白細(xì)胞介素37在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎發(fā)病機(jī)制中的作用

陳歡雪，王曉非

（中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院風(fēng)濕免疫科，沈陽110004）

白細(xì)胞介素37在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎發(fā)病機(jī)制中的作用

陳歡雪，王曉非

（中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院風(fēng)濕免疫科，沈陽110004）

Role ofIL-37 in the Pathogenesisof Rheumatoid Arthritis

通過檢測類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）患者血清白細(xì)胞介素37（IL-37）水平，探討其在RA的發(fā)生及發(fā)展過程中的作用。結(jié)果表明，RA患者血清IL-37水平明顯升高，提示IL-37與疾病活動密切相關(guān)，作為一種抗炎性細(xì)胞因子，IL-37可能在RA的發(fā)生及發(fā)展過程中起保護(hù)性作用。

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎；白細(xì)胞介素37；腫瘤壞死因子α

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種以侵蝕性關(guān)節(jié)炎為特征的自身免疫性疾病，病理表現(xiàn)為關(guān)節(jié)滑膜的慢性炎癥及血管翳形成。炎癥持續(xù)存在可造成關(guān)節(jié)軟骨和骨破壞，最終導(dǎo)致關(guān)節(jié)畸形和功能喪失。其發(fā)病機(jī)制尚未完全明確。細(xì)胞因子的介導(dǎo)作用在RA的發(fā)生及發(fā)展過程中起重要作用。白細(xì)胞介素（interleukin，IL）是最具影響力的細(xì)胞因子之一。IL-37屬于IL-1家族，是近年來發(fā)現(xiàn)的抗炎性細(xì)胞因子［1］。研究證實，IL-37在多種炎性疾病和自身免疫性疾病的發(fā)生及發(fā)展過程中起保護(hù)性作用［2～5］。本研究通過酶聯(lián)免疫吸附試驗（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）方法檢測了RA患者及健康體檢者的血清IL-37水平，并與其他臨床數(shù)據(jù)及實驗室檢查指標(biāo)相結(jié)合，初步探討IL-37在RA的發(fā)生及發(fā)展過程中的作用。

1 材料與方法

1.1 研究對象及分組

收集2013年4月至8月在中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院風(fēng)濕免疫科住院的RA患者68例作為RA組。均符合2009年美國風(fēng)濕病學(xué)會/歐洲抗風(fēng)濕病聯(lián)盟（ACR/EULAR）RA分類診斷標(biāo)準(zhǔn)［6］。男11例，女57例。年齡21～79歲，平均（54.41±14.09）歲。病程1個月～50年，平均（6.62±9.38）年。根據(jù)RA疾病活動指數(shù)（disease activity score，DAS）評分［7］分為高度活動組（DAS28≥5.1）（n=39）和中度活動組（3.2≤DAS28＜5.1）29例（n=29）。

選擇我院體檢中心的健康體檢者20例作為對照組。男4例，女16例。年齡25～67歲，平均（53.50±10.55）歲。無RA或其他自身免疫性疾病及腫瘤病史。與RA組一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 觀察指標(biāo)

詳細(xì)記錄RA患者的臨床數(shù)據(jù)及實驗室檢查指標(biāo)，包括壓痛關(guān)節(jié)數(shù)、腫脹關(guān)節(jié)數(shù)、C反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP）、紅細(xì)胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate，ESR）、類風(fēng)濕因子（rheumatoid factor，RF）、抗環(huán)瓜氨酸肽（cyclic citrullinated peptide，CCP）抗體、DAS28評分等。

1.3 研究方法

采集受試者清晨空腹靜脈血3 mL。離心后取上清，置于-20℃保存待測。全部標(biāo)本一次性檢測。血清IL-37、腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）水平測定采用ELISA方法，試劑盒分別購自武漢優(yōu)爾生科技股份有限公司、欣博盛生物科技有限公司，嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析。計量資料以x±s表示。組間比較采用t檢驗，相關(guān)性檢驗采用直線相關(guān)分析并計算Pearson相關(guān)系數(shù)r。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血清IL-37、TNF-α水平的比較

RA組血清IL-37、TNF-α水平顯著高于對照組（P＜0.01），高度活動組顯著高于中度活動組及對照組（P＜0.01），中度活動組顯著高于對照組（P＜0.01）。見表1。

2.2 RA患者血清IL-37、TNF-α水平與各項臨床數(shù)據(jù)及實驗室檢查指標(biāo)的相關(guān)性

RA患者血清IL-37、TNF-α水平與患者的壓痛關(guān)節(jié)數(shù)、腫脹關(guān)節(jié)數(shù)、CRP、ESR、RF及DAS28評分呈正相關(guān)（P＜0.05），而與病程及抗CCP抗體無相關(guān)性（P＞0.05），且RA患者血清IL-37水平與血清TNF-α水平呈正相關(guān)（P＜0.01）。見表2。

3 討論

RA是一種臨床常見的以侵蝕性關(guān)節(jié)炎為特征的由免疫、感染、內(nèi)分泌、遺傳、環(huán)境等多因素參與的自身免疫性疾病。主要表現(xiàn)為慢性對稱性多關(guān)節(jié)炎，好發(fā)于手、腕、足等小關(guān)節(jié)，早期多為關(guān)節(jié)紅腫熱痛及功能障礙，晚期可出現(xiàn)不同程度的關(guān)節(jié)畸形，同時可伴有關(guān)節(jié)外多系統(tǒng)受累。RA世界平均患病率為0.5%～1%，我國為0.32%～0.36%［8］，其發(fā)病機(jī)制至今尚未完全明確。研究表明，自身免疫性疾病與促炎、抗炎性細(xì)胞因子的失衡密切相關(guān)，細(xì)胞因子的異常產(chǎn)生及相互作用在RA的發(fā)生及發(fā)展過程中起重要作用。

表1 各組血清IL?37、TNF?α水平的比較

表2 RA患者臨床數(shù)據(jù)及實驗室檢查指標(biāo)與血清IL?37、TNF?α的相關(guān)性

TNF-α是一種具有廣泛生物學(xué)活性的細(xì)胞因子，對維持機(jī)體的正常功能具有重要作用。TNF-α主要由RA患者外周血單核細(xì)胞和關(guān)節(jié)滑膜巨噬細(xì)胞分泌，在一定條件下也可由淋巴細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等產(chǎn)生。在疾病活動期和進(jìn)展期TNF-α呈現(xiàn)高水平分泌，并出現(xiàn)一系列臨床癥狀和局部關(guān)節(jié)組織的破壞，緩解期RA患者TNF-α水平相對低且穩(wěn)定，其濃度與RA患者疾病嚴(yán)重程度一致［9］。TNF-α已被公認(rèn)是RA發(fā)病過程中重要的促炎性細(xì)胞因子，其促進(jìn)RA發(fā)病的主要機(jī)制為：誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)黏附分子，促進(jìn)白細(xì)胞和血管內(nèi)皮黏附滲透，進(jìn)而導(dǎo)致局部炎癥［10］；通過刺激滑膜成纖維細(xì)胞、軟骨細(xì)胞產(chǎn)生前列腺素E2、膠原酶，促進(jìn)骨破壞、骨吸收和成纖維細(xì)胞增生，抑制骨膠原的合成［11］；增加滑膜、內(nèi)皮細(xì)胞及成纖維細(xì)胞生長因子釋放，導(dǎo)致血管翳形成［12］；促進(jìn)軟骨細(xì)胞分泌纖維蛋白溶酶激活劑，使纖維蛋白酶原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白，加快關(guān)節(jié)損傷的過程［13］。動物實驗證明，中和TNF-α能夠降低關(guān)節(jié)炎的嚴(yán)重程度［14］。目前，TNF-α單克隆抗體已經(jīng)成功應(yīng)用于RA患者的治療，并取得了良好效果［15，16］。本研究發(fā)現(xiàn)，血清TNF-α水平RA組顯著高于對照組，高度活動組顯著高于中度活動組及對照組，中度活動組水平顯著高于對照組，且RA患者血清TNF-α水平與患者的壓痛關(guān)節(jié)數(shù)、腫脹關(guān)節(jié)數(shù)、CRP、ESR、RF及DAS28評分呈正相關(guān)，與已有研究結(jié)果相符，說明血清TNF-α水平與RA疾病活動程度相關(guān)。

IL-37又稱IL-1F7（IL-1 family member 7），是IL-1家族的第7個成員。2000年Kumar等［2］首次發(fā)現(xiàn)了這種與IL-1家族成員具有共同結(jié)構(gòu)域的前體肽。IL-1家族絕大多數(shù)是促炎性細(xì)胞因子，通過刺激炎癥和自身免疫性疾病相關(guān)基因的表達(dá)，誘導(dǎo)環(huán)氧化酶、磷脂酶A2、干擾素γ、黏附分子等效應(yīng)蛋白的表達(dá)，在免疫性疾病的調(diào)節(jié)和炎癥進(jìn)程中扮演重要角色［17］。不同于其他IL-1家族成員，IL-37是一種天然的免疫應(yīng)答抑制物，能夠抑制多種炎性因子的表達(dá)。IL-37存在5種剪切變異體，即IL-37a、IL-37b、IL-37c、IL-37d和IL-37e，其中IL-37b是最大的，包含6個外顯子中的5個，也是外周血中IL-37的主要形式［3］。IL-37b與IL-18具有相似的同源序列，前體或成熟的IL-37b均可與IL-18受體α鏈（IL-18Rα）結(jié)合，但I(xiàn)L-37b并不影響IL-18的活性。IL-37在健康人體的不同組織中呈低度表達(dá)，發(fā)生炎性反應(yīng)時，其表達(dá)可顯著升高。用siRNA干擾外周血單核細(xì)胞（peripheral blood mononuclear cell，PBMC）表達(dá)IL-37b，會使促炎性細(xì)胞因子的合成大幅增加，而IL-10等炎癥抑制因子的表達(dá)未受到影響［5］。Nold等［5］通過動物實驗證明IL-37可以抑制感染性休克的發(fā)生。Mc-Namee等［4］發(fā)現(xiàn)，IL-37對葡聚糖硫酸鈉（dextran sulfate sodium，DSS）誘導(dǎo)的炎性腸病具有保護(hù)性作用。體外實驗表明，TNF-α等促炎性細(xì)胞因子可上調(diào)IL-37的表達(dá)，免疫組化染色發(fā)現(xiàn)，IL-37在活動期RA患者的滑膜組織中呈高水平表達(dá)，提示IL-37可能具有炎癥抑制作用，通過負(fù)反饋機(jī)制抑制過度的炎性反應(yīng)［5］。本研究結(jié)果亦發(fā)現(xiàn)，RA患者血清IL-37水平較正常對照組升高，且隨著疾病活動程度的增強(qiáng)，血清IL-37水平亦升高，同時，血清IL-37水平與患者的壓痛關(guān)節(jié)數(shù)、腫脹關(guān)節(jié)數(shù)、CRP、ESR、RF、DAS28評分及TNF-α水平呈正相關(guān)。說明IL-37作為一種抗炎性細(xì)胞因子，隨著炎性反應(yīng)的增強(qiáng)和促炎性細(xì)胞因子TNF-α的升高而升高，與疾病活動密切相關(guān)，可能在RA的發(fā)生及發(fā)展過程中起保護(hù)性作用。

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（編輯王又冬）

R593.22

A

0258-4646（2014）03-0275-02

遼寧省科學(xué)技術(shù)計劃（2011225015）；沈陽市科學(xué)技術(shù)計劃（F12-277-1-85）

陳歡雪（1987-），女，碩士研究生.

王曉非，E-mail：wangxf@sj-hospital.org

2013-12-18

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