5]報道基本一致，鑒定為槲皮素。

化合物6 白色粉末 (甲醇)，mp.222～223 ℃。鹽酸鎂粉反應(yīng)呈陽性。1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ： 4.44(1H, d,J=11.2 Hz, H-3)，4.85(1H, d, J=11.2 Hz, H-2)，5.83(1H, d,J=1.6 Hz, H-6)，5.87(1H, d, J=2.0 Hz, H-8)，6.73(1H, d, J=8.3 Hz, H-5′)，6.78(1H, dd, J=8.4, 2.0 Hz, H-6′)，6.90(1H, d, J=2.0 Hz, H-2′)。13C NMR(CD3COCD3, 100MHZ) δ：85.2(C-2)，73.5(C-3)，198.4(C-4)，164.5(C-5)，97.4(C-6)，168.8(C-7)，96.3(C-8)，165.4(C-9)，101.8(C-10)，129.8(C-1′)，120.9(C-2′)，146.5(C-3′)，147.3(C-4′)，115.8(C-5′)，116.1(C-6′)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻[6]報道基本一致，鑒定為二氫素。

化合物7 白色針晶 (MeOH)，mp.260～262℃。HCl-Mg reaction 和FeCl3反應(yīng)均呈陽性。1H NMR (CD3OCD3, 400 MHz) δ： 5.46(1H, dd, J=12.8, 3.2 Hz, H-2)，5.93(2H, d, J=2.0 Hz, H-6, 8)，6.69(2H, d, J=8.4 Hz, H-3′, 5′)，7.38(2H, d, J=8.4 Hz, H-2′, 6′)，2.72(1H, dd, J=17.2, 3.2 Hz, H-3e)，3.18(1H, dd,J=17.2, 12.8 Hz, H-3a)。13C NMR(CD3COCD3, 100MHZ)δ：79.8(C-2)，43.5(C-3)，197.3(C-4)，165.4(C-5)，96.8(C-6)，167.3(C-7)，95.7(C-8)，164.4(C-9)，103.1(C-10)，130.8(C-1′)，129.0(C-2′)，116.2(C-3′)，158.6(C-4′)，116.2(C-5′)，129.0(C-6′)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻[7]報道基本一致，鑒定為柚皮素。

化合物8 黃色粉末 (甲醇)，mp.221～223 ℃。HCl-Mg反應(yīng)呈陽性。1H NMR (CD3OD, 400 MHz) δ： 6,38(1H, d,J=2.0 Hz, H-6)，6.68(1H, d, J=2.0 Hz, H-8)，6.85(2H, d, J=8.8 Hz, H-3′, 5′)，8.05(2H, d, J=8.8 Hz, H-2′, 6′)，3.30～4.00(4H,m, H-2′～ 6′)，5.00(1H, d, J=7.6 Hz, H-1′)。13C NMR(CD3OD, 100MHZ) δ：148.9(C-2)，137.5(C-3)，177.5(C-4)，162.2(C-5)，100.3(C-6)，164.5(C-7)，95.7(C-8)，157.8(C-9)，106.3(C-10)，123.7(C-1′)，130.9(C-2′)，116.3(C-3′)，160.6(C-4′)，116.4(C-5′)，130.9(C-6′)，101.5(C-1′)，74.8(C-2′)，78.4(C-3′)，71.4(C-4′)，77.8(C-5′)，62.5(C-6′)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻[8]報道基本一致，鑒定為山柰酚7-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物9 黃色粉末 (MeOH)，mp.185～185℃。HCl-Mg和 FeCl3反應(yīng)均呈黃色。1H NMR (CD3OD, 400 MHz) δ：6.15(1H, d, J=1.6 Hz, H-6)，6.35(1H, d, J=1.6 Hz, H-8)，6.90(1H, d, J=8.0 Hz, H-5′)，7.35(1H, dd, J=8.0, 2.0 Hz,H-6′)，7.38(1H, d, J=2.0 Hz, H-2′)，5.31(1H, brs, H-1′)，3.88(1H, brs, H-5′)，3.73(1H, dd, J=8.8, 3.6 Hz, H-3′)，3.60(1H, m, H-2′)，3.35(1H, m, H-4′)，0.85(3H, d, J=5.6 Hz,Rha-CH3)。13C NMR(CD3OD, 100MHZ) δ：158.6(C-2)，136.1(C-3)，178.4(C-4)，163.3(C-5)，99.8(C-6)，165.9(C-7)，94.7(C-8)，159.2(C-9)，105.7(C-10)，124.3(C-1′)，116.4(C-2′)，116.3(C-3′)，160.7(C-4′)，113.5(C-5′)，122.8(C-6′)，103.4(C-1′)，72.2(C-2′)，72.3(C-3′)，73.1(C-4′)，71.8(C-5′)，17.6(C-6′)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻[9]報道基本一致，鑒定為槲皮素-7-O-α-L-鼠李糖苷。

化合物10 黃色針晶(MeOH)，mp.185～187℃.HCl-Mg反應(yīng)呈陽性。1H NMR (CD3OD, 400 MHz) δ： 6.42(1H, d,J=2.0 Hz, H-6)，6.68(1H, d, J=2.0 Hz, H-8)，6.85(1H, d, J=8.0 Hz, H-5′)，7.28(1H, dd, J=8.0, 2.0 Hz, H-6′)，7.32(1H, d, J=2.0 Hz, H-2′)，5.50(1H, brs, H-1′)，5.31(1H, brs, H-1′′)，4.17(1H,brs, H-5′)，3.95(1H, brs, H-5′′)，3.70(1H, dd, J=8.8, 4.0 Hz,H-3′)，3.69(1H, dd, J=8.8, 4.0 Hz, H-3′′)，3.25～3.52(4H, m,H-2′, 2′′, 4′, 4′′)，1.20(3H, d, J=5.6 Hz, 7-O-Rha-CH3)，0.88(3H, d, J=6.4 Hz, 3-O-Rha-CH3)。13C NMR(CD3OD,100MHZ) δ：158.2(C-2)，136.5(C-3)，179.7(C-4)，163.7(C-5)，99.9(C-6)，163.7(C-7)，95.7(C-8)，159.7(C-9)，107.6(C-10)，122.8(C-1′)，116.8(C-2′)，146.6(C-3′)，150.2(C-4′)，116.4(C-5′)，122.8(C-6′)，7-O-Rha： 100.6(C-1′)，72.1(C-2′)，71.3(C-3′)，73.2(C-4′)，71.8(C-5′)，17.7(C-6′)； 3-O-Rha：103.5(C-1′′)，72.2(C-2′′)，71.8(C-3′′)，73.5(C-4′′)，71.3(C-5′′)，18.2(C-6′′)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻[10]報道基本一致，鑒定為槲皮素-3, 7-二-O-α-L-鼠李糖苷。

化合物 11 白色粉末(MeOH)，mp.290～292℃。1H NMR(DMSO-d6, 400 MHz) δ： 0.68(3H, s, H-18)，0.86(3H, t, J=7.6 Hz, H-29)，0.91(3H, d, J=8.2 Hz, H-27)，0.91(3H, d, J=8.2 Hz,H-26)，0.93(3H, s, H-19)，3.97(1H, m, H-3a)，5.35(1H, brd,J=4.8 Hz, H-6)，3.98(1H, m, H-5′)，4.05(1H, t, J=7.6 Hz,H-2′)，4.28(2H, m, H-3′, 4′)，4.43(1H, dd, J=11.9, 4.9 Hz,H-6′b)，4.56(1H, d, J=11.9 Hz, H-6′a)，5.06(1H, d, J=7.7 Hz,H-1′)。13C NMR(DMSO-d6, 100MHZ) δ：38.5(C-1)，29.5(C-2)，76.7(C-3)，40.2(C-4)，140.5(C-5)，121.2(C-6)，33.2(C-7)，31.3(C-8)，49.6(C-9)，25.5(C-10)，20.5(C-11)，27.8(C-12)，41.8(C-13)，56.2 (C-14)，23.8(C-15)，41.7(C-16)，55.4(C-17)，11.8(C-18)，19.3(C-19)，36.4(C-20)，19.0(C-21)，35.5(C-22)，36.8(C-23)，45.1(C-24)，28.8(C-25)，18.9(C-26)，19.8(C-27)，22.5(C-28)，11.9(C-29)，102.5(C-1′)，73.4(C-2′)，76.8(C-3′)，70.1(C-4′)，76.7(C-5′)，61.2(C-6′)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻[11]報道基本一致，鑒定為胡蘿卜苷。

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