陰道分泌物常規(guī)鏡檢與五聯(lián)檢法聯(lián)合應(yīng)用的分析評價(jià)

溫立娟

(肥城礦業(yè)中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，山東肥城271608)

陰道分泌物常規(guī)鏡檢與五聯(lián)檢法聯(lián)合應(yīng)用的分析評價(jià)

溫立娟

(肥城礦業(yè)中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，山東肥城271608)

目的探討陰道分泌物常規(guī)鏡檢與五聯(lián)檢聯(lián)合應(yīng)用價(jià)值及結(jié)果不符原因分析。方法收集婦科門診982份陰道分泌物標(biāo)本，同時(shí)采用常規(guī)鏡檢與五聯(lián)檢進(jìn)行乳酸桿菌、白細(xì)胞、BV、念珠菌、滴蟲檢測，并進(jìn)行結(jié)果比較。結(jié)果五聯(lián)檢乳酸桿菌、白細(xì)胞、BV、念珠菌、滴蟲的陽性檢出率分別為：14.5%、38.7%、21.2%、16.6%、10.1%；常規(guī)鏡檢乳酸桿菌、白細(xì)胞、BV、念珠菌、滴蟲的陽性檢出率分別為：17.0%、37.4%、14.2%、18.3%、8.4%；兩種方法陽性率比較，乳酸桿菌、BV、滴蟲檢測差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；五聯(lián)檢與兩種方法聯(lián)合應(yīng)用陽性檢出率比較χ2=118，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論為了彌補(bǔ)常規(guī)鏡檢與五聯(lián)檢各自的缺點(diǎn)，應(yīng)將兩種方法聯(lián)合應(yīng)用，提高檢出率，防止漏檢。

陰道分泌物；乳酸桿菌；白細(xì)胞；BV；念珠菌；滴蟲

陰道分泌物為女性生殖系統(tǒng)分泌的液體，主要由陰道黏膜滲出液、宮頸腺體及子宮內(nèi)膜分泌混合而成，又稱白帶。陰道疾病是婦女的常見病、多發(fā)病[1]。檢查陰道分泌物國內(nèi)大多實(shí)驗(yàn)室用簡單快速的常規(guī)顯微鏡法，但報(bào)告的準(zhǔn)確性受限于檢測人員的工作經(jīng)驗(yàn)和技術(shù)水平影響，主觀性強(qiáng)，漏診率高；近年來，國內(nèi)外不少作者，研究報(bào)道用酶學(xué)[2]的方法檢測陰道分泌物，通過檢測過氧化氫、白細(xì)胞酯酶、唾液酸苷酶、脯氨酸氨基肽酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶及pH值互補(bǔ)甚至替代常規(guī)鏡檢的乳酸桿菌、清潔度(白細(xì)胞)、線索細(xì)胞，念珠菌、滴蟲的檢測，但經(jīng)過多年的臨床實(shí)踐結(jié)果表明五聯(lián)檢法也存在假陽性、假陰性問題，因此，本文對兩種方法的檢測結(jié)果進(jìn)行比較，將不符結(jié)果分析討論，并進(jìn)一步探討兩種方法聯(lián)合應(yīng)用的價(jià)值，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源2013年12月6日至2014年4月12日來我院婦科門診就診的患者982例，年齡17～63歲，由婦科門診醫(yī)生用無菌棉拭子采取陰道后穹窿分泌物，采取后立即送檢。

1.2 試劑五聯(lián)試劑盒由鄭州安圖綠科公司生產(chǎn)。

1.3 檢測方法取同一份陰道分泌物標(biāo)本，分別用顯微鏡法和五聯(lián)檢試劑盒檢測，五聯(lián)檢法嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作，檢測pH值、過氧化氫酶、白細(xì)胞酯酶、唾液酸苷酶、脯氨酸氨肽酶以及N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶。鏡檢法直接將陰道分泌物涂濕片在顯微鏡下觀察白細(xì)胞、滴蟲、念珠菌，然后將片子進(jìn)行革蘭染色觀察乳酸桿菌、線索細(xì)胞。

1.4 結(jié)果判斷顯微鏡鏡檢：乳酸桿菌≥6個(gè)/HPF革蘭陽性長桿菌為陽性(+)、＜6個(gè)/HPF為陰性(-)；BV以每視野線索細(xì)胞≥20%為陽性(+)，線索細(xì)胞＜20%為陰性，并進(jìn)行Nugent評分，確認(rèn)細(xì)菌性陰道炎[3];顯微鏡鏡檢念珠菌，以高倍鏡下看到念珠菌屬孢子和菌絲為陽性(+)，未看到為陰性(-)濕片鏡檢：白細(xì)胞每視野≥15個(gè)/HP為陽性(+)，＜15個(gè)/為陰性(-)；滴蟲看到為陽性(+)，未見到為陰性(-)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析率的比較采用卡方檢驗(yàn),P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩種方法檢出率比較五聯(lián)檢乳酸桿菌、白細(xì)胞、BV、念珠菌、滴蟲的陽性檢出率分別為：14.5%、38.7%、21.2%、16.6%、10.1%；常規(guī)鏡檢乳酸桿菌、白細(xì)胞、BV、念珠菌、滴蟲的陽性檢出率分別為：17.0%、37.4%、14.2%、18.3%、8.4%；兩種方法陽性率比較，在乳酸桿菌、BV、滴蟲檢測中，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，在白細(xì)胞、念珠菌檢測中，兩種方法比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＞0.05，見表1。

表1 兩種方法檢出率比較[n(%)]

2.2 五聯(lián)檢與兩種方法聯(lián)合檢測結(jié)果對比五聯(lián)檢檢出陽性標(biāo)本共531例(重復(fù)陽性不計(jì))陽性率為54.1%(531/982)，兩種方法聯(lián)用檢出陽性標(biāo)本667例(重復(fù)陽性不計(jì))陽性率為67.9%(667/982)，兩種方法相比，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，(χ2=118，P＜0.05),陽性符合率76.9%(521/677)，陰性符合率66.1%(305/ 461)總符合率84.1%(826/982)，見表2。

3 討論

982例陰道分泌物經(jīng)兩種方法顯示：在白細(xì)胞、BV、滴蟲檢測中五聯(lián)檢陽性檢出率高于常規(guī)鏡檢法，乳酸桿菌、念珠菌的檢測五聯(lián)檢陽性率低于常規(guī)鏡檢。

表2 五聯(lián)檢與兩種方法聯(lián)用對比

乳酸桿菌屬是婦女陰道內(nèi)正常菌群的優(yōu)勢菌，對陰道微生態(tài)平衡起到重要的調(diào)節(jié)作用，常見的種屬有卷曲乳桿菌，詹氏乳桿菌和格氏乳桿菌等。95%的乳酸桿菌能產(chǎn)生過氧化氫，陰道中產(chǎn)高水平過氧化氫乳酸桿菌的存在能減少子宮上行性感染的發(fā)生率。五聯(lián)檢用酶學(xué)的方法檢測陰道分泌物，用過氧化氫來表示分泌物中乳酸桿菌的多少，陰性說明乳酸桿菌多，陽性則提示陰道環(huán)境處于病理或亞健康狀態(tài)，本研究中乳酸桿菌的檢出率低于常規(guī)鏡檢染色，差異有顯著性(P＜0.05)，其中有6例鏡檢染色見到乳酸桿菌而五聯(lián)檢提示不產(chǎn)生過氧化氫，無乳酸桿菌存在，這與部分乳酸桿菌不產(chǎn)生過氧化氫有關(guān)[4]，2例鏡檢未見到乳酸桿菌而五聯(lián)檢檢測出過氧化氫，檢測卡第1孔變紅標(biāo)記為陰性，提示含有大量乳酸桿菌存在，同時(shí)唾液酸苷酶孔和乙酰氨基葡萄糖苷酶孔變色，這時(shí)可以結(jié)合鏡檢情況排除過氧化氫孔假陰性問題。

本研究中五聯(lián)檢檢出BV的檢出率高于常規(guī)鏡檢，兩種方法差異有顯著性(P＜0.05)。五聯(lián)檢法是通過唾液酸苷酶活性和脯氨酸酶活性來檢測BV，其影響因素較多，其中血性物質(zhì)在脯氨基肽酶作用下產(chǎn)生胺類物質(zhì)而使結(jié)果出現(xiàn)假陽性，從而使血性標(biāo)本的BV檢出率假性增高[5]影響檢出率。線索細(xì)胞是診斷細(xì)菌性陰道病的重要指標(biāo)[6]，鏡檢線索細(xì)胞血性標(biāo)本是不受影響的，所以血性標(biāo)本應(yīng)做鏡檢。

白細(xì)胞酯酶為多形核白細(xì)胞釋放的酯酶，在正常情況下難以檢測，當(dāng)人體發(fā)生炎癥反應(yīng)時(shí)，多形核白細(xì)胞的趨化性在炎癥病灶聚集而大量釋放酯酶，只有在炎癥情況下(WBC：104/ml)，炎癥白細(xì)胞才有可能檢測到，有研究報(bào)道，婦女子宮頸和陰道黏膜發(fā)生炎癥反應(yīng)時(shí)，白細(xì)胞酯酶活性會(huì)升高，而且其顏色深度與活性成正相關(guān)[7]。在鏡下看到大量的白細(xì)胞為感染的初期，待中性粒細(xì)胞吞噬了足量的病菌后LE測試塊才顯示陽性，一般為感染的中后期此時(shí)鏡下的白細(xì)胞較少，易漏檢，因此LE生化檢測與鏡檢相比有一定優(yōu)勢，鏡檢無法反映炎癥各期變化，五聯(lián)檢陽性率高于濕片鏡檢，但無顯著差別，其中有17例標(biāo)本五聯(lián)檢陽性，而濕片陰性，是多形核細(xì)胞破壞、崩解鏡檢不能檢測所致，因此為了避免此現(xiàn)象兩種方法聯(lián)合檢測達(dá)到不漏檢的目的。

念珠菌和滴蟲判別是通過乙酰氨基葡萄糖苷酶結(jié)合pH來判斷的，該指標(biāo)的陽性率略低于鏡檢法主要有以下原因：11例標(biāo)本為帶血標(biāo)本，五聯(lián)檢以試紙顏色的變化來判斷陰陽性，帶血標(biāo)本影響結(jié)果判斷；6例鏡檢發(fā)現(xiàn)念珠菌而五聯(lián)檢為陰性，主要因?yàn)橛行┓N類念珠菌不具有酶活性[8]，利用特異性酶檢測念珠菌，存在部分種類念珠菌漏檢現(xiàn)象[9]，結(jié)合以上原因該指標(biāo)在鏡檢與五聯(lián)檢兩者結(jié)合互補(bǔ)情況下才能更好指導(dǎo)臨床。

滴蟲需在25～42℃的液體活動(dòng),顯微鏡濕片法易受標(biāo)本取樣后保存時(shí)間和溫度的影響，檢出率與季節(jié)有關(guān)[10]，而五聯(lián)檢法不受分泌物標(biāo)本溫度和離體時(shí)間的影響，可以彌補(bǔ)鏡檢在溫度低和時(shí)間長時(shí)檢出率下降的缺點(diǎn)。

經(jīng)以上分析可知，兩種方法各有利弊，單一的常規(guī)鏡檢或五聯(lián)檢法不能反映陰道病的真實(shí)感染情況，因此進(jìn)一步研究將兩種方法聯(lián)合進(jìn)行檢驗(yàn)與五聯(lián)檢對比，五聯(lián)檢法陽性檢出率為54.1%，兩種方法聯(lián)合應(yīng)用陽性檢出率為67.9%，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=118,P＜0.05)，綜上所述，常規(guī)鏡檢對人員經(jīng)驗(yàn)要求高，從形態(tài)學(xué)上鑒別存在主觀性強(qiáng)等缺點(diǎn)，五聯(lián)檢客觀、科學(xué)、快速存在一定假陽性、假陰性，對標(biāo)本要求高，不能混入血液、精子等，兩者同時(shí)檢測具有一定互補(bǔ)性，可提高陽性檢出率，避免漏檢。

[1]Rauh VA，Culhane JF，Hogan VK.Bacterial vaginosis:a public health problem for women[J].J Am Med Women Assoc,2000,55(4): 220-224.

[2]范愛萍.細(xì)菌性陰道病發(fā)病機(jī)制及診治進(jìn)展[J].國際婦產(chǎn)科學(xué)雜志,2009,36(3):221-224.

[3]Nugent RP，Krohn MA,Hillier SL.Reliability of diagnosing bacterial vaginosis is improved by a standardized method of gram stain interpretation[J].J Clin Microbiol,1991,29(2):297-301.

[4]章靜.陰道分泌物常規(guī)檢測與五聯(lián)檢試劑檢測的對比分析[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2012,6(30):308-309.

[5]SchoonmakerJN,LuntBD,LawellinDW,etal.Anewproline aminopeptidase assay for diagnosis of bacterial vaginosis[J].Am J Obstet Gynecol,1991,165(3):737-742.

[6]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].第3版，南京:東南大學(xué)出版社,2006:324.

[7]張國慶,常利明.陰道分泌物清潔度與線索細(xì)胞霉菌滴蟲的相關(guān)分析[J].中國社區(qū)醫(yī)師(醫(yī)學(xué)專業(yè)),2011,13(8):198-199.

[8]劉永生.白帶常規(guī)和陰道炎五聯(lián)檢法對陰道分泌物的對比分析[J].國際婦產(chǎn)科學(xué)雜志,2010,10(37):373-374.

[9]吳國友,洪曉平,馬小紅,等.陰道五聯(lián)檢對婦科病篩查的臨床應(yīng)用研究[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2011,21(4)952-954.

[10]陳靜波,李小玲,崔清潭.5407例陰道分泌物常規(guī)檢查結(jié)果分析[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2012,30(4):403-404.

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10.3969/j.issn.1674-1129.2014.05.047

2014-06-23；

2014-07-14)