中藥及免疫治療在白血病中的應(yīng)用

陳慧玲，胡婉麗，趙 嫄(綜述)，張連生(審校)

(蘭州大學(xué)第二醫(yī)院血液腫瘤科，蘭州 730030)

惡性腫瘤是危害人類健康的常見(jiàn)疾病。最新統(tǒng)計(jì)，腫瘤所致的死亡已占我國(guó)城市人口死因的第一位，農(nóng)村死亡原因的第二位[1]。在其所致的病死率中，白血病居第6位(男性)和第8位(女性)，但在兒童和35歲以下的成人死亡原因中白血病居第一位[1]。化療可使70%～80%的初治白血病患者獲得完全緩解，但除急性早幼粒細(xì)胞白血病及兒童標(biāo)危組急性B細(xì)胞淋巴細(xì)胞白血病(B-cell acute lymphocytic leukemia，B-ALL)外，化療作為維持治療所達(dá)到的完全緩解率則仍然很低[1]。異基因造血干細(xì)胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation，Allo-HSCT)目前仍是根治急性白血病(除急性早幼粒細(xì)胞白血病外)的首選方法，但很多患者受限于供者來(lái)源和經(jīng)濟(jì)條件的限制，無(wú)法行Allo-HSCT。消除殘留白血病細(xì)胞的其他重要途徑有免疫治療和中藥治療。

1 免疫治療在白血病中的應(yīng)用

1.1單克隆抗體靶向治療 特異性抗體結(jié)合于白血病細(xì)胞表達(dá)的細(xì)胞表面抗原可誘導(dǎo)激活免疫反應(yīng)，產(chǎn)生溶瘤、殺瘤作用。

1.1.1美羅華 其是抗CD20單抗，CD20表達(dá)于多數(shù)B細(xì)胞，其功能與B細(xì)胞的活化、增殖及分化有關(guān)。美羅華是完成臨床研究并進(jìn)入臨床應(yīng)用的第一個(gè)單抗，美國(guó)食品藥品管理局于1997年批準(zhǔn)其作用于低度惡性淋巴瘤。實(shí)驗(yàn)室及臨床研究均證實(shí)美羅華在CD20+的B細(xì)胞惡性淋巴瘤中療效良好，并已廣泛應(yīng)用于臨床。1998年進(jìn)行的一項(xiàng)較大規(guī)模、前瞻性、多中心合作的美羅華單藥臨床研究顯示總有效率為48%，完全緩解為6%，部分緩解率為42%[1]。在白血病的治療上，有報(bào)道美羅華治療難治復(fù)發(fā)的B-ALL取得一定療效[2]。

1.1.2HuM195 其是人源化的抗CD33單抗，含364個(gè)氨基酸，相對(duì)分子質(zhì)量為39.2×103，主要表達(dá)于各種粒細(xì)胞和單核細(xì)胞，但早期祖細(xì)胞、正常淋巴細(xì)胞、紅細(xì)胞及血小板上不表達(dá)。85%的急性髓細(xì)胞白血病(acute myelocytic leukemia,AML)原始細(xì)胞上表達(dá)CD33,很少的ALL原始細(xì)胞上也表達(dá)CD33。HuM195通過(guò)抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞殺傷作用對(duì)CD33+白血病細(xì)胞產(chǎn)生較強(qiáng)的殺傷作用。Feldman等[3]觀察191例難治復(fù)發(fā)AML,應(yīng)用HuM195聯(lián)合MEC(米托蒽醌、依托泊苷注射液、阿糖胞苷)化療與單用MEC方案比較，兩組完全緩解率及部分緩解率分別為36%和28%，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，證實(shí)HuM195治療AML雖有效，但不令人滿意。

1.1.3Camapth-1 H 其是一種重組人源化抗CD52單抗，CD52表達(dá)于淋巴細(xì)胞，在中性粒細(xì)胞上不表達(dá)。Camapth-1 H用于治療難治或氟達(dá)拉濱耐藥的慢性淋巴細(xì)胞白血病有效率為33%～70%，治療初治慢性淋巴細(xì)胞白血病有效率可達(dá)87%，完全緩解率為19%，治療幼淋巴細(xì)胞白血病療效顯著，有報(bào)道顯示，39例T細(xì)胞幼淋巴細(xì)胞白血病完全緩解率高達(dá)60%[4-6]。

1.1.4單抗與毒素耦聯(lián) 此類耦聯(lián)物又稱免疫毒素，目前應(yīng)用的主要有蓖麻毒素、白喉毒素及假單胞菌外毒素，其在白血病治療上已進(jìn)入臨床研究，并取得一定療效，但廣泛應(yīng)用有待進(jìn)一步研究[7]。

1.1.5單抗與藥物耦聯(lián) Mylotary(美羅他格)是一種人源化抗CD33單抗接上一種細(xì)胞毒抗生素加利東毒素(calicheamicin)組合而成，其注入人體后，結(jié)合在細(xì)胞膜CD33的兩個(gè)涎酸結(jié)合部位，形成復(fù)合物，然后進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，在溶酶體內(nèi)釋放加利東毒素衍生物，后者結(jié)合在DNA上使DNA雙鏈斷裂，從而起到殺傷作用。2000年5月，美國(guó)食品藥品管理局批準(zhǔn) Mylotary用于60歲以上CD33陽(yáng)性的AML復(fù)發(fā)患者。目前，臨床上主要用于老年不能耐受化療的AML(單劑)、復(fù)發(fā)AML(單劑或與化療聯(lián)合)、急性早幼粒細(xì)胞白血病的分子學(xué)復(fù)發(fā)及CD33+的ALL[8-9]。

1.1.6單抗與放射性核素耦聯(lián) Zevalin(益華啉)由抗CD20單抗與90Y(一種β射線放射性核素)耦聯(lián)而成。美國(guó)食品藥品管理局于2002年批準(zhǔn)其臨床應(yīng)用于治療難治復(fù)發(fā)低度惡性、濾泡性淋巴瘤，總有效率可達(dá)74%～83%，完全緩解率為15%～51%，比美羅華有更顯著的療效[10-12]。在B細(xì)胞白血病上的應(yīng)用有待于進(jìn)一步的臨床觀察。其他核素標(biāo)記的單抗，如131I-HuM915、90Y-HuM915,通過(guò)CD33單抗與抗原結(jié)合，治療難治復(fù)發(fā)AML也取得一定療效。

1.2過(guò)繼免疫治療 過(guò)繼免疫治療是向腫瘤患者輸注具有抗腫瘤活性的免疫細(xì)胞,直接殺傷或激發(fā)機(jī)體免疫反應(yīng),達(dá)到治療腫瘤的目的。

1.2.1淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞 淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞(lymphokine activated killer cells,LAK)是以CD11b-、CD3+、CD56+標(biāo)志為主的一群異質(zhì)細(xì)胞，其特點(diǎn)是無(wú)主要組織相容性復(fù)合體限制性，幾乎對(duì)所有的腫瘤具有殺傷作用，但其體內(nèi)殺傷活性依賴于白細(xì)胞介素(interleukin,IL)2，因其臨床療效不十分理想，加之大劑量IL-2的不良反應(yīng)，目前臨床已很少使用。

1.2.2腫瘤浸潤(rùn)性淋巴細(xì)胞 1896年有學(xué)者從實(shí)體腫瘤中分離得到腫瘤浸潤(rùn)性淋巴細(xì)胞，在體外經(jīng)IL-2培養(yǎng)后，具有比LAK更強(qiáng)的殺瘤活性，體內(nèi)僅需少量IL-2即可發(fā)揮明顯的抗腫瘤效應(yīng)，不良反應(yīng)少。目前腫瘤浸潤(rùn)性淋巴細(xì)胞在黑色素瘤及腎癌中療效較好，在血液腫瘤中的應(yīng)用主要與自體造血干細(xì)胞移植聯(lián)合，降低移植后復(fù)發(fā)，取得初步臨床療效。

1.2.3細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞 細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷(cytokine induced killer，CIK)細(xì)胞是多種細(xì)胞因子激活的殺傷細(xì)胞，表型為CD3+、CD56+。1991年斯坦福大學(xué)Schmidt教授首先介紹了這種細(xì)胞的培養(yǎng)程序，外周血單個(gè)核細(xì)胞先被干擾素γ預(yù)先刺激，然后再加入IL-2、抗CD3單抗及IL-1，經(jīng)過(guò)這種程序得到的殺傷細(xì)胞，抗腫瘤活性遠(yuǎn)高于LAK細(xì)胞[13]。因CIK細(xì)胞兼具有T淋巴細(xì)胞強(qiáng)大的抗瘤活性和自然殺傷(natural killer cell，NK)細(xì)胞非主要組織相容性復(fù)合體限制殺瘤特點(diǎn)，CIK細(xì)胞用于過(guò)繼免疫治療引起極大關(guān)注。CIK細(xì)胞對(duì)各種類型白血病均有一定療效，特別是對(duì)微小殘留病變的清除[14]。另外，CIK細(xì)胞對(duì)泌尿生殖系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)和消化系統(tǒng)腫瘤亦有肯定療效。

1.2.4樹(shù)突狀細(xì)胞 樹(shù)突狀細(xì)胞(dendritic cells，DC)是具有典型樹(shù)突狀形態(tài)、膜表面表達(dá)主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類分子、能移行至淋巴器官和刺激初始型T細(xì)胞增殖活化的細(xì)胞，是目前已知的腫瘤抗原呈遞能力最強(qiáng)的抗原呈遞細(xì)胞。白血病祖細(xì)胞具有表達(dá)CD34分子的特性，在體內(nèi)外經(jīng)細(xì)胞因子刺激培養(yǎng)，可以生產(chǎn)具有抗原呈遞能力的DC。研究表明，經(jīng)此途徑來(lái)源的DC能呈遞白血病相關(guān)抗原到T細(xì)胞，激活殺傷T細(xì)胞，產(chǎn)生有效的抗白血病效應(yīng)。大多數(shù)白血病存在WT1+基因高表達(dá)，Ohminami等[15]報(bào)道，以WT1+蛋白刺激DC，能有效誘導(dǎo)產(chǎn)生對(duì)WT1+腫瘤細(xì)胞有明顯殺傷作用的T細(xì)胞克隆。另外，白血病抗原沖擊的DC，在造血干細(xì)胞移植后應(yīng)用，可明顯減少移植后復(fù)發(fā)，提高無(wú)病生存率，應(yīng)用供者來(lái)源活化的DC，能有效治療急性白血病Allo-HSCT后的復(fù)發(fā)。

1.2.5NK細(xì)胞 NK細(xì)胞是一種無(wú)B和T淋巴細(xì)胞特征性表達(dá)的淋巴細(xì)胞，其對(duì)靶細(xì)胞的殺傷不依賴于預(yù)先的免疫刺激，可殺傷病原菌感染細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞，而對(duì)機(jī)體自身組織細(xì)胞無(wú)細(xì)胞毒作用。在HSCT中，NK細(xì)胞有重要作用。在HLA不相合的HSCT中，NK細(xì)胞通過(guò)殺傷抑制性受體對(duì)抗原呈遞細(xì)胞的識(shí)別，殺傷受者體內(nèi)殘存的抗原呈遞細(xì)胞，達(dá)到既能抑制移植物抗宿主病的發(fā)生，又能降低移植后的排斥反應(yīng)，減少?gòu)?fù)發(fā)的目的。

1.2.6腫瘤抗原特異性細(xì)胞毒T細(xì)胞 近年來(lái)，由于對(duì)腫瘤特異性抗原的認(rèn)識(shí)不斷加深及鑒定手段的提高，使誘導(dǎo)腫瘤特異性細(xì)胞毒T細(xì)胞成為可能，給腫瘤患者回輸腫瘤抗原特異性細(xì)胞毒T細(xì)胞，靶向清除腫瘤細(xì)胞是過(guò)繼免疫治療最理想的方法。臨床已開(kāi)展部分白血病抗原誘導(dǎo)的特異性細(xì)胞毒T細(xì)胞相關(guān)研究，最早采用的是供者淋巴細(xì)胞輸注，隨后進(jìn)行有選擇性的T細(xì)胞輸注，逐漸發(fā)展成為特異性細(xì)胞毒T細(xì)胞治療，但尚未全面應(yīng)用。

1.3細(xì)胞因子和其他治療免疫調(diào)節(jié)劑 細(xì)胞因子在調(diào)控細(xì)胞增殖分化、免疫應(yīng)答、調(diào)控造血、組織修復(fù)，腫瘤免疫等多種生理及病理過(guò)程中起重要作用。細(xì)胞因子在體內(nèi)主要通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞毒T細(xì)胞、NK細(xì)胞及DC等免疫細(xì)胞的功能和腫瘤細(xì)胞表面與免疫識(shí)別相關(guān)分子的表達(dá)而發(fā)揮作用。目前進(jìn)入臨床試驗(yàn)的有粒細(xì)胞集落刺激因子、粒-巨噬細(xì)胞集落刺激因子、IL-12及IL-11等，免疫調(diào)節(jié)劑主要有沙利度胺及其衍生物。它們都具有廣泛的免疫調(diào)節(jié)作用，且不良反應(yīng)少，與單抗、過(guò)繼免疫及疫苗聯(lián)合應(yīng)用，可能更有效，值得進(jìn)一步研究。

1.4疫苗治療 疫苗治療屬于主動(dòng)免疫治療，通過(guò)腫瘤特異性抗原，激發(fā)機(jī)體的免疫監(jiān)視系統(tǒng)，消滅殘存的腫瘤細(xì)胞。血液腫瘤免疫治療的研究起步不久，大多處于臨床前期階段。

1.4.1抗原特異性疫苗 最早研究的是獨(dú)特型免疫球蛋白疫苗，是用獨(dú)特型免疫球蛋白作為腫瘤相關(guān)抗原，進(jìn)行主動(dòng)免疫，使機(jī)體產(chǎn)生抗腫瘤作用。由于免疫球蛋白僅由B細(xì)胞產(chǎn)生，獨(dú)特型免疫球蛋白疫苗用于B細(xì)胞相關(guān)惡性淋巴瘤。新一代的制劑，如DNA疫苗、病毒載體疫苗等，制備方便，價(jià)格低廉，且臨床前實(shí)驗(yàn)顯示能誘導(dǎo)更強(qiáng)的特異性免疫反應(yīng)和殺傷腫瘤細(xì)胞。腫瘤特異性抗原/腫瘤相關(guān)抗原肽段疫苗+佐劑已處于臨床試驗(yàn)中，如BCR/ABL肽段疫苗治療慢性髓系白血病，WT1肽段疫苗治療AML/骨髓增殖性疾病。

1.4.2核酸疫苗 利用基因工程技術(shù)，以腫瘤相關(guān)抗原核酸包括DNA、RNA等構(gòu)建質(zhì)粒，免疫機(jī)體，通過(guò)在體內(nèi)表達(dá)腫瘤相關(guān)抗原物質(zhì)，誘導(dǎo)機(jī)體抗腫瘤免疫反應(yīng)[16-17]。

1.4.3DC疫苗 用基因工程技術(shù)將與免疫相關(guān)的基因轉(zhuǎn)染到DC，通過(guò)基因修飾DC，增強(qiáng)DC的抗原呈遞能力。修飾DC的基因可以是細(xì)胞因子基因，如IL-2、粒-巨噬細(xì)胞集落刺激因子等，也可把腫瘤相關(guān)抗原基因片段(如BCL/ABL、PML/RARα)轉(zhuǎn)染至DC，使DC表達(dá)腫瘤相關(guān)抗原，或者直接從腫瘤細(xì)胞的前體細(xì)胞誘導(dǎo)產(chǎn)生DC，而制備DC疫苗；DC疫苗用于血液腫瘤微小殘留病變及HSCT后的免疫治療[18-19]。

白血病細(xì)胞來(lái)源的DC(L-DC)疫苗也是目前研究的熱點(diǎn)[20-21]。用常規(guī)DC誘導(dǎo)的方法(粒-巨噬細(xì)胞集落刺激因子+IL-4+腫瘤壞死因子α)可以從多種白血病細(xì)胞誘導(dǎo)培養(yǎng)出L-DC，并具有成熟DC的特性。但研究表明，一些L-DC的表型和功能有缺陷，分化不徹底，因此L-DC疫苗具有潛在的臨床應(yīng)用前景，但還有許多問(wèn)題有待解決。

2 中藥在白血病中的應(yīng)用

近年來(lái)，越來(lái)越多的臨床研究表明，與單用化療藥物相比，中藥配合化療可提高白血病緩解率，延長(zhǎng)生存期，改善生活質(zhì)量，起到增效減毒的協(xié)同作用。

2.1提高機(jī)體免疫力 中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，人體是一個(gè)統(tǒng)一的有機(jī)整體，當(dāng)機(jī)體受到內(nèi)外因的侵襲后，體內(nèi)外的平衡狀態(tài)就會(huì)遭到破壞，表現(xiàn)相應(yīng)癥狀。白血病患者常因先天免疫功能低下或后天因素導(dǎo)致機(jī)體防御功能減弱，對(duì)“邪毒”抵御不力而發(fā)病。引起白血病的內(nèi)因主要是正氣虛弱、臟腑失調(diào)、氣血逆亂及七情內(nèi)傷等?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究認(rèn)為，白血病患者存在免疫功能低下，包括CD3及CD4下降，CD8升高，NK細(xì)胞活性下降等，提高白血病患者的免疫功能是長(zhǎng)期存活的關(guān)鍵，研究證實(shí)，許多扶正中藥，如人參、黃芪、枸杞子、茯苓、女貞子、甘草等具有調(diào)節(jié)免疫功能、提高NK細(xì)胞活性、增加抗白血病的能力[22-23]。

2.2促進(jìn)細(xì)胞凋亡 細(xì)胞凋亡是有一種由基因調(diào)控的細(xì)胞的自主性死亡過(guò)程，細(xì)胞凋亡受阻是白血病發(fā)病的重要原因之一，臨床上用于治療白血病的化療藥物相當(dāng)部分是通過(guò)誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡而顯效的。有資料表明，許多中藥能通過(guò)干擾細(xì)胞代謝和增殖過(guò)程，而最終誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[24-26]。

2.3誘導(dǎo)細(xì)胞分化 白血病是造血干/祖細(xì)胞分化受阻于不同階段的結(jié)果，這種分化障礙能否被解除或逆轉(zhuǎn)直接關(guān)系到白血病治療的方案。證實(shí)維甲酸可誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞株分化成熟及全反式維甲酸在急性早幼粒細(xì)胞白血病中的應(yīng)用后，誘導(dǎo)分化治療成為白血病治療的研究熱點(diǎn)之一。探討高效低毒的中藥單體及復(fù)合制劑誘導(dǎo)分化已受到眾多學(xué)者的重視。人參皂甙、苦參、熊膽、巴豆、葛根素、三七皂甙等通過(guò)體外細(xì)胞培養(yǎng)證實(shí)具有誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞向成熟細(xì)胞分化的作用。

2.4逆轉(zhuǎn)多藥耐藥 多藥耐藥是白血病化療失敗和復(fù)發(fā)的主要原因。探討中藥逆轉(zhuǎn)耐藥是近年來(lái)治療白血病研究的一大熱點(diǎn)。不少學(xué)者參照國(guó)外研究成果，從多藥耐藥基因編碼的p170糖蛋白與多藥耐藥關(guān)系著手，發(fā)現(xiàn)了一些具有逆轉(zhuǎn)作用的中藥復(fù)方和中藥活性成分，如川芎、前胡、丹參、黃芩、赤芍、茵陳、大黃、五味子、當(dāng)歸、澤瀉、桃紅、補(bǔ)骨脂、金錢草等[27]。

2.5介導(dǎo)生物學(xué)治療 如前所述，腫瘤生物治療發(fā)展迅速，在白血病治療領(lǐng)域有明顯療效。人參、黃芪、冬蟲夏草、枸杞子、黨參、參三七、刺五加等補(bǔ)益中藥，有良好的促進(jìn)IL-2產(chǎn)生、提高NK細(xì)胞、DC及CIK細(xì)胞的殺傷作用，尤其是補(bǔ)益類復(fù)方，可明顯增強(qiáng)NK細(xì)胞、CIK細(xì)胞活性，發(fā)揮抗白血病的免疫作用[28]。

2.6提高骨髓移植成活率 骨髓移植前預(yù)處理常有嚴(yán)重不良反應(yīng),移植后長(zhǎng)并發(fā)急性或慢性移植物抗宿主病、肝靜脈阻塞病、出血性膀胱炎，給患者帶來(lái)巨大痛苦，并使其病死率居高不下。骨髓移植配合滋陰潛陽(yáng)、調(diào)和脾胃的中藥治療能極大地減輕骨髓移植產(chǎn)生的并發(fā)癥[29]。

中藥治療白血病的深入研究和確切的臨床療效顯示其獨(dú)特優(yōu)勢(shì)和強(qiáng)大的生命力。隨著實(shí)驗(yàn)及臨床資料的積累，藥理學(xué)、生物信息學(xué)、生物信息學(xué)、生物芯片技術(shù)等相關(guān)生命科學(xué)理論與技術(shù)的發(fā)展，可望在中藥治療白血病方面開(kāi)展大規(guī)模臨床和試驗(yàn)研究，使其在白血病治療領(lǐng)域做出貢獻(xiàn)。

3 中藥聯(lián)合免疫治療在白血病中的應(yīng)用

免疫治療及中藥在白血病治療方面均顯示出其明顯療效，中藥可能通過(guò)介導(dǎo)免疫調(diào)節(jié)及減少免疫治療的副作用而增強(qiáng)免疫治療的療效。調(diào)和營(yíng)衛(wèi)、益氣解表等中藥除了可以對(duì)癥治療免疫制劑的不良反應(yīng)外，某些中草藥，如黃芪、黨參、靈芝、人參、魚腥草、蒲公英、山豆根等，自身就具有免疫調(diào)節(jié)作用，通過(guò)改善患者全身狀況，健全患者的免疫機(jī)制，避免腫瘤免疫逃逸的發(fā)生。已知中藥黃芪多糖、茯苓多糖等植物多糖能通過(guò)誘導(dǎo)NK細(xì)胞、CIK細(xì)胞等免疫活性細(xì)胞的增殖、分化和成熟，介導(dǎo)細(xì)胞免疫，抑制腫瘤生長(zhǎng)[30]。但目前用中藥聯(lián)合免疫治療治療白血病的臨床試驗(yàn)并不多，更缺乏多中心隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)，其確切療效需進(jìn)一步評(píng)價(jià)。

4 結(jié) 語(yǔ)

中藥及免疫治療在白血病治療方面的作用日益受到重視，兩者單獨(dú)作用已取得了一定療效，兩者聯(lián)合應(yīng)用既可以補(bǔ)充傳統(tǒng)治療的不足，還能達(dá)到治愈白血病的效果。進(jìn)一步研究其作用的最佳方式及給藥途徑，有利于我國(guó)傳統(tǒng)中藥的開(kāi)發(fā)利用，也為白血病的免疫治療提供新的思路。

[1] McLaughlin P,Grillo-López AJ,Link BK,etal.Rituximab chimeric anti-CD20monoclonal antibody therapy for relapsed indolent lymphoma:half of patients respond to a four-dose treatment program[J].J Clin Oncol,1998,16(8):2825-2833.

[2] Parikh SA,Keating MJ,O′Brien S,etal.Frontline chemoimmunotherapy with fludarabine,cyclophosphamide,alemtuzumab,and rituximab for high-risk chronic lymphocytic leukemia[J].Blood,2011,118(8):2062-2068.

[3] Feldman E,KalaycioM,Weiner G,etal.Treatment of relapsed or refractory acute myeloid leukemia with humanized anti-CD33monoclonal antibody HuM195[J].Leukemia,2003,17(2):314-318.

[4] Dearden CE,Matutes E,Cazin B,etal.High remission rate in T-cell prolymphocytic leukemia with CAMPATH-1H[J].Blood,2001,98(6):1721-1726.

[5] Keating MJ,Flinn I,Jain V,etal.Therapeutic role of alemtuzumab(CAMPATH-1H)in patients who have failed fludarabine:results of a large international study[J].Blood,2002,99(10):3554-3561.

[6] Lundin J,Kimby E,Bjorkholm M,etal.Phase Ⅱ trial of subcutaneous anti-CD52monoclonal antibody alemtuzumab(CAMPATH-1H)as first-line treatment for patients with B-cell chronic lymphocytic leukaemia( B-CLL)[J].Blood,2002,100(3):768-773.

[7] Mosmann T.Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival：application to proliferation and cytotoxicity assay[J].J Immunol Methods，1983，65(1)：55-63.

[8] Taksin AL,Legrand O,Raffoux E,etal.Hish efficacy and safety profile of fractionated doses of Mylotarg ag induction therapy in patients with relapsed acute myeloblastic leukemia：a prospective study of the alfa group[J].Leukemia，2007，21(1)：66-71.

[9] Wadleigh M,Richardson PG,Zahrieh D,etal.Prior gemtuzumab ozogamicin exposure significantly increases the risk of veno-occlusive disease in patients who under go myeloablative allogeneic stem cell transplantation[J].Blood,2003,102(5):1578-1582.

[10] Witzig TE,Gordon LI,Cabanillas F,etal.Randomized controlled trial of yttrium-90-labeled ibritumomab tiuxetan radioimmunotherapy versus rituximab immunotherapy for patients with relapsed or refractory low-grade,follicular,or transformed B-cell non-Hodgkin′s lymphoma[J].J Clin Oncol,2002,20(10):2453-2463.

[11] Witzig TE,Flinn IW,Gordon LI,etal.Treatment with ibritumom with tiuxetan radioimmunotherapy in patients with rituximab-refractory follicular non-Hodgkin′s lymphoma[J].J Clin Oncol,2002,20(15):3262-3269.

[12] Cheson BD.Radioimmunotherapy of non-Hodgkin lymphomas[J].Blood,2003，101(2):391-398.

[13] Hoyle C,Bangs CD,Chang P,etal.Expansion of Philadelphia chromosome negative CD3+CD56+cytotoxic cells from chronic myeloid leukemia patients:in vitro and invivo efficacy in severe combined immunodeficiency disease mice[J].Blood,1998,92(9):3 318-3327.

[14] Hoffman DM,Gitlitz BJ,Belldegmn A,etal.Adoptive cellular therapy[J].Semin Oncol,2000,27(2):221-233.

[15] Ohminami H,Yasukawa M,Fujita S.HLA class I-restricted lysis of leukemia cells by a CD8+cytotoxic T-lymphocyte clone specific for WT1 peptide[J].Blood,2000,195(1):286-293.

[16] Robinson HL,Hunt LA,Webster RG,etal.Protection against aletha linfluenza virus challenge by mmunization with a haemagglutin in expressing plasmid DNA[J].Vaccine,1993,11(9):957-960.

[17] Whitton JL,Rodriguez F,Zhang J,etal.DNA immunization:mechanistic studies[J].Vacxine,1999,17(13):1612-1619.

[18] Lim MN,Leong CF,Cheong SK,etal.Generation of dendritic cells from acute myeloid leukaemia cells and monocytes:our local experience[J].Malays J Pathol,2003,25(2):107-112.

[19] Savchenko VG,Sadovnikova EIu,Parovichnikova EN,etal.The induction of the antitumor activity of T-lymphocytes by antigenpresenting cells obtained from the blast cells of patients with acute leukemias[J].Ter Arkh,2000,72(7):14-21.

[20] Gong J,Koido S,Kato Y,etal.Induction of anti-leukemic cytotoxic T lymphocytes by fusion of patient-derived dendritic cells with autologous myeloblasts[J].Leuk Res,2004,28(12):1303-1312.

[21] Weigel BJ，Panoskaltsis-Mortari A，Diem M，etal.Dendritic cells pulsed or fused with AML cellular antigen provide comparable in vivo antitumor protective responses[J].Exp Hematol,2006，34(10):1403-1412.

[22] 黃禎.黃茂多糖的藥理研究進(jìn)展[J].中國(guó)臨床藥學(xué)雜志,2002,11(5):315-317.

[23] Choi EM,Kim AJ,Kim YO,etal.Immunomodulating activity of arabinogalactan and fucoidan in vitro[J].J Med Food,2005,8(4):446-453.

[24] 王振義.開(kāi)展砷劑治療白血病的臨床和機(jī)制研究[J].中華血液學(xué)雜志,1996,17(2):57-59.

[25] 張鵬,王樹(shù)葉,胡龍虎,等.三氧化二砷注射液治療72例急性早幼粒白血病[J].中華血液學(xué)雜志,1996,17(2):58-60.

[26] 孫鴻德,馬玲,胡曉晨,等.癌靈1號(hào)結(jié)合中醫(yī)辨證治療急性早幼粒白血病32例[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志,1992,12(3):170-173.

[27] 梁蓉,楊平地,陳協(xié)群,等.川芎嗪和(或)環(huán)孢素A對(duì)HL-60/HT細(xì)胞耐藥的逆轉(zhuǎn)[J].中華內(nèi)科雜志,1999,38(4):260-263.

[28] 黃海茵,于爾辛.中藥對(duì)NK、LAK細(xì)胞及IL-2活性的影響[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志,1993,13(4):253-255.

[29] 丁宗鐵.骨髓移植前試服漢方l劑[J].漢方の臨床,1992,39(2):35.

[30] 曹廣文.黃芪多糖、刺五加多糖和枸杞多糖在體內(nèi)對(duì)LAK細(xì)胞抗腫瘤活性的調(diào)節(jié)作用[J].第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),1993,14(10):28-31.