犬瘟熱病毒截短P蛋白單克隆抗體的制備與鑒定

/袁維峰（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所，北京100193），賈紅，于萍萍…//中國畜牧獸醫(yī).-2013，40（4）.-22～25

為制備針對犬瘟熱病毒（canine distemper virus，CDV）P1蛋白的單克隆抗體（McAb），本研究利用重組犬瘟熱病毒P1蛋白免疫BALB/c小鼠，并將其脾淋巴細(xì)胞與SP2/0進(jìn)行融合，用CDV包被ELISA板，通過間接ELISA法篩選出兩株穩(wěn)定分泌抗CDV-P1的雜交瘤細(xì)胞株（E9E4C10、E9F8D9）。間接ELISA檢測腹水效價(jià)均為1∶106，亞類鑒定結(jié)果均為IgG2b。Western blotting和間接免疫熒光（IFA）分析結(jié)果表明，兩株單克隆抗體均能與重組P1蛋白和CDV發(fā)生反應(yīng)；ELISA疊加試驗(yàn)增殖結(jié)果表明，兩株單克隆抗體識(shí)別的抗原表位不同。本研究制備的特異性抗CDV-P1的單克隆抗體為建立CDV免疫學(xué)檢測方法和P蛋白的功能研究奠定了基礎(chǔ)。