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    中藥標準物質(zhì)在中藥飲片質(zhì)量控制中的應用

    2014-02-11 21:12:15陸兔林李金慈于江泳蔡寶昌毛春芹殷放宙
    中國中藥雜志 2014年1期
    關鍵詞:中藥飲片質(zhì)量控制

    陸兔林+李金慈+于江泳+蔡寶昌+毛春芹+殷放宙

    [摘要] 中藥標準物質(zhì)在中藥飲片質(zhì)量控制中發(fā)揮了重要作用。該文介紹了目前中藥標準物質(zhì)的發(fā)展概況,通過分析2010年版《中國藥典》,總結了中藥標準物質(zhì)在中藥飲片質(zhì)量控制中的應用現(xiàn)狀,探討了當前飲片質(zhì)量控制體系中存在的問題,并提出,在中藥飲片質(zhì)量控制水平不斷提高的進程中,應當采用各種先進的技術手段來研究中藥飲片特征性標準物質(zhì),在飲片質(zhì)量控制體系中引入更多、更合理的標準物質(zhì)。文章從中藥標準物質(zhì)層面闡述了解決飲片質(zhì)量標準問題的思路,并對中藥飲片質(zhì)量控制的發(fā)展前景進行展望。

    [關鍵詞] 標準物質(zhì);中藥飲片;質(zhì)量控制

    [收稿日期] 2013-05-15

    [基金項目] 國家“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(2009ZX09308);2012年中醫(yī)藥行業(yè)科研專項(201207004)

    [通信作者] *陸兔林,教授,博士生導師,主要從事中藥質(zhì)量控制及炮制研究,Tel:13951636763,E-mail:lutuling2005@126.com 中藥炮制是按照中醫(yī)藥理論,根據(jù)藥材自身性質(zhì),以及調(diào)劑、制劑和臨床應用的需要,所采取的一項獨特的制藥技術。藥材經(jīng)炮制后得到的飲片,既可直接用于臨床配方,又可用于中藥制劑的生產(chǎn),其質(zhì)量優(yōu)劣直接影響到療效的好壞。因此,系統(tǒng)深入的研究制定飲片質(zhì)量標準與評價方法顯得尤為重要。目前,《中國藥典》和各省、市、自治區(qū)地方炮制規(guī)范共同形成了中藥飲片的質(zhì)量標準體系。中藥標準物質(zhì)(包括中藥化學對照品、對照藥材與對照提取物)在中藥飲片質(zhì)量控制中發(fā)揮了重要作用。但中藥成分復雜,且炮制過程又是藥物的理化性質(zhì)發(fā)生復雜變化的過程,因此飲片的物質(zhì)基礎——化學成分更加復雜。采用當前的質(zhì)量評價方法與質(zhì)量控制標準,尚存在一定的缺陷,這也在一定程度上制約了飲片產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展,影響了中藥的現(xiàn)代化與國際化進程。因此,只有研究建立更加科學、完善、合理、可控的質(zhì)量評價標準,保障中藥飲片的安全性、有效性、穩(wěn)定性和質(zhì)量可控性,才能使中藥在國際市場占有一席之地。本文對中藥標準物質(zhì)的概況及其在中藥飲片質(zhì)量控制中的應用現(xiàn)狀作簡要綜述,對當前中藥飲片質(zhì)量控制中存在的問題加以分析探討,并提出解決問題的思路。

    1 中藥標準物質(zhì)的定義、分類與選擇原則

    《國家藥品標準物質(zhì)管理辦法》第三條規(guī)定:“國家藥品標準物質(zhì)是指供國家藥品標準中物理和化學測試及生物方法試驗用,具有確定特性量值,用于校準設備、評價測量方法或者給供試品賦值的材料或物質(zhì)?!逼渲校兴帢藴饰镔|(zhì)是國家頒布的一種計量標準,是定性、定量檢測中藥所使用的實物對照,必須具有高度均勻性、量值準確性和良好的穩(wěn)定性。目前中藥標準物質(zhì)可分為中藥化學對照品(包括內(nèi)標物)、對照藥材和對照提取物。

    依據(jù)《國家藥品標準物質(zhì)技術規(guī)范》,中藥對照物質(zhì)的選擇原則可歸納為:①新建標準物質(zhì)必須考慮其制備、標定、保存和分發(fā)使用的可能性;②專屬性強、穩(wěn)定性強、可大量制備;③質(zhì)量控制標準中所采用的中藥化學對照品物質(zhì)要有可靠性。此外,該指導原則對中藥化學對照品、對照藥材和對照提取物的標定都制定了較為具體的技術細則。

    2 中藥飲片質(zhì)量標準概況

    中藥飲片質(zhì)量的優(yōu)劣直接影響到療效的好壞,規(guī)范、穩(wěn)定、可控的炮制工藝技術是中藥飲片質(zhì)量的根本保證。深入研究中藥飲片質(zhì)量標準、建立中藥飲片質(zhì)量評價體系對于控制飲片質(zhì)量具有重要意義。目前,《中國藥典》和省、市、自治區(qū)地方炮制規(guī)范共同形成了中藥飲片的質(zhì)量標準體系?!吨袊幍洹纷鳛槲覈幤窓z驗的最高標準,收載的飲片數(shù)目不斷增加,2005年版收載中藥飲片13種,2010年版收載中藥飲片439種,總品種數(shù)822種,即將修訂的2015年版《中國藥典》計劃新增43%的品種。中藥飲片的質(zhì)量評價由形態(tài)、性狀、氣味及簡單的理化鑒別方法,逐步發(fā)展成為一個質(zhì)量標準體系,具體包含以下15項內(nèi)容:名稱、來源、制法、性狀、鑒別、檢查、輔料測定、浸出物測定、量測定、性味歸經(jīng)、功能主治、用法用量、注意事項、有效期、包裝貯藏。這對于提高飲片質(zhì)量、指導工業(yè)生產(chǎn)、保證臨床用藥的安全有效性具有重要意義。

    3 中藥標準物質(zhì)在飲片質(zhì)量評價中的應用現(xiàn)狀[1]

    2010年版《中國藥典》收載的822種飲片規(guī)格,其中72%需采用蒸、煮、火單、制、炒、煅等技術炮制。所收載的飲片質(zhì)量標準中應用到的中藥對照物質(zhì)共計640種,其中對照藥材有239種,中藥化學對照品有400種,對照提取物有1種。

    3.1 飲片檢查 2010年版《中國藥典》中,除了對飲片的雜質(zhì)、水分、灰分、浸出物等項目進行檢查外,另有9種飲片采用了9種中藥化學對照品對毒性成分、特征性成分等進行檢查,見表1。

    表1 2010年版《中國藥典》飲片檢查項應用的中藥化學對照品

    Table 1 The chemical reference standards using in the ipspect items of herbal pieces in Chinese Pharmacopoeia(2010 edition)

    3.2 飲片鑒別 2010年版《中國藥典》中,飲片鑒別項應用了239種對照藥材,300種中藥化學對照品,1種對照提取物,即薏苡仁油對照提取物。其中,僅采用對照藥材鑒別的飲片有94種,如三棱、大血藤、大薊、山藥、千里光、川木香、麥冬、麥芽、花椒、蒼耳子、重樓、桔梗、狼毒等;僅采用中藥化學對照品鑒別的飲片有152種,如秦艽、秦皮、莪術、桃仁、黨參、遠志、吳茱萸、阿膠、陳皮等;同時采用對照藥材和中藥化學對照品鑒別的飲片有78種,如芫花、蒼術、蘇木、兩面針、沙苑子、獨活、姜黃、穿心蓮、萊菔子、桂枝、柴胡等;采用對照提取物和中藥化學對照品鑒別的有1種,即薏苡仁。

    3.3 飲片含量測定 2010年版《中國藥典》中,飲片含量測定項應用了320種中藥化學對照品。其中,飲片含量測定的成分與藥材不同的有7種,分別為(制)草烏、(熟)地黃、(制)遠志、附子、禹州漏蘆、(制)淫羊藿,具體見表2。飲片含量測定標準低于藥材的有55種,分別為姜炭、山豆根、山茱萸、炒山楂、焦山楂、炒川楝子、馬錢子粉、制遠志、赤芍、炒芥子、何首烏、炒苑子、陳皮、忍冬藤、姜黃、絡石藤、王不留行、木青、烏梅、薏苡仁、青皮、苦杏仁、苦參、知母、佩蘭、金蕎麥、澤瀉、荊芥、茜草、草果仁、梔子、厚樸、甘松、甘草、石菖蒲、龍膽、仙茅、槲寄生、秦皮、莪術、荷葉、桃仁、積雪草、益母草、焦檳榔、地榆炭、朱砂根、延胡索、防己、黃芩、黃精、豬苓、淫羊藿、續(xù)斷、肉豆蔻。飲片含量測定限度高于藥材的有3種,分別為商陸、板藍根、(清)半夏,具體見表3。endprint

    4 中藥飲片質(zhì)量控制存在的問題

    4.1 以對照藥材、對照品控制飲片質(zhì)量,不能全面體現(xiàn)炮制作用 中藥炮制的作用主要體現(xiàn)在解毒、增效、改性3個方面?,F(xiàn)代研究表明,通過炮制技術影響毒性成分是炮制解毒的有效途徑。炮制增效主要與提高有效成分溶出率、改變藥物成分的含量或化學組分的比例以及生成新的有效成分有關。現(xiàn)行的飲片質(zhì)量標準中,以對照藥材、中藥化學對照品控制飲片質(zhì)量,忽略了炮制過程中飲片發(fā)生的變化,不能全面體現(xiàn)炮制的作用,這樣的標準是不合理、不完善的。如生地黃甘、苦、寒,歸心、肝、腎經(jīng),具有清熱涼血、養(yǎng)陰生津的功效,臨床主要用于熱入營血、溫毒發(fā)斑、熱病傷陰、骨蒸勞熱等;經(jīng)酒燉法或蒸制法炮制成為熟地黃后,性味、歸經(jīng)、功效都發(fā)生了不同程度的變化,其性味偏溫,歸肝、腎經(jīng),具有滋陰補血、益精填髓的功效,臨床主要用于血虛萎黃,心悸怔腫,月經(jīng)不調(diào),崩漏下血,肝腎陰虛,盜汗遺精,內(nèi)熱消渴等。2010年版《中國藥典》中,生地黃項下以梓醇和毛蕊花糖苷作為鑒別項和含量測定項的檢測指標,熟地黃項下以毛蕊花糖苷作為鑒別項和含量測定項的檢測指標。藥材與飲片之間、不同炮制品之間的性味歸經(jīng)和功能主治是有區(qū)別的,采用相同的評價指標和檢測方法顯然是不合理的,因此需要深入研究能體現(xiàn)炮制作用與飲片特點的質(zhì)量控制方法。

    表2 2010年版《中國藥典》飲片與藥材含量測定成分的比較

    Table 2 The comparison of components in content determination betwwen herbal pieces and crude drugs in Chinese Pharmacopoeia(2010 edition)

    表3 2010年版《中國藥典》飲片與藥材含量測定限度的比較

    Table 3 The comparison of limitations in content determination between herbal pieces and crude drugs in Chinese Pharmacopoeia(2010 edition)

    中藥化學對照品存在分離難度大、單體不穩(wěn)定、供應價格高、資源浪費、供應數(shù)目有限且所測成分單一等缺點。中藥飲片成分多樣且復雜,以單體化學對照品控制飲片質(zhì)量,所提供的信息遠遠不足,達不到整體質(zhì)量控制的目的,與中醫(yī)藥整體觀的學術思想不相符。2010年版《中國藥典》飲片質(zhì)量控制中應用的化學對照品約400種,占對照物質(zhì)總數(shù)的62.5%。因此,建立更加科學、系統(tǒng)、可操作性強,能客觀真實的反映中藥飲片內(nèi)在質(zhì)量與整體質(zhì)量的評價方法勢在必行。

    4.2 飲片質(zhì)量標準與臨床功效相脫離 中藥炮制是中醫(yī)長期臨床用藥經(jīng)驗的總結,藥材經(jīng)炮制后形成飲片,最終服務于臨床,因此評價飲片質(zhì)量優(yōu)劣的最終指標是臨床療效的好壞。中藥飲片質(zhì)量標準的制定必須緊密結合中醫(yī)臨床用藥。如2010年版《中國藥典》中生大黃的含量測定指標為“按干燥品計算,含蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚和大黃素甲醚的總量不得少于1.5%”,大黃炭質(zhì)量標準無具體要求。臨床中,生大黃以攻里通下為主,主要成分為結合型蒽醌類,大黃炭以止血為主,主要成分為大黃酚和大黃素-6-甲醚。顯然,飲片的質(zhì)量標準與臨床功效相脫離。倘若研究建立與臨床功效相結合的、以相關活性成分為代表的質(zhì)量標準,以此控制飲片質(zhì)量則顯得更加科學、合理。

    4.3 炮制后產(chǎn)生的新組分如何在質(zhì)量標準中體現(xiàn) 中藥飲片的炮制加工過程是藥物的理化性質(zhì)發(fā)生復雜變化的過程。同種藥材,其炮制工藝不同,飲片的理化性質(zhì)就會發(fā)生不同的變化,相應的藥性功效也不相同。因此,照搬藥材的質(zhì)量控制方法和標準是不合理的。陸兔林等[2]采用GC-MS分析炮制對莪術揮發(fā)油成分的影響,結果顯示,莪術經(jīng)醋制后組分變化很大,并產(chǎn)生2個新組分4-異丙基苯甲酸和2-甲基-5-(1-甲基乙烯基)-環(huán)己酮。2010年版《中國藥典》中,僅以揮發(fā)油總量控制莪術與醋莪術的質(zhì)量,未能體現(xiàn)炮制過程中組分變化的情況。中藥經(jīng)過炮制后發(fā)生的變化極其復雜,有些會形成新的物質(zhì),而真正起藥效作用的不一定是原來存在于藥材中的物質(zhì),有可能是炮制后經(jīng)過多途徑變化的新組分。因此,在飲片質(zhì)量標準制定過程中,應深入研究炮制后產(chǎn)生的新組分,尤其應注重具有生物活性作用的新組分的研究,這對于體現(xiàn)炮制過程和飲片特點具有重要意義。

    4.4 動物藥質(zhì)量標準水平較低 動物藥是中醫(yī)藥寶庫中不可缺少的部分,在臨床應用中占有重要地位。臨床應用的動物藥多為炮制后的飲片,成分復雜,雖然近年來在其質(zhì)量控制方面的研究已取得許多成果,但進展相對緩慢,質(zhì)量標準水平仍較低。2010年版《中國藥典》收載的動物藥中有14味無質(zhì)量標準,分別為血余炭、蟲白蠟、雞內(nèi)金、金錢白花蛇、海龍、蛇蛻、鹿角、鹿角霜、紫河車、蜈蚣、蜂房、蜂蠟、蟬蛻、鱉甲。有質(zhì)量標準的動物藥中,僅12味有含量測定項,占總動物藥的26.7%,分別為牛黃、五倍子、冬蟲夏草、牡蠣、龜甲膠、阿膠、豬膽粉、鹿角膠、斑蝥、蜂膠、蜂蜜、麝香。但動物藥成分復雜,僅以某一種或某幾種化合物的含量作為其質(zhì)量評價的指標是不完善、不充分的。

    5 中藥飲片質(zhì)量展望

    5.1 研究制定中藥對照飲片 現(xiàn)行的飲片質(zhì)量標準中,以對照藥材、中藥化學對照品控制飲片質(zhì)量,忽略了炮制過程中飲片發(fā)生的變化,不能體現(xiàn)炮制的作用,因此建議研究制定中藥對照飲片,即按標準炮制工藝生產(chǎn),經(jīng)鑒定、標化合格后,用于鑒別中藥飲片及其制劑的對照物質(zhì)。對照飲片標定項目應符合以下幾點要求:①應是符合對照藥材要求,并按標準炮制工藝生產(chǎn)的樣品;②應是符合GAP及GMP規(guī)范生產(chǎn)的優(yōu)質(zhì)中藥飲片;③飲片應經(jīng)性狀、組織及粉末顯微鑒定,須符合標準規(guī)定;④應對飲片進行雜質(zhì)、水分、灰分、浸出物測定,毒性中藥應檢查毒性成分的含量;⑤薄層測定項應依據(jù)炮制后飲片的成分選擇合適的提取方法和展開條件;⑦含量測定項應選擇炮制后飲片的特征性成分等進行測定。對照飲片專屬性高、穩(wěn)定性強并可大量制備,在飲片質(zhì)量控制過程中積極引入對照飲片,可真實可靠的反映飲片質(zhì)量的優(yōu)劣。endprint

    5.2 研究制定飲片對照提取物 對照提取物相對于中藥化學對照品和對照藥材有專屬性較強、配制操作簡單、價格低廉等特點和優(yōu)勢。對照提取物可以應用于薄層色譜法,彌補對照藥材不能體現(xiàn)飲片炮制前后不同的缺點,還能應用于其他如液相、氣相色譜鑒別。同時,在含量測定中對照提取物可以標示多個單體成分含量,達到“一標多測”的目的。因此,推行以飲片對照提取物為對照的質(zhì)量評價體系,可以完善飲片質(zhì)量標準,解決部分飲片標準缺失和炮制加工后成分改變標準未相應改變等問題。目前,2010年版《中國藥典》收載了16種對照提取物對中藥及其制劑進行質(zhì)量控制,飲片質(zhì)量標準中僅薏苡仁油1種對照提取物。

    5.3 研究制定不同炮制品的有效成分、指標性成分 中藥飲片是一個天然化合物組合庫,成分復雜,有效成分常常是一類化合物,而非單體化合物,應采用專屬性強與療效有直接關系的有效成分進行質(zhì)量評價。炮制加工對成分都有一定破壞,而破壞程度只能用指標成分的含量來衡量[3]。因此對于制定飲片質(zhì)量標準,研究制定不同炮制品的有效成分和(或)指標性成分就顯得很有必要。為此,要加強炮制機制研究,尤其是要加強對毒性飲片的藥理、藥效研究;明確炮制過程中成分含量的變化;針對飲片炮制工藝水平、有效成分和藥效的認知程度、量化指標等研究情況,分別制定不同級別的質(zhì)量標準。例如對于有效成分和藥效基本清楚、量化指標和檢測方法科學的飲片制定專業(yè)級標準。這樣的標準更容易做到成分檢驗有理有據(jù)、清楚明白,結果令人信服。

    5.4 研究建立飲片特征圖譜標準 中藥指紋圖譜是采用指紋圖譜的模式,將中藥的內(nèi)在化學物質(zhì)特性轉(zhuǎn)化為常規(guī)的色譜數(shù)據(jù)信息,通過對中藥樣品特征性的識別,全面、整體、特異性地表征中藥的化學品質(zhì)[4]。目前,在中藥質(zhì)量控制體系中,化學指紋圖譜在中藥的真實性鑒定方面已比較成熟;譜效學、生物指紋圖譜和代謝指紋圖譜由于與藥效活性相關,在中藥的有效性評價中已體現(xiàn)出優(yōu)勢;色譜指紋圖譜在中藥的安全性評價方面的應用也愈來愈受到重視[5]。中藥的物質(zhì)群在炮制過程中會發(fā)生復雜的變化,這種變化包括物質(zhì)數(shù)、物質(zhì)量以及物質(zhì)的組成比例等,采用單一成分的線性質(zhì)量控制模式是不合理的,研究清楚每一種物質(zhì)的變化情況也是不現(xiàn)實的。因此,利用特征圖譜的整體性與模糊性,將其引入中藥飲片的質(zhì)量控制體系中,既體現(xiàn)了中醫(yī)藥整體觀的理論內(nèi)涵,又可以全面、整體、特異地表征飲片的質(zhì)量優(yōu)劣。

    采用標準炮制工藝得到標準飲片,建立標準飲片的指紋圖譜庫,通過對比藥材與炮制品的指紋圖譜,可得到炮制前后發(fā)生變化的成分,通過對比不同批次炮制品的特征圖譜,可對飲片的質(zhì)量優(yōu)劣及穩(wěn)定性進行分析。這對于炮制機制的研究和炮制工藝的評判都具有重要意義。目前,中藥飲片色譜指紋圖譜質(zhì)量控制已取得較多成果,但也存在不少困難,飲片特征圖譜標準的建立還需要更加深入的探索與研究。

    5.5 研究建立“一測多評”及“替代對照品”模式控制飲片質(zhì)量 中藥化學對照品的單一性難以體現(xiàn)中藥飲片多成分、多功效的復雜性,相應提出的多成分質(zhì)量控制和多指標的質(zhì)量評價體系也由于中藥化學對照品生產(chǎn)成本及技術要求高、單體不穩(wěn)定、供應數(shù)量有限和供應價格高等因素,實施時有諸多限制。近年來,王智民等[6]提出“一測多評”法及謝元超等[7]首次提出“替代對照品”法,即以中藥中某一典型組分(有對照品供應者)為內(nèi)標,建立該組分與其他組分(對照品難以得到或難供應)之間的相對校正因子,通過校正因子計算其他組分的含量。這種測定一個成分,實現(xiàn)對多個成分定量的方法,稱為“一測多評”或“替代對照品”。目前,2010年版《中國藥典》一部中,已經(jīng)收載該方法測定黃連中小檗堿、巴馬汀、黃連堿、表小檗堿、藥根堿等5個成分的含量。同時“一測多評”的研究文獻逐漸增多,是中藥質(zhì)量控制和評價模式的發(fā)展趨勢之一。該方法在部分多指標成分的測定中得到了成功的應用,但還需要對其技術適用性和應用可行性進一步完善和探索。

    6 小結

    隨著國家醫(yī)藥衛(wèi)生保障事業(yè)的發(fā)展,藥品標準物質(zhì)的應用越來越廣泛,它是控制藥品質(zhì)量不可缺少的工具,是醫(yī)藥領域的戰(zhàn)略性資源。中醫(yī)藥是中華民族的瑰寶,中藥飲片處于中醫(yī)藥的核心地位,其質(zhì)量的重要性不可小覷。在中藥飲片質(zhì)量控制水平不斷提高的進程中,我們應充分合理的利用中藥資源,采用各種先進的技術手段來研究中藥飲片特征性標準物質(zhì),在飲片質(zhì)量控制體系中引入更多、更合理的標準物質(zhì)。研究建立科學、先進、實用的質(zhì)量標準體系,保障中藥飲片的安全性、有效性、質(zhì)量可控性,對于提高臨床療效、促進飲片產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展、促進中藥現(xiàn)代化與國際化具有重要意義。

    [參考文獻]

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    [5] 周建良,齊煉文,李萍. 色譜指紋圖譜在中藥質(zhì)量控制中的應用[J]. 色譜,2008,26(2):153.

    [6] 王智民,高慧敏,付雪濤,等. “一測多評”法中藥質(zhì)量評價模式方法學研究[J]. 中國中藥雜志,2006,31(23):1925.

    [7] 謝元超,張啟明,金少鴻. 替代對照品法用于石杉堿甲片含量測定的研究[J]. 中國藥學雜志,2008,43(3):217.

    Application of traditional Chinese medicine reference standards inendprint

    quality control of Chinese herbal pieces

    LU Tu-lin1*, LI Jin-ci1, YU Jiang-yong2, CAI Bao-chang1, MAO Chun-qin1, YIN Fang-zhou1

    (1. Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210046, China;

    2. Chinese Pharmacopoeia Commission, Beijing 100061, China)

    [Abstract] Traditional Chinese medicine (TCM) reference standards plays an important role in the quality control of Chinese herbal pieces. This paper overviewed the development of TCM reference standards. By analyzing the 2010 edition of Chinese pharmacopoeia, the application of TCM reference standards in the quality control of Chinese herbal pieces was summarized, and the problems exiting in the system were put forward. In the process of improving the quality control level of Chinese herbal pieces, various kinds of advanced methods and technology should be used to research the characteristic reference standards of Chinese herbal pieces, more and more reasonable reference standards should be introduced in the quality control system of Chinese herbal pieces. This article discussed the solutions in the aspect of TCM reference standards, and future development of quality control on Chinese herbal pieces is prospected.

    [Key words] reference standards; Chinese herbal pieces; quality control

    doi:10.4268/cjcmm20140128

    [責任編輯 馬超一]endprint

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