不同煎煮時(shí)間大黃水提物對大鼠子宮、卵巢、體重指數(shù)的影響*

劉夢杰，宋素英，佟繼銘，盧 寧，張樹峰△

(1.河北省中藥研究與開發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，承德醫(yī)學(xué)院中藥研究所，河北承德 067000;2.河北聯(lián)合大學(xué)中醫(yī)學(xué)院)

大黃是傳統(tǒng)瀉下藥的代表，具有清熱瀉火、逐瘀通經(jīng)、涼血解毒等功效[1];臨床上常用于便秘、止血、抗菌消炎、利膽、改善腎功能等[2]。研究發(fā)現(xiàn)，大黃煎煮時(shí)間不同藥效不同[3];大黃煎煮10-15min時(shí)總蒽醌含量最高，時(shí)間過短成分溶出不完全，過長則導(dǎo)致成分破壞[4]。本課題組的前期研究發(fā)現(xiàn)，長期灌胃大劑量大黃水提取物可使雄性小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞消失、生精小管基膜缺失斷裂、部分生精細(xì)胞消失[5]。本研究在前期實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，觀察了不同煎煮時(shí)間大黃水提物對幼年雌性大鼠體重以及生殖系統(tǒng)的影響，以期為今后臨床用藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器與藥品 大黃，產(chǎn)地甘肅，購自安國市長安中藥材有限公司，批號:20090902。經(jīng)承德醫(yī)學(xué)院中藥研究所劉翠哲研究員鑒定為掌葉大黃的干燥根莖。AG-245型電子分析天平(瑞士Mettler公司)。

1.2 大黃水提取物的制備 大黃藥材粉碎為粗粉，10倍水浸泡2h，水煎煮沸10min(30min)兩次，合并提取液，過濾，40℃減壓濃縮至生藥量含量為0.4g/ml備用。

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及處理 4周齡雌性SD大鼠70只，SPF級，購自北京華阜康生物科技股份有限公司，許可證號:SCXK(京)2009-0004。隨機(jī)分為正常對照組，大黃水 煎10min 0.5g/kg、1.0g/kg、2.0g/kg組，大 黃 水 煎30min 0.5g/kg、1.0g/kg、2.0g/kg組，每組10只。每組大鼠給予相應(yīng)劑量的藥物連續(xù)灌胃給藥30d后處死。

1.4 計(jì)算體重、子宮、卵巢指數(shù) 記錄每周體重，計(jì)算體重指數(shù):體重增長(%)=(用藥后體重-用藥前體重)/用藥前體重×100%;取子宮、卵巢稱重，計(jì)算臟器指數(shù):子宮(卵巢)指數(shù)(%)=雙側(cè)子宮(卵巢)質(zhì)量(g)/體重(g)×100%[6]。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析 應(yīng)用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料的比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 大黃對體重的影響 與正常對照組比較，大黃水煎10min各劑量組，大黃水煎30min 2.0g/kg組大鼠體重增長受抑制，體重指數(shù)明顯降低(P＜0.05)。相同煎煮時(shí)間不同劑量比較:水煎30min 2.0g/kg組體重指數(shù)低于0.5g/kg組(P＜0.05)，水 煎10min 2.0g/kg、1.0g/kg組體重指數(shù)低于0.5g/kg組(P＜0.05);不同煎煮時(shí)間相同劑量比較:10min各劑量組均低于30min各劑量組(P＜0.05)。見附表。

2.2 大黃對子宮、卵巢指數(shù)的影響 與正常對照組比較，大黃水煎10min各劑量組，大黃水煎30min 2.0g/kg組大鼠子宮、卵巢指數(shù)明顯降低(P＜0.05)。相同煎煮時(shí)間不同劑量比較:水煎30min 2.0g/kg組低于0.5g/kg組(P＜0.05)，水 煎10min 2.0、1.0g/kg組 低 于0.5g/kg組(P＜0.05);不同煎煮時(shí)間相同劑量比較:10min各劑量組均低于30min各劑量組(P＜0.05)。見附表。

附表 大黃水提取物對雌性大鼠子宮、卵巢指數(shù)及體重指數(shù)的影響(±s，n=10)

附表 大黃水提取物對雌性大鼠子宮、卵巢指數(shù)及體重指數(shù)的影響(±s，n=10)

與正常對照組比較:aP＜0.05;與相同煎煮時(shí)間0.5g/kg劑量組比較:bP＜0.05;與大黃水煎30min劑相同劑量比較:cP＜0.05

組別 劑量(g/kg) 體重指數(shù) 子宮指數(shù) 卵巢指數(shù)正常對照組 - 2.03±0.10 0.23±0.04 0.074±0.011 0.5 1.91±0.04ac 0.19±0.01ac 0.065±0.006ac大黃水煎10min劑 1.0 1.84±0.08abc 0.18±0.01abc 0.059±0.005abc 2.0 1.80±0.11abc 0.17±0.02abc 0.058±0.008abc 0.5 1.97±0.07 0.22±0.03 0.073±0.007大黃水煎30min劑 1.0 1.94±0.10 0.21±0.03 0.071±0.009 2.0 1.9±0.07ab 0.19±0.02ab 0.066±0.004ab

3 討論

動(dòng)物的體重指數(shù)和臟器指數(shù)是毒理學(xué)安全評價(jià)的重要指標(biāo)，可用于判斷受試物是否導(dǎo)致某項(xiàng)指標(biāo)的異常[7]。本研究顯示，水煎10min各劑量組、水煎30min 2.0g/kg組大鼠體重指數(shù)明顯低于正常對照組，說明兩種煎煮時(shí)間的大黃水提物均能降低大鼠的體重指數(shù);不同煎煮時(shí)間相同劑量比較，大黃水煎10min各劑量組大鼠的體重指數(shù)明顯低于水煎30min各劑量組，說明大黃對大鼠體重增長的影響與煎煮時(shí)間有關(guān);相同煎煮時(shí)間不同劑量間比較的結(jié)果顯示，大黃對體重增長的影響程度隨劑量的增加而增大。

卵巢作為女性生殖系統(tǒng)的中心，具有排卵、分泌雌性激素的內(nèi)分泌功能，子宮是胚胎發(fā)育的器官，卵巢和子宮出現(xiàn)損傷則會導(dǎo)致生殖周期等雌性生殖功能的障礙[8-9]。本研究發(fā)現(xiàn)，不同煎煮時(shí)間大黃水提取物均能降低子宮、卵巢指數(shù)，可見，大黃水提取物可對子宮、卵巢造成損害;本研究亦顯示，大黃對大鼠子宮、卵巢指數(shù)的影響與大黃煎煮時(shí)間有關(guān)，且影響程度隨劑量的增加而增大。

綜上所述，不同煎煮時(shí)間大黃水提取物可對幼年雌性大鼠體重增長、子宮和卵巢指數(shù)造成一定影響，影響程度與大黃的煎煮時(shí)間和劑量有關(guān)。因此，本研究可為大黃在臨床的安全應(yīng)用提供相關(guān)數(shù)據(jù)。

[1] 唐銘堅(jiān)，譚禮萍，劉錚紅，等.大黃的藥理活性研究進(jìn)展[J].中國熱帶醫(yī)學(xué)，2012，12(7):886-889.

[2] 金蘭.大黃的藥理作用及臨床進(jìn)展[J].中國醫(yī)藥指南，2013，11(11):487-488.

[3] 孫玉琦，肖小河，馬永剛，等.大黃煎煮過程中蒽醌類成分動(dòng)態(tài)變化規(guī)律研究[J].解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào)，2006，22(4):281-283.

[4] 王智松，金巧英.影響大黃藥效的有關(guān)因素[J].中西醫(yī)結(jié)合雜志，1987，7(3):182-185.

[5] 胡曉丞，李亞洲，高沖，等.大黃水提取物對雄性小鼠睪丸影響的實(shí)驗(yàn)研究[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥，2013，24(5):1132-1134.

[6] 盛華剛.鹿銜草的化學(xué)成分與藥理作用研究進(jìn)展[J].西北藥學(xué)雜志，2011，27(4):383-384.

[7] 林健，黃宗銹，林蔚，等.SD大鼠體重和主要臟器正常參考值探討及相關(guān)分析[J].海峽醫(yī)學(xué)預(yù)防雜志，2005，11(5):24-26.

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