漢族和高加索人糖尿病腎病腎小球全基因組表達(dá)數(shù)據(jù)分析

蔣　松　施勁松　沈霞紅　盧穎輝　鄭春霞　鞠文君　劉志紅

糖尿病腎病(DN)是西方發(fā)達(dá)國家導(dǎo)致慢性腎功能不全的最主要的病因。在我國，隨著糖尿病發(fā)病率的不斷增加，DN也已成為慢性腎臟疾病的主要病因之一。DN的主要病理形態(tài)學(xué)改變?yōu)槟I小球體積增大、系膜區(qū)增寬、基質(zhì)增多及K-W結(jié)節(jié)等，伴隨著這些腎小球的病理改變，其基因表達(dá)的變化可能更加直接地反映了DN發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制。利用高通量轉(zhuǎn)錄組學(xué)方法獲取和分析DN患者腎小球全基因組表達(dá)數(shù)據(jù)，可以更加全面地了解DN的分子發(fā)病機(jī)制。

迄今為止，僅有關(guān)于高加索和美國黑人DN患者腎小球全基因組表達(dá)譜數(shù)據(jù)的研究，尚無大樣本中國漢族人群DN患者腎小球全基因組表達(dá)譜的觀察研究，更缺少比較漢族同其他種族DN患者腎小球基因表達(dá)差異的研究。本文首次檢測(cè)和分析了中國漢族DN患者腎小球的基因表達(dá)數(shù)據(jù)，并與高加索DN患者的數(shù)據(jù)進(jìn)行比較，旨在為進(jìn)一步探索DN發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制提供依據(jù)。

對(duì)象和方法

研究對(duì)象中國漢族DN患者：前瞻性入組2012年1～10月在南京軍區(qū)南京總醫(yī)院腎臟科住院，并行腎活檢明確診斷為DN的患者29例。入選標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合1997年世界衛(wèi)生組織(WHO)2型糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)病理形態(tài)學(xué)改變?yōu)楣忡R下腎小球體積增大，系膜區(qū)增生樣改變，或腎小球節(jié)段硬化，少細(xì)胞結(jié)節(jié)(K-W結(jié)節(jié))形成等；免疫熒光染色為寡免疫復(fù)合物沉積；(3)排除其他繼發(fā)性腎臟疾?。?4)有完整的臨床、病理及實(shí)驗(yàn)室檢查記錄。

中國漢族正常對(duì)照組：前瞻性入組2012年1～10月在南京軍區(qū)南京總醫(yī)院泌尿外科住院，診斷明確為腎癌的患者5例。入選標(biāo)準(zhǔn)：(1)尿常規(guī)、尿沉渣及24h尿蛋白定量陰性；(2)年齡<60歲；(3)血常規(guī)和血生化無明顯異常；(4)臨床無明顯消瘦等惡液質(zhì)表現(xiàn)；(5)患者的空腹血糖、餐后血糖和糖化血紅蛋白水平正常。

高加索人群DN患者的入組條件與中國漢族人群DN患者入組條件一致，對(duì)照組取自活體腎臟移植手術(shù)中活體供腎的新鮮活檢組織或腎臟腫瘤患者的癌旁腎臟組織。所有標(biāo)本由美國密西根大學(xué)提供，來源于歐洲和美國高加索人群。分別有21例DN患者和35例對(duì)照組入選本研究。

新鮮腎組織收集DN患者腎組織收集：DN患者在簽署知情同意書后，于B超定位引導(dǎo)下，行負(fù)壓吸引法經(jīng)皮腎穿刺活檢術(shù)。在保證正常病理形態(tài)學(xué)檢查及不增加患者活檢風(fēng)險(xiǎn)的情況下，單獨(dú)收集長約1～1.5 cm的腎臟皮髓交界處的新鮮組織，立即置入10 ml RNA-later保存液中于-20℃保存。

正常對(duì)照組標(biāo)本收集：在腎癌患者簽署知情同意書后，行患側(cè)腎臟切除。腎臟離體后立即在遠(yuǎn)離腎臟腫瘤端切取4～5 cm3的皮髓交界處的組織塊作為對(duì)照組標(biāo)本，立即置入20 ml RNA-later保存液中-20℃保存。

腎小球微分離將新鮮腎組織置于玻璃平皿中，加入2 ml RNA-later，置于體式顯微鏡下，將目鏡調(diào)整至8倍數(shù)，觀察腎組織內(nèi)的腎小球，利用腎小球微分離針進(jìn)行腎小球微分離，剔除腎小球周圍的間質(zhì)組織和包囊壁，利用移液槍將微分離后的腎小球移至置有5 μl RNA-later的1.5 ml EP管中，每個(gè)EP管中置入15個(gè)微分離的腎小球，放入-80℃冰箱中保存，用于RNA提取。

RNA提取采用RNeasy micro kit(Cat#74004,QIAGEN,GmBH,Germany)并且根據(jù)生產(chǎn)廠商提供的標(biāo)準(zhǔn)操作流程進(jìn)行樣品的總RNA 抽提，抽提所得總RNA經(jīng)Agilent Bioanalyzer 2100 (Agilent technologies,Santa Clara,CA,US)電泳質(zhì)檢合格后備用。要求RNA樣品RNA完整性指數(shù)≥7.0且28S/18S≥0.7。

RNA的放大和標(biāo)記RNA采用Nugen表達(dá)譜實(shí)驗(yàn)試劑盒，Ovation RNA amplification system kit(Cat#3100,Nugen),WB reagent(1300，Nugen)，Encore biotin module(4200，Nugen)對(duì)樣品總RNA中的mRNA進(jìn)行放大、標(biāo)記和純化，獲得帶有生物素(biotin)標(biāo)記的cDNA。

芯片雜交本研究使用Affymetrix公司的Human U133 Plus 2.0芯片進(jìn)行芯片雜交，該芯片可檢測(cè)已知 47 000 個(gè)基因的轉(zhuǎn)錄本。按照芯片配套提供的雜交標(biāo)準(zhǔn)流程和配套試劑盒，GeneChip? Hybridization，Wash and Stain Kit (Cat#900720， Affymetrix， Santa Clara，CA，US)，在滾動(dòng)雜交爐，Hybridization Oven 645 (Cat#00-0331-220V,Affymetrix，Santa Clara，CA，US)中45℃，18h滾動(dòng)雜交，雜交完成后在洗滌工作站Fluidics Station 450 (Cat#00-0079,Affymetrix,Santa Clara,CA,US)進(jìn)行芯片的洗滌。

芯片掃描芯片結(jié)果采用GeneChip? Scanner 3000 (Cat#00-00212,Affymetrix，Santa Clara，CA，US)進(jìn)行掃描，用Command Console Software 3.1 (Affymetrix,Santa Clara，CA，US)讀 取 原 始 數(shù) 據(jù)。進(jìn)行數(shù)據(jù)質(zhì)量控制，質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)為：(1)背景值 Avg Background<100；(2)管家基因 Housekeeping Controls 3’端信號(hào)與 5’端信號(hào)比值至少有一個(gè)≤3。質(zhì)控合格數(shù)據(jù)進(jìn)行下一步的生物信息學(xué)分析。

生物信息學(xué)分析

數(shù)據(jù)整合由于高加索人群的DN組和對(duì)照組的全基因組表達(dá)數(shù)據(jù)均來源于歐洲和美國高加索人群，且由實(shí)驗(yàn)室分別進(jìn)行標(biāo)本采集，并分為兩組進(jìn)行Affymetrix公司Human U133 plus 2.0芯片進(jìn)行數(shù)據(jù)檢測(cè)，為消除芯片表達(dá)信號(hào)的差異，我們利用批次校正(Batch Correction)對(duì)不同來源的全基因表達(dá)譜數(shù)據(jù)進(jìn)行整合，隨后利用主成分分析(PCA)評(píng)價(jià)整合后的高加索人群DN組和對(duì)照組的全基因組表達(dá)數(shù)據(jù)。

基因差異表達(dá)分析首先利用等級(jí)聚類方法對(duì)樣本進(jìn)行樣本聚類和基因聚類，評(píng)價(jià)樣本的相互聚類關(guān)系；使用Multiple Experiment Viewer(MEV)軟件中的Significance Analysis of Microarrays(SAM)計(jì)算進(jìn)行基因差異表達(dá)分析?；虻娘@著差異定義為Q值<0.001，倍數(shù)改變大于1.5倍。

分子信號(hào)通路分析為了對(duì)差異表達(dá)或同表型相關(guān)的基因功能進(jìn)行進(jìn)一步的分析，借助Affymetrix公司的NetAffy及KEGG數(shù)據(jù)庫對(duì)基因進(jìn)行通路分析，借助基因本體論(Gene Ontology)數(shù)據(jù)庫對(duì)基因進(jìn)行功能注釋。

基因與臨床表型相關(guān)性分析利用R軟件，將所有基因與腎小球?yàn)V過率(GFR)進(jìn)行相關(guān)性分析，以R絕對(duì)值(|R|)>0.6，P值<0.05作為顯著相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)。

統(tǒng)計(jì)方法采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)。計(jì)量資料以百分比或構(gòu)成比表示，組間比較采用卡方檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.01為統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著。

結(jié)　　果

中國漢族人群和高加索人群DN患者的臨床基本資料本研究共納入了中國漢族DN患者29例，高加索DN患者21例。高加索人群腎小球基因表達(dá)數(shù)據(jù)分別來源于歐洲和美國。

高加索人群DN患者的病情表現(xiàn)相對(duì)較嚴(yán)重，其血清肌酐水平較高、eGFR相對(duì)較低。但兩組蛋白尿水平和體質(zhì)量指數(shù)并無明顯差異(表1)。

表1　兩個(gè)人種糖尿病腎病患者的基本臨床數(shù)據(jù)

eGFR：估算的腎小球?yàn)V過率

歐洲和美國來源的高加索人群腎小球全基因組表達(dá)數(shù)據(jù)整合由于高加索人群DN組和對(duì)照組的數(shù)據(jù)分別來源于歐洲和美國高加索人群。為將其作為一個(gè)整體數(shù)據(jù)進(jìn)行比較分析，我們需要利用對(duì)兩組全基因組表達(dá)數(shù)據(jù)進(jìn)行整合。

在兩者數(shù)據(jù)整合之前的PCA結(jié)果顯示，歐洲和美國來源的高加索人群DN患者和對(duì)照組的腎小球全基因組表達(dá)數(shù)據(jù)被分為三個(gè)不同的簇，且相互之間并無交集(圖1A)。在整合之后的PCA顯示，所有高加索DN患者腎小球全基因組表達(dá)數(shù)據(jù)聚集為一簇，且同對(duì)照組之間存在明顯界限(圖1B)。

圖1　兩組不同來源的高加索人群腎小球全基因組表達(dá)數(shù)據(jù)在批次校正前后的PCA結(jié)果

兩個(gè)人種DN患者差異表達(dá)基因比較分析分別對(duì)中國漢族人群和高加索人群DN患者的腎小球全基因組表達(dá)數(shù)據(jù)進(jìn)行差異表達(dá)分析。在中國漢族人群中，共有565個(gè)基因在DN患者和正常對(duì)照之間出現(xiàn)差異表達(dá)(Q<0.001，變化倍數(shù)>1.5)，其中下調(diào)139個(gè)，上調(diào)426個(gè)。在高加索人群中，共有775個(gè)基因出現(xiàn)差異表達(dá)(Q<0.001，變化倍數(shù)>1.5)，其中下調(diào)225個(gè)，上調(diào)550個(gè)。

對(duì)不同人種間出現(xiàn)差異表達(dá)的基因進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，有200個(gè)基因在中國漢族人群和高加索人群DN患者腎小球中均發(fā)生調(diào)節(jié)，且其調(diào)節(jié)方向完全一致。

進(jìn)一步通路分析顯示，在中國漢族人群DN患者的差異表達(dá)基因中共有48條通路富集(P<0.05)，而在高加索人群DN患者中有92條通路富集(P<0.05)。比較分析提示，有13條通路在兩組不同人群中均發(fā)生調(diào)節(jié)(表2)。

兩個(gè)人種DN患者同腎功能相關(guān)基因的比較分析我們對(duì)兩個(gè)人群DN患者腎小球全基因組表達(dá)數(shù)據(jù)與腎臟功能指標(biāo)——eGFR進(jìn)行了相關(guān)性分析。在中國漢族DN患者腎小球全基因組表達(dá)數(shù)據(jù)中，與eGFR水平相關(guān)的基因共225個(gè)(FDR<0.01，|R|>0.60)，其中負(fù)相關(guān)的基因186個(gè)，正相關(guān)的基因39個(gè)。在高加索人群DN患者腎小球全基因組表達(dá)數(shù)據(jù)中，與eGFR水平相關(guān)的基因共有293個(gè)基因(P<0.05)。比較分析提示，共有55個(gè)基因在兩個(gè)人群均與eGFR相關(guān)(P<0.05)(表3)。

討　　論

DN發(fā)生和發(fā)展受到遺傳背景因素的影響，不同人種之間其具體分子機(jī)制仍值得探索。利用高通量的全基因組表達(dá)譜檢測(cè)和分析技術(shù)，比較分析中國漢族人群和高加索人群DN患者的腎小球內(nèi)發(fā)生差異表達(dá)的基因及其分子信號(hào)通路的異同，有助于發(fā)現(xiàn)在不同人種間DN發(fā)生發(fā)展過程中出現(xiàn)共同變化的基因及潛在的分子機(jī)制；同時(shí)，揭示在不同人種中與DN患者疾病進(jìn)展的臨床表型相關(guān)的基因，有助于發(fā)現(xiàn)判斷DN疾病進(jìn)展的新型標(biāo)志物。

表2　中國漢族和高加索糖尿病腎病患者同時(shí)出現(xiàn)調(diào)節(jié)的部分分子信號(hào)通路

IL:白細(xì)胞介素;NF-κB:核因子κB;EGF:表皮生長因子;CBL:小屋B系淋巴瘤;TNFR2:腫瘤壞死因子受體2

表3　中國漢族人群及高加索人群中均與eGFR明顯相關(guān)的部分基因

eGFR：估算的腎小球?yàn)V過率

本研究首次利用中國漢族人群和高加索人群DN患者及正常對(duì)照組的微分離腎小球，進(jìn)行了全基因組表達(dá)數(shù)據(jù)比較分析，以期發(fā)現(xiàn)相同的基因表達(dá)及其分子通路的調(diào)節(jié)。為避免和消除檢測(cè)誤差，我們首先對(duì)高加索人群的全基因組表達(dá)數(shù)據(jù)進(jìn)行了批次校正。數(shù)據(jù)整合后的PCA結(jié)果顯示，高加索人群DN組和對(duì)照組在表達(dá)方式上存在差異。最終本研究共納入中國漢族人群和高加索人群的DN患者分別為29例和21例。相較于漢族DN患者，高加索DN患者的eGFR更低，腎功能損傷更重，這與歐美國家DN患者腎活檢的時(shí)間點(diǎn)有關(guān)。但本研究的重點(diǎn)在于尋找兩組不同人種DN患者腎小球內(nèi)共同的基因表達(dá)和信號(hào)通路調(diào)節(jié)。在其病情程度不同的情況下，兩組人種間仍存在的共同調(diào)節(jié)的基因和通路，更說明其在DN發(fā)生發(fā)展中的重要性。

漢族人群中與對(duì)照組比較，DN患者的腎小球內(nèi)有565個(gè)基因出現(xiàn)差異表達(dá)；而高加索人群中，與對(duì)照組相比，有775個(gè)基因在其DN患者腎小球中出現(xiàn)差異表達(dá)。比較分析顯示，有200個(gè)基因和13條分子通路在中國漢族人群和高加索人群DN患者的腎小球內(nèi)均出現(xiàn)調(diào)節(jié)。

這200個(gè)共同差異表達(dá)的基因和13條共同調(diào)節(jié)的分子信號(hào)通路體現(xiàn)了漢族人群和高加索人群在DN發(fā)生發(fā)展過程中所存在的共同分子機(jī)制。對(duì)13條分子通路的功能分析提示，其中大一部分涉及免疫炎癥反應(yīng)，包括B細(xì)胞受體信號(hào)通路、樹突狀細(xì)胞調(diào)節(jié)TH1和TH2發(fā)育通路、白細(xì)胞介素17(IL-17)信號(hào)通路和IL-12信號(hào)通路、腫瘤壞死因子受體2(TNFR2)信號(hào)通路等。免疫炎癥反應(yīng)在組織的損傷和修復(fù)過程中發(fā)揮了重要作用。在組織損傷時(shí)，組織釋放促炎癥因子，炎癥細(xì)胞[如淋巴細(xì)胞、單個(gè)核細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞(DCs)]順著化學(xué)介質(zhì)的濃度不同，逐漸浸潤到損傷部位并被激活[1]。激活后的炎癥細(xì)胞可分泌組織損傷因子，如活性氧產(chǎn)物(ROS)和數(shù)種生長因子[2,3]，持續(xù)導(dǎo)致機(jī)體的損傷。本研究發(fā)現(xiàn)，在不同人種DN患者腎小球內(nèi)發(fā)生調(diào)節(jié)的通路多為與免疫細(xì)胞的激活和炎癥介質(zhì)介導(dǎo)相關(guān)的信號(hào)通路等，這符合慢性炎癥反應(yīng)的發(fā)生發(fā)展過程，也證實(shí)了慢性免疫炎癥反應(yīng)在DN發(fā)生發(fā)展過程中的重要作用。

TNFR2信號(hào)通路在不同人種DN患者腎小球內(nèi)均出現(xiàn)明顯調(diào)節(jié)。腫瘤壞死因子α(TNF-α)的編碼基因是TNFR2信號(hào)通路中的關(guān)鍵基因，既往研究證實(shí)，在糖尿病小鼠模型的腎臟中，TNF-α的表達(dá)上調(diào)[4]，其作用包括促進(jìn)局部的ROS產(chǎn)生[5-7]，增加腎臟對(duì)蛋白的通透性[7]，介導(dǎo)細(xì)胞毒性、凋亡和壞死等過程[8]。TNF-α可導(dǎo)致單個(gè)核-巨噬細(xì)胞系的聚集，通過調(diào)節(jié)血流動(dòng)力學(xué)影響GFR，還可導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞通透性的改變。在2型糖尿病的患者中，其血漿中的TNF-α的水平高于非糖尿病患者的3～4倍，而具有微量白蛋白尿的患者，其水平高于無蛋白尿的患者[9,10]，研究還證實(shí)，尿液中的TNF-α與DN疾病的進(jìn)展明顯相關(guān)[11]。針對(duì)這些免疫炎癥反應(yīng)通路，開發(fā)合適的干預(yù)藥物，將是未來DN患者治療的一個(gè)重要方向。除上述免疫炎癥通路外，小屋B系淋巴瘤(CBL)介導(dǎo)的配體誘導(dǎo)的表皮生長因子(EGF)受體下調(diào)通路和過氧化物酶體增殖物通過過氧化物酶體增殖物活化受體α(PPARα)調(diào)節(jié)基因的信號(hào)通路等也出現(xiàn)在共同調(diào)節(jié)的基因通路列表中，這些通路在既往也被證實(shí)同DN的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。

為進(jìn)一步觀察DN患者腎小球內(nèi)基因表達(dá)與腎功能的關(guān)系，我們分別利用兩個(gè)人種DN患者的腎小球全基因組表達(dá)數(shù)據(jù)與eGFR進(jìn)行了相關(guān)性分析。在中國漢族人群中和高加索人群中，分別有225個(gè)和293個(gè)基因與患者eGFR的變化相關(guān)。比較發(fā)現(xiàn)，共55個(gè)基因在兩個(gè)人種中均與eGFR密切相關(guān)。其中CRISPLD2、SPON1和LUM三種基因在中國漢族人群和高加索人群中同DN患者的eGFR的相關(guān)性均>0.6。這三種基因具有作為預(yù)測(cè)DN患者疾病進(jìn)展的潛力，但是其準(zhǔn)確性和精確度仍需要進(jìn)行一步的研究驗(yàn)證。上述在不同人種中均與eGFR密切相關(guān)的基因參與DN腎功能調(diào)節(jié)的具體機(jī)制仍有待深入研究。其中SPON1基因，既往研究中被認(rèn)為是高血壓相關(guān)基因[12]，并且在鹽和水的代謝中發(fā)揮作用，其編碼的F-脊椎蛋白，是一種多功能蛋白，在其羧基末端含有6個(gè)TSR，在其氨基末端含有兩個(gè)獨(dú)特的區(qū)域。F-脊椎蛋白既往被認(rèn)為是底板源性黏附蛋白，在神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過程中高表達(dá)，且在成熟神經(jīng)組織中并不高表達(dá)，其僅高表達(dá)于發(fā)育或是受損的神經(jīng)組織[13-15]。因此，其上調(diào)可能同感覺神經(jīng)再生有關(guān)。而有研究者推論在腎臟疾病發(fā)生過程中，F(xiàn)-脊椎蛋白變化可調(diào)節(jié)腎臟內(nèi)壓力，與腎臟功能的調(diào)節(jié)相關(guān)[16]。LUM編碼的蛋白表達(dá)于腎臟的內(nèi)皮細(xì)胞，有研究認(rèn)為其在維持腎臟濾過屏障中發(fā)揮了重要的作用，與腎臟的選擇性濾過密切相關(guān)[17]。

在兩個(gè)人種中與eGFR相關(guān)的基因還包括編碼足細(xì)胞特異性蛋白的基因PLA2R1，其編碼的磷脂酶A2受體的抗體是導(dǎo)致原發(fā)性膜性腎病的重要原因之一，但其在DN發(fā)生和發(fā)展中的作用仍不清楚。此外，Wnt/β-catenin通路中的多種蛋白編碼基因如WNT2B、WNT4和CTNNBIP1等均與DN患者的eGFR存在明顯相關(guān)性，提示W(wǎng)nt/β-catenin在DN疾病進(jìn)展中發(fā)揮了關(guān)鍵作用。既往有研究顯示，在DN等疾病中，足細(xì)胞內(nèi)存在Wnt1上調(diào)和β-catenin激活，可抑制足細(xì)胞表面特異性蛋白nephrin的表達(dá)，介導(dǎo)足細(xì)胞損傷[18]。細(xì)胞足細(xì)胞內(nèi)特異性的高表達(dá)Ctnnb1，可導(dǎo)致基膜異常、蛋白尿和腎小球損傷，而敲除足細(xì)胞內(nèi)的Ctnnb1同樣可導(dǎo)致DN表型。高表達(dá)Ctnnb1的足細(xì)胞，其活動(dòng)性降低，并且與基質(zhì)的黏附能力下降[19]。除足細(xì)胞外，Wnt/β-catenin通路的調(diào)節(jié)還與高糖情況下系膜細(xì)胞表型改變密切相關(guān)。因此，我們有理由相信，在糖尿病高糖背景存在的情況下，Wnt/β-catenin中的關(guān)鍵分子，如WNT2B、WNT4和CTNNBIP1等出現(xiàn)調(diào)節(jié)，引起足細(xì)胞和系膜細(xì)胞的表型變化及損傷，進(jìn)而影響患者腎臟功能。因此，糾正Wnt/β-catenin通路的異常調(diào)節(jié)，可能成為潛在的DN分子治療靶點(diǎn)，而WNT2B、WNT4和CTNNBIP1等基因能否作為DN患者疾病進(jìn)展分子標(biāo)志物也值得進(jìn)一步驗(yàn)證。

綜上所述，本研究通過比較中國漢族人群和高加索人群DN患者腎小球全基因組表達(dá)數(shù)據(jù)的差異，揭示了在兩個(gè)人種DN患者腎小球內(nèi)發(fā)生共同調(diào)節(jié)的一系列基因及其分子信號(hào)通路，證實(shí)了免疫炎癥通路在兩個(gè)人種DN的發(fā)生發(fā)展中均發(fā)揮了重要作用。針對(duì)在DN患者中發(fā)生明顯調(diào)節(jié)的分子信號(hào)通路，開發(fā)合適分子干預(yù)藥物，可能會(huì)是未來DN患者治療的一個(gè)重要研究方向。同時(shí)，本研究還揭示了CRISPLD2、SPON1、LUM等55個(gè)與兩個(gè)人種DN患者腎功能的變化存在明顯相關(guān)性，其中部分基因涉及的病理生理學(xué)過程可能參與了DN的疾病進(jìn)展，但其中大部分基因在DN或其他腎臟疾病進(jìn)展過程中的作用尚未被闡明，其具體分子機(jī)制尚待進(jìn)一步研究。

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