大腸桿菌的藥敏試驗

王 建 沃妮娜 邱 江

（1.常州市武進區(qū)動物疫病預防控制中心，江蘇常州 213021；

2.常州出入境檢驗檢疫局，江蘇常州 213002；

3.揚州市邗江區(qū)公道鎮(zhèn)農業(yè)推廣服務中心，江蘇揚州 225000）

大腸桿菌的藥敏試驗

王 建1沃妮娜2邱 江3*

（1.常州市武進區(qū)動物疫病預防控制中心，江蘇常州 213021；

2.常州出入境檢驗檢疫局，江蘇常州 213002；

3.揚州市邗江區(qū)公道鎮(zhèn)農業(yè)推廣服務中心，江蘇揚州 225000）

2012年10月11日，常州市武進區(qū)某養(yǎng)豬戶帶病死豬來獸醫(yī)站就診，據畜主介紹，家里飼養(yǎng)的3月齡左右的豬有27頭，體重30～45 kg，20 d前曾給該豬群免疫過豬瘟疫苗，10月9日突然發(fā)病。病豬精神沉郁，食欲廢絕，體溫38.5℃～39.5℃，眼瞼水腫下垂，下頜以及頸部水腫，眼結膜充血，步態(tài)不穩(wěn)，不久出現(xiàn)共濟失調，盲目行走或轉圈，叫聲嘶啞，心跳疾速，呼吸快而淺，后期倒地不起。到目前為止，發(fā)病豬已有4頭，剛死亡2頭，且為豬群中體格較大者。在就診之前，畜主已經給發(fā)病豬使用過土霉素、血蟲靈等藥物，但均未見效。養(yǎng)豬戶帶1頭剛病死的仔豬求診。筆者等對病原進行分離、鑒定，并對分離出的細菌進行藥物敏感試驗，篩選敏感的抗菌素，指導臨床用藥。

1 材料與方法

1.1 材料

生化發(fā)酵管；藥敏紙片（購自杭州天和微生物試劑有限公司）；恒溫生化培養(yǎng)箱（南京儀器廠生產）；高壓滅菌鍋（上海三申儀器有限公司生產）；普通光學顯微鏡（Leica公司生產）；牛肉浸膏、蛋白胨、瓊脂粉、氯化鈉、麥康凱培養(yǎng)基粉（購自上?；瘜W試劑廠）；5%無菌兔抗凝鮮血、接種環(huán)、接種針、酒精燈、剪刀、鑷子等。

1.2 方法

從麥康凱培養(yǎng)基上挑取分離培養(yǎng)的純菌落，在普通瓊脂表面劃線，所劃線緊靠一起，并不斷調整劃線方向，使普通瓊脂培養(yǎng)基表面細菌分布均勻，且連成一片，再將鑷子在酒精燈火焰上灼燒，冷卻后，夾取藥敏紙片，緊密貼附于培養(yǎng)基的表面，37 ℃培養(yǎng)箱中倒扣培養(yǎng)，18 h后觀察培養(yǎng)基上細菌生長情況，并用直尺測量抑菌圈直徑。

2 實驗結果

筆者等對菌株進行了分離。將分離的細菌劃布普通瓊脂培養(yǎng)板，分別用含呋喃妥因（呋）、菌必治（菌）、羅紅霉素（羅）、林可霉素（林）、四環(huán)素（四）、利福平（利）、妥布霉素（妥）、環(huán)丙沙星（環(huán)）、先鋒噻肟（肟）、鏈霉素（鏈）和復方新諾明（復）的藥敏紙片進行藥敏試驗，試驗數(shù)據統(tǒng)計見附表。

附表 藥敏試驗結果統(tǒng)計

根據細菌分離培養(yǎng)、鏡檢結果、在麥康凱鑒別培養(yǎng)基上的生長狀況并結合生化試驗結果可判定，筆者等從患水腫病的病死豬體內實質器官中成功分離出致病性大腸桿菌；且對該株大腸桿菌進行的藥敏試驗結果表明，菌必治和先鋒噻肟能有效抑制細菌生長，可作為該病例的預防和治療性藥物。

3 討論

大腸桿菌容易形成抗藥性，而且大腸桿菌可通過菌毛將其抗藥性質粒傳遞給其他大腸桿菌，所以，大腸桿菌的抗藥性形成較快，環(huán)境中大腸桿菌耐藥性菌株越來越多，因此，在用抗菌藥物對大腸桿菌造成的疾病的治療過程中，往往先進行藥敏試驗，篩選高度敏感的抗菌藥物來指導臨床用藥，從而提高臨床治療效果。從藥敏試驗結果可以看出，經典的抗革蘭氏陰性菌藥物如鏈霉素等，對本株大腸桿菌的生長抑制效果很差，但菌必治和先鋒噻肟對其生長抑制效果很好，此2種藥物可作為該養(yǎng)殖場防治大腸桿菌病的首選藥物。

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