豬早期胚胎發(fā)育調(diào)控相關(guān)的因子

陳預(yù)明 陳志林 衛(wèi)恒習(xí) 李 莉 張守全

（1華南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，廣東廣州 510642；2廣東廣三保養(yǎng)豬有限公司，廣東廣州 510630）

豬早期胚胎發(fā)育調(diào)控相關(guān)的因子

陳預(yù)明1,2陳志林1衛(wèi)恒習(xí)1李 莉1張守全1

（1華南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，廣東廣州 510642；2廣東廣三保養(yǎng)豬有限公司，廣東廣州 510630）

早期胚胎發(fā)育指的是著床前階段胚胎所經(jīng)歷的生長(zhǎng)和分化過(guò)程。豬早期胚胎發(fā)育過(guò)程是由多種作用因子共同調(diào)節(jié)著床前胚胎的生長(zhǎng)和分化，從而保證胚胎的正常發(fā)育。在此過(guò)程中，相關(guān)因子的調(diào)控起著關(guān)鍵性的作用，不僅可以促進(jìn)胚胎正常的著床，也能夠誘導(dǎo)功能異常的胚胎凋亡，降低子代的畸形率。本文主要對(duì)幾類(lèi)與調(diào)控相關(guān)的因子作簡(jiǎn)要概述，以說(shuō)明其在豬早期胚胎發(fā)育過(guò)程中所發(fā)揮的功能性作用，同時(shí)也為相關(guān)學(xué)者提供簡(jiǎn)單的參考。

豬；早期胚胎；發(fā)育；調(diào)控因子

豬早期胚胎的發(fā)育是指著床前階段胚胎所經(jīng)歷的生長(zhǎng)和分化過(guò)程，時(shí)間約為12天。研究表明在早期胚胎發(fā)育過(guò)程中可以檢測(cè)到許多與胚胎生長(zhǎng)發(fā)育相關(guān)的基因或蛋白調(diào)控因子。這些因子不僅可以促進(jìn)胚胎正常的著床和發(fā)育，也能夠誘導(dǎo)異常胚胎的凋亡[1]。此外，弄清其基因的表達(dá)調(diào)控，對(duì)于研發(fā)適合豬胚胎干細(xì)胞維持其多能性的培養(yǎng)基顯得猶為重要。近年來(lái)，隨著早期胚胎作為細(xì)胞形態(tài)發(fā)生和分化模型的重要性日益增加，越來(lái)越多的作用因子被發(fā)現(xiàn)與早期胚胎發(fā)育相關(guān)。因此，本文對(duì)豬早期胚胎發(fā)育過(guò)程中主要的幾類(lèi)因子表達(dá)簡(jiǎn)要概述，以說(shuō)明這些因子所發(fā)揮的重要作用。

1 原癌基因

豬原癌基因是一種酪氨酸激酶受體，為單拷貝基因，全長(zhǎng)大約200 kb，由21個(gè)外顯子組成，整個(gè)編碼序列長(zhǎng)2 919 bp[2]。SakuraiMt等采用熒光原位雜交技術(shù)證實(shí)了原癌基因位于8號(hào)染色體短臂1.2區(qū)（8p l2），同時(shí)也發(fā)現(xiàn)原癌基因是一個(gè)可以控制毛色的基因[3]。此外，其對(duì)豬的造血和繁殖效應(yīng)也有一定影響。

1.1原癌基因?qū)ωi毛色的影響

豬毛色的顯性白表型往往是原癌基因的基因突變?cè)斐傻腫2]。原癌基因基因內(nèi)含子17的第1個(gè)核苷酸處發(fā)生G→A剪接突變，導(dǎo)致皮膚和毛囊不能生成黑色素細(xì)胞而產(chǎn)生白色[4]。SakuraiMt等研究指出豬的顯性白毛色主要由原癌基因基因（I位點(diǎn)）調(diào)控[3]，但師科榮等的研究發(fā)現(xiàn)白毛產(chǎn)生的現(xiàn)象并不是全部由原癌基因基因內(nèi)含子17中G→A的突變和內(nèi)含子18中的AGTT缺失所導(dǎo)致，同時(shí)也存在其他區(qū)域且未被發(fā)現(xiàn)的決定性SNP（Sing le Nuc leotide Polymorphisms，即在基因組上單個(gè)核苷酸的變異）[2]。然而這種SNP很可能是導(dǎo)致榮昌豬白毛色形成的主要原因。隨后白小青和Lai等的研究結(jié)果也分別證實(shí)了榮昌豬白毛色并不是由于原癌基因基因內(nèi)含子17和18這兩個(gè)位點(diǎn)突變引起[5-6]。

1.2原癌基因?qū)ωi造血效應(yīng)的影響

原癌基因造血干細(xì)胞因子受體為酪氨酸蛋白激酶受體，其產(chǎn)物廣泛存在于造血干細(xì)胞表面，特別是早期胚胎的造血干細(xì)胞表面，扮演著傳遞生物信號(hào)的重要角色。一旦與配體SCF（stem cell fac tor）結(jié)合后，可激活多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，使其他造血生長(zhǎng)因子對(duì)造血細(xì)胞的作用得以增加，并對(duì)造血細(xì)胞的凋亡、增生、分化和轉(zhuǎn)移進(jìn)行調(diào)控[7]，但潛在機(jī)制仍不清楚。原癌基因的突變將會(huì)導(dǎo)致貧血病，外周血液中的紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血紅蛋白和血小板等生化指標(biāo)均比正常值低。如果SCF/原癌基因異常則會(huì)引起造血微環(huán)境紊亂，原癌基因的無(wú)義突變可導(dǎo)致其功能完全喪失，大大減少紅細(xì)胞的生成量。畜牧業(yè)生產(chǎn)中白毛豬新生仔豬患貧血的比例要比有色豬高，繼而引起以下一系列問(wèn)題：母豬貧血?jiǎng)t易不孕、產(chǎn)仔數(shù)減少和仔豬發(fā)育遲緩；初生仔豬貧血?jiǎng)t精神不振、活力減弱甚至吮乳力不足，消瘦、皮膚和黏膜蒼白、下痢；生長(zhǎng)肥育豬貧血可致其生長(zhǎng)發(fā)育滯后，生產(chǎn)性能降低。仔豬貧血發(fā)病率超過(guò)30%，由此導(dǎo)致的死亡率超過(guò)15%，導(dǎo)致生豬生產(chǎn)遭受巨大的經(jīng)濟(jì)損失[8]。

1.3原癌基因?qū)ωi繁殖效應(yīng)的影響

原癌基因參與動(dòng)物生殖細(xì)胞的形成、發(fā)育和存活過(guò)程的調(diào)控，對(duì)繁殖起著必不可少的作用。原癌基因突變的豬在純合狀態(tài)下是完成可育的、不致死的[4]，這對(duì)養(yǎng)殖生產(chǎn)的影響極大。原癌基因在原始生殖細(xì)胞、A型精原細(xì)胞、精子細(xì)胞的頂體及其顆粒均有表達(dá)，有利于減數(shù)分裂的完成[9]。研究表明原癌基因突變后睪丸中分化的精原細(xì)胞明顯減少，并在精子發(fā)生過(guò)程中發(fā)揮決定作用[10]。由于編碼SCF/原癌基因位點(diǎn)的突變，因此將直接影響生精細(xì)胞的發(fā)育。此外原癌基因在卵母細(xì)胞和內(nèi)膜細(xì)胞內(nèi)也有表達(dá)，其受體在卵泡發(fā)育過(guò)程中的原始卵母細(xì)胞和生長(zhǎng)卵母細(xì)胞及卵泡膜間質(zhì)細(xì)胞中表達(dá)。攜帶原癌基因突變基因純合子的雌性動(dòng)物大多數(shù)表現(xiàn)為不育。Fesus等發(fā)現(xiàn)I/I型的公豬睪丸比其他型的公豬睪丸要大，I/I型母豬卵巢的各項(xiàng)參數(shù)值均是所有原癌基因型豬中最小的，但其退化和萎縮的卵泡數(shù)量是最多的[4]。

2 白血病抑制因子

白血病抑制因子（Leukaem ia Inhibitor Fac tor,LIF）為白介素6（IL-6）家族中的一員，是典型的多功能生長(zhǎng)因子，對(duì)于細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖與分化有著廣泛的作用，同時(shí)與胚胎發(fā)育、神經(jīng)發(fā)育和造血系統(tǒng)的發(fā)育有密切聯(lián)系[11]。LIF是目前研究最多、應(yīng)用最廣的一種胚胎干細(xì)胞（ES）分化抑制因子，主要應(yīng)用于胚胎干細(xì)胞的體外培養(yǎng)和研究。豬的LIF基因長(zhǎng)約6.3 kb，有5個(gè)外顯子，其染色體位置為14q2.1-q2.2。目前已發(fā)現(xiàn)兩個(gè)單核苷酸多態(tài)點(diǎn)（SNP），其中一個(gè)位于外顯子1，另一個(gè)位于外顯子3的UTR區(qū)[12]。豬LIF基因在胚胎附植前的子宮內(nèi)膜表達(dá)，而胚胎表達(dá)LIF的受體[13]。Hall等研究表明豬LIF因子可與ES細(xì)胞表面的LIFR/gp130受體結(jié)合[14]。隨后Wianny等則證實(shí)了LIF因子與LIFR/gp130結(jié)合后可以激活JAK-STAT3通路[15]。

一般而言，母豬的胚胎損失率約為40%，而附植前胚胎死亡率約為20%[16]，是產(chǎn)前損失最嚴(yán)重的階段[17]。Spotter等利用德國(guó)大白和杜洛克合成系母豬進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)在第一胎母豬中LIF基因AB型母豬（外顯子3 SNP，下同）的產(chǎn)仔數(shù)顯著低于AA或BB型母豬[18]，呈負(fù)顯性效應(yīng)（P＜0.05）；同時(shí)也發(fā)現(xiàn)在德國(guó)長(zhǎng)白第一胎母豬中AB型母豬產(chǎn)活仔數(shù)顯著高于其他基因型的母豬，突變純合子產(chǎn)活仔數(shù)最低[19]，然而在大白母豬的差異不顯著。但Lin等發(fā)現(xiàn)在我國(guó)廣東某豬場(chǎng)中大白母豬的BB型產(chǎn)活仔數(shù)顯著高于AB型[20]。另外張豪等在2011年也發(fā)現(xiàn)我國(guó)溫氏豬場(chǎng)長(zhǎng)白母豬AA和AB基因型母豬產(chǎn)仔數(shù)接近，均顯著或極顯著高于BB基因型，且第一胎A等位基因的效應(yīng)高于其他胎次[21]。雖然目前研究的結(jié)果不盡相同，但主要原因很可能是由于所研究的SNP與性狀處于不同的連鎖相，而我們可以肯定的是LIF基因可作為影響豬產(chǎn)仔數(shù)的候選基因。

3 胰島素生長(zhǎng)因子

胰島素生長(zhǎng)因子（insulin-like g row th factor,IGF）是多肽生長(zhǎng)因子，IGF-I、IGF-II及各自受體和結(jié)合蛋白（IGFBP1-7）構(gòu)成IGF系統(tǒng)。IGF-I和IGF-II分別由70和67個(gè)氨基酸組成，在豬的卵巢、子宮、輸卵管和早期胚胎中均有表達(dá)。通過(guò)內(nèi)分泌、旁分泌或自分泌，IGF與靶細(xì)胞表面的特異受體結(jié)合起到調(diào)節(jié)相應(yīng)組織生長(zhǎng)發(fā)育的作用。與此同時(shí)也可以影響母豬的卵巢功能、子宮發(fā)育、促進(jìn)卵母細(xì)胞和囊胚發(fā)育、參與胚胎雌激素的生成、調(diào)節(jié)子宮中的基因表達(dá)和影響胚胎的著床[22]。

豬妊娠前期即胚胎早期，IGF-I能夠刺激卵巢細(xì)胞產(chǎn)生孕烯醇酮和孕酮，能與FSH協(xié)同作用，促進(jìn)孕酮生成。豬胚胎快速延長(zhǎng)期的子宮腔液中存在IGF-I、IGF-II，能夠控制子宮細(xì)胞的增殖和分化，重塑子宮內(nèi)環(huán)境，做好囊胚附植的準(zhǔn)備。Geisert等研究表明，母豬妊娠10天左右子宮液中主要的結(jié)合蛋白是IGFBP-2和IGFBP-3，隨著組織激肽釋放酶活性的增加，在激活細(xì)胞間質(zhì)中金屬蛋白酶作用下分解IGFBP-2和IGFBP-3，使子宮釋放IGF-I和IGF-II到子宮腔中促進(jìn)胚胎發(fā)育[23]。同時(shí)Green等也發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜IGF-I通過(guò)參與調(diào)節(jié)胚胎細(xì)胞色素P450芳香酶mRNA的表達(dá)量來(lái)調(diào)節(jié)雌激素的生成，從而維持胚胎的生長(zhǎng)發(fā)育[24]。另外Sallaberry等研究結(jié)果顯示IGF-I對(duì)SSAT的短期調(diào)節(jié)可使IGF-I與胚胎細(xì)胞因子參與妊娠早期母豬子宮內(nèi)膜與孕體發(fā)育的調(diào)節(jié)，從而影響附植胚胎的發(fā)育[25]。

4 轉(zhuǎn)錄因子

豬早期胚胎中，有三種轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)，分別是Oct4、Sox2和Nanog。這三種因子共同作用于早期胚胎，但時(shí)間上和組織上的表達(dá)與人和小鼠有明顯差異[26]。其中Oct4是由POU5F1基因編碼產(chǎn)生，是含POU結(jié)構(gòu)域的轉(zhuǎn)錄因子家族中的一員，是最早發(fā)現(xiàn)的多能性基因。Sox2基因是繼Oc t4之后發(fā)現(xiàn)的重要多能性基因，其通過(guò)結(jié)合DNA上保守序列來(lái)調(diào)控基因表達(dá)，表達(dá)于內(nèi)細(xì)胞團(tuán)、上胚層、生殖細(xì)胞和胚外外胚層中。隨著組織分化的進(jìn)行，Sox2表達(dá)逐漸減弱。另外Nanog是維持表皮干細(xì)胞（ep idermalstem cells,ESCs）全能性的又一重要轉(zhuǎn)錄因子，表達(dá)于小鼠胚胎發(fā)育早期致密型桑椹胚的內(nèi)部以及囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，Nanog在分化細(xì)胞中呈現(xiàn)低表達(dá)或不表達(dá)狀態(tài)。研究表明敲除Oct4的小鼠胚胎在著床前期出現(xiàn)異常[27]；敲除Sox2基因的小鼠胚胎能著床，但隨后會(huì)發(fā)生死亡。Sox2因子缺失的胚胎，上胚層嚴(yán)重丟失，且胚外的組織結(jié)構(gòu)紊亂[28]；敲除Nanog基因的小鼠胚胎在著床后很快死亡。

2009年，Hall等[14]研究發(fā)現(xiàn)豬胚胎形成5～6天后，無(wú)論囊胚還是內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均缺少Nanog和Sox2的表達(dá)，然而Puy等[29]研究表明在8.5天內(nèi)細(xì)胞團(tuán)時(shí)期和10.5天外胚層時(shí)期，Oc t4在滋養(yǎng)層核心細(xì)胞內(nèi)均有表達(dá)，但在內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和外胚層無(wú)表達(dá)；而Nanog則在這兩個(gè)胚齡的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和外胚層表達(dá)，相反地在滋養(yǎng)層和內(nèi)胚層內(nèi)無(wú)表達(dá)；Sox2的表達(dá)模式更是嚴(yán)格地受內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和外胚層控制?？梢?jiàn)Oc t4、Sox2和Nanog隨著胚齡的差異表達(dá)的量和組織均有所不同。多個(gè)研究發(fā)現(xiàn)僅在豬外胚層10天時(shí)，Oc t4、Nanog和Sox2才共同表達(dá)[29]。豬早期胚胎囊胚和內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中有著與靈長(zhǎng)類(lèi)和小鼠不同的獨(dú)一無(wú)二的表達(dá)圖譜，但是這些轉(zhuǎn)錄因子在不同物種間外胚層中的表達(dá)則趨于相同[29]。但無(wú)論如何，這三種因子對(duì)培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞（emb ryonic stem cell,ES）的作用是毫無(wú)疑問(wèn)的，添加與否直接影響ES細(xì)胞是否能夠維持多能性[30]。

Oct4、Sox2和Nanog是研究最詳細(xì)的多能性基因之一，三者均通過(guò)正反饋調(diào)控了自身的表達(dá)，而自身的表達(dá)還受到其他兩者的正調(diào)控，三者或許通過(guò)這種正反饋調(diào)控機(jī)制以及對(duì)相同靶基因的調(diào)控，建立了表達(dá)和功能上的彼此聯(lián)系。2009年，張?chǎng)雾祵?shí)驗(yàn)結(jié)果證明豬Oct4基因過(guò)表達(dá)能夠在成纖維細(xì)胞中上調(diào)多個(gè)多能因子，其中Sox2表達(dá)量提高了3倍，Nanog基因的表達(dá)量上調(diào)4倍左右[28]。這也證明了在誘導(dǎo)重編程中Oc t4基因同樣具有激活多種因子的表達(dá)作用，同時(shí)Oct4的單獨(dú)作用也可實(shí)現(xiàn)促進(jìn)相關(guān)基因的高度表達(dá)。

5總結(jié)

本文主要對(duì)與豬早期胚胎發(fā)育相關(guān)的原癌基因、白血病抑制因子、胰島素生長(zhǎng)因子和若干轉(zhuǎn)錄因子進(jìn)行綜述，以說(shuō)明其在豬早期胚胎正常發(fā)育過(guò)程中發(fā)揮重要的功能性作用。這些因子在豬胚胎著床前對(duì)胚胎的生理功能進(jìn)行嚴(yán)密調(diào)控，同時(shí)也參與早期胚胎的生長(zhǎng)發(fā)育和凋亡等。胚胎著床前相關(guān)因子的調(diào)控關(guān)系到豬胚胎損失率的高低，同時(shí)也影響子代的生理功能。弄清這類(lèi)因子的調(diào)控模式，不但可以有助于豬ES細(xì)胞的體外培養(yǎng)，也有助于生產(chǎn)上減少胚胎凋亡，從而提高子代的存活率，提高養(yǎng)殖業(yè)的生產(chǎn)效率。

[1]李艷紅.早期胚胎中的基因表達(dá)[J].國(guó)外醫(yī)學(xué).婦產(chǎn)科學(xué)分冊(cè),2000(6):322-325.

[2]師科榮,王愛(ài)國(guó),李寧,等.白色基因座(I)在中國(guó)地方豬種毛色遺傳中的作用研究[J].遺傳學(xué)報(bào),2005(3):275-281.

[3]Sakurai M,Zhou JH,Ohtaki M,et al.Assignment of c-KIT gene to swine chromosome 8p12-p21 by fluorescence in situ hyb rid ization[J].Mamm Genom e,1996,7(5):397.

[4]何余湧.原癌基因及其對(duì)豬相關(guān)性狀的影響[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2010(23):43-45.

[5]白小青,王金勇.豬毛色遺傳的研究進(jìn)展[J].動(dòng)物科學(xué)與動(dòng)物醫(yī)學(xué),2004(8):32-33.

[6]LaiF,Ren J,AiH,et al.Chinese white Rongchang p ig does nothave the dom inantwhite allele of KIT but has the dom i-nantb lack allele o fMC1R[J].JHered,2007,98(1):84-87.

[7]Ogawa M,Nishikawa S,Yoshinaga K,et al.Exp ression and function of c-Kit in fetal hemopoietic p rogenitor cells: transition from the early c-Kit-independent to the late c-Kit-dependentwave of hem opoiesis in the m urine emb ryo[J]. Development,1993,117(3):1089-1098.

[8]王軍,王寶珍,王江濤,等.干細(xì)胞因子受體基因在再生障礙性貧血患兒中的表達(dá)[J].實(shí)用兒科臨床雜志,2007(3):195-196.

[9]Vincent S,Seg retain D,Nishikawa S,et al.Stage-specific exp ression of the Kit recep tor and its ligand(KL)during male gametogenesis in the mouse:a Kit-KL interaction critica l for m eiosis[J].Developm ent,1998,125(22):4585-4593.

[10]葛少欽,康現(xiàn)江,劉桂榮,等.精子發(fā)生過(guò)程中的相關(guān)基因[J].遺傳,2008(1):3-12.

[11]呂俊.白血病抑制因子與人類(lèi)生殖[J].實(shí)用婦產(chǎn)科雜志, 2003(06):338-340.

[12]Spotter A,Drogemuller C,Kuiper H,et al.Molecu lar characterization and chrom osome assignment of the porcine gene for leukem ia inhibitory factor LIF[J].Cytogenet Cell Genet, 2001,93(1-2):87-90.

[13]Mod ric T,Kowalski AA,Green ML,et al.Pregnancy-dependent exp ression of leukaem ia inhibitory factor(LIF),LIF recep tor-beta and interleukin-6(IL-6)m essenger ribonuc leic acids in the porcine female rep roductive tract[J].Placenta,2000, 21(4):345-353.

[14]HallVJ,Christensen J,Gao Y,etal.Porcine p luripotency cell signaling develops from the inner cellmass to the ep ib last during early deve lopment[J].Dev Dyn,2009,238(8):2014-2024.

[15]Wianny F,Perreau C,Hochereau D R M.Pro liferation and d ifferentiation of porcine inner ce llmass and ep ib last in vitro [J].BiolRep rod,1997,57(4):756-764.

[16]Ashworth C J,Pickard A R,Miller S J,et al.Comparative stud ies o f concep tus-endom etrial interactions in Large White x Land race and Meishan g ilts[J].Rep rod Fertil Dev,1997,9(2): 217-225.

[17]Blom berg L,Zuelke K A.Serialana lysis of gene exp ression(SAGE)during porc ine em b ryo development[J].Rep rod FertilDev,2004,16(1-2):87-92.

[18]Spotter A,Drogem uller C,Hamann H,et a l.Evidence of a new leukem ia inhibitory factor-associated genetic m arker for litter size in a synthetic pig line[J].J Anim Sci,2005,83(10): 2264-2270.

[19]Spotter A,Muller S,Hamann H,et al.Effect of polymorphism s in the genes for LIF and RBP4 on litter size in two Germ an p ig lines[J].Rep rod Dom estAnim,2009,44(1):100-105.

[20]Lin H C,Liu G F,Wang A G,et al.Effect of po lymorphism in the leukem ia inhibitory fac tor gene on litter size in Large White p igs[J].MolBiolRep,2009,36(7):1833-1838.

[21]張豪,吳珍芳,劉德武,等.LIF基因與長(zhǎng)白母豬繁殖性狀的關(guān)聯(lián)分析[J].廣東農(nóng)業(yè)科學(xué),2011(9):139-141.

[22]郭海燕,吳德,周安國(guó),等.IGF在母豬生殖器官中的表達(dá)和對(duì)早期胚胎發(fā)育的作用[J].四川畜牧獸醫(yī),2006(08):36-38.

[23]Geisert RD,Cham berlain CS,Vonnahm e KA,et al.Possib le role of kallikrein in p roteolysis of insulin-like g row th factor binding p roteins during the oestrous cyc le and early p regnancy in p igs[J].Rep roduction,2001,121(5):719-728.

[24]Green FR,Clausen CA,Kuster TA,et al.Induction of polygalacturonase and the formation of oxalic acid by pectin in brown-rot fungi[J].World J Microbiol Biotechnol,1995,11(5): 519-524.

[25]Supp ini A,Kaiser E,Sa llaberry M,et al.The use of curare-like agents in resuscitation[J].Ann Fr Anesth Reanim,1999, 18(3):341-354.

[26]du Puy L,Lopes SM,Haagsm an HP,et al.Analysis o f co-exp ression of OCT4,NANOG and SOX2 in p luripotent cells of the porcine em b ryo,in vivo and in vitro[J].Theriogenology,2011, 75(3):513-526.

[27]Ivanova N,Dob rin R,Lu R,eta l.Dissecting se lf-renewal in stem cells with RNA interference[J].Nature,2006,442(7102): 533-538.

[28]張?chǎng)雾?豬源多能性基因的克隆與豬Oc t4基因的重編程功能研究[D].哈爾濱:東北農(nóng)業(yè)大學(xué),2012.

[29]Puy L,Chuva D S L S,Haagsm an H P,etal.Differentiation of porcine inner ce llmass ce lls into p roliferating neural cells [J].Stem Ce lls Dev,2010,19(1):61-70.

[30]Hall VJ.Early development of the porcine embryo:the im portance of cell signalling in deve lopment of p luripotent cell lines[J].Rep rod FertilDev,2012,25(1):94-102.

S813.3

B

1673-4645（2014）05-0037-04

2014-02-28