海馬區(qū)5-HT2AR及其mRNA表達(dá)對(duì)抑郁癥發(fā)病的影響

孫 林

（甘肅省慶陽(yáng)市中醫(yī)醫(yī)院，745000）

海馬區(qū)5-HT2AR及其mRNA表達(dá)對(duì)抑郁癥發(fā)病的影響

孫 林

（甘肅省慶陽(yáng)市中醫(yī)醫(yī)院，745000）

目的 探討大鼠模型大腦海馬區(qū)5-HT2AR及其mRNA表達(dá)對(duì)抑郁癥發(fā)病機(jī)制的影響。方法 選擇經(jīng)Open-Field法評(píng)分測(cè)定評(píng)分相近的36只SD普通級(jí)大鼠，隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、氟西汀組3組，每組各12只。采用孤養(yǎng)和長(zhǎng)期不可預(yù)見(jiàn)的慢性應(yīng)激造成大鼠抑郁癥模型，氟西汀組給予氟西汀治療、模型組給予同等劑量的0.9%氯化鈉注射液、對(duì)照組不給予任何藥物。結(jié)果 與對(duì)照組相比，模型組5-HT2AR和mRNA的表達(dá)數(shù)量明顯下降，且5-HT2AR/ mRNA增高(P＜0.05)；與模型組相比，氟西汀組5-HT2AR和mRNA表達(dá)升高，5-HT2AR/mRNA下降(P＜0.05)。結(jié)論 抑郁癥發(fā)病可能與5-HT2AR及其mRNA的表達(dá)下降有關(guān)。

抑郁癥；海馬區(qū)；5-HT2AR；mRNA表達(dá)；實(shí)驗(yàn)研究

抑郁癥是由各種原因引起的以抑郁為主要癥狀的一組心境障礙或情感障礙，是一組以抑郁心境自我體驗(yàn)為中心的臨床癥狀群或狀態(tài)[1]。世界衛(wèi)生組織推測(cè)在未來(lái)20年內(nèi)，抑郁癥將是致殘疾的第二大殺手[2-3]。本文旨在探討抑郁癥發(fā)病與海馬區(qū)5-HT2AR及其mRNA表達(dá)的相關(guān)性。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 Open-Field評(píng)分[1]無(wú)差異的普通級(jí)成年SD大鼠36只，體重(200±20)g，雌雄各半，由華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物試驗(yàn)中心提供，許可證號(hào)SCXK(鄂)2012-0027。

1.2 藥物 鹽酸氟西汀膠囊(上海中西制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào)120701)，20 mg/粒。

1.3 試劑與儀器 免疫組化染色試劑盒及HTR2AR原位雜交檢測(cè)試劑盒(武漢博士德生物工程有限公司)，雜交儀(CSA22.2NO1010-1型)；圖象分析儀(奧林巴斯256型)；電子天平(上海YP1201N型)；冷凍切片機(jī)(德國(guó)萊卡LK-100型)。

1.4 研究方法 36只SD普通級(jí)大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、氟西汀組，每組12只。對(duì)照組大鼠給予雌雄分組每籠飼養(yǎng)6只的群養(yǎng)法；模型組與氟西汀組大鼠孤養(yǎng)，均接受各種不同的應(yīng)激，包括冰水游泳、熱應(yīng)激、電擊足底、搖晃、禁食、禁水、夾尾、晝夜顛倒(以室內(nèi)開(kāi)燈為原則)等刺激，每種刺激1次/周，隨機(jī)給予，7 d為1個(gè)周期，共造模21 d。21 d后開(kāi)始給藥：氟西汀組將氟西汀按0.36 mg/kg的劑量溶于0.9%氯化鈉注射液中，2 mL/只；對(duì)照組正常飼養(yǎng)，不給任何藥物；模型組給予等量的0.9%氯化鈉注射液；連續(xù)用藥3周，于實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后第42天用藥后2 h，斷頸取材。

1.5 標(biāo)本處理 取大鼠全腦活標(biāo)本分離海馬區(qū)，放入4%多聚甲醛中固定，常規(guī)制片。免疫組化法檢測(cè)5-HT2AR；原位雜交法檢測(cè)5-HT2A R-mRNA表達(dá)。

1.6 圖片處理 在顯微鏡10×20倍視野下每張切片隨機(jī)選取5個(gè)視野，計(jì)算陽(yáng)性反應(yīng)數(shù)量，取5個(gè)視野的平均值作統(tǒng)計(jì)分析。

1.7 統(tǒng)計(jì)方法 使用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用單因素方差分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

見(jiàn)表1。各組大鼠模型大腦海馬區(qū)5-HT2AR及其mRNA表達(dá)與對(duì)照組相比，模型組5-HT2AR及其mRNA的表達(dá)明顯下降、5-HT2AR/mRNA比值增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；與模型組相比，氟西汀組海馬區(qū)5-HT2AR及其mRNA表達(dá)明顯升高，且5-HT2AR/ mRNA比值降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；氟西汀組各項(xiàng)指標(biāo)均接近對(duì)照組。

表1 大鼠海馬區(qū)5-HT2AR及其mRNA表達(dá)

3 討論

5-HT2AR在抑郁癥病因和抗抑郁藥作用機(jī)制中研究較多，關(guān)于5-HT2AR及其5-HT2A R-mRNA表達(dá)與抑郁癥的關(guān)系尚無(wú)定論。王立偉等[4]認(rèn)為，抑郁癥的發(fā)病與5-HT2AR降低有關(guān)。但汪廣劍等[5]的研究結(jié)果顯示，5-HT2AR與抑郁癥患者未見(jiàn)明顯相關(guān)，提示5-HT2AR基因可能不是單相抑郁癥發(fā)病的風(fēng)險(xiǎn)基因之一。目前，采用五羥色胺再攝取抑制劑治療抑郁癥已經(jīng)得到公認(rèn)，臨床療效肯定。本研究顯示，慢性應(yīng)激所造的抑郁大鼠模型海馬區(qū)的5-HT2AR及其mRNA表達(dá)降低，經(jīng)氟西汀治療后，5-HT2AR及其mRNA表達(dá)水平與正常對(duì)照組相當(dāng)。因此，筆者可以初步推測(cè)，抑郁癥的發(fā)病機(jī)制可能與5-HT2AR及其mRNA的表達(dá)水平降低有一定關(guān)系；同時(shí)5-HT2AR/mRNA比值失調(diào)，在模型組中5-HT2AR/mRNA的比值明顯高于對(duì)照組，說(shuō)明處在抑郁狀態(tài)下的大鼠模型，5-HT2AR數(shù)量與mRNA表達(dá)不成比例下降，mRNA表達(dá)的數(shù)量明顯少于5-HT2AR下降數(shù)量，使兩者失去協(xié)調(diào)。表達(dá)不足可能是抑郁癥發(fā)病的一個(gè)重要的因素。通過(guò)氟西汀治療，5-HT2AR數(shù)量及其mRNA表達(dá)，以及5-HT2AR/mRNA的比值，基本接近正常對(duì)照組。說(shuō)明5-HT2AR數(shù)量及其mRNA表達(dá)、5-HT2AR/mRNA的比值，三者有密切的聯(lián)系，并在抑郁癥發(fā)病中有著關(guān)鍵性的影響，值得進(jìn)一步研究。

[1] 謝忠禮．加味四逆散對(duì)惡劣心境障礙模型大鼠行為學(xué)影響[J]．陜西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2004，7(4)：60-62．

[3] World Health Organization. The world health report 2001: mental health, new understanding, new hope[C]. Geneva, Switzerland: WHO Marketing and Dissemination, 2001, 288(5463): 39-40.

[4] 王立偉，江三多，汪棟祥，等．5-羥色胺6受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關(guān)聯(lián)研究[J]．中華精神科雜志，2000，33(4)：216-217．

[5] 汪廣劍，仲愛(ài)芳，張理義，等．單相抑郁癥與5-羥色胺2A受體基因多態(tài)性的關(guān)聯(lián)研究[J]．四川精神衛(wèi)生，2002(3)：147-148．

1672-7185（2014）13-0057-02

10.3969/j.issn.1672-7185.2014.13.032

2014-05-05）

R74

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