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    老年人口腔細(xì)胞角蛋白與口腔扁平苔蘚關(guān)系的臨床研究

    2013-12-31 00:00:00張?zhí)?/span>魏銀花鄒文靜陳可佳
    中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生 2013年25期

    [摘要] 目的 探討老年患者口腔CK與OLP的相關(guān)性,為臨床的疾病診斷和制定治療方案提供依據(jù)。 方法 32例病例樣本來(lái)源于我院口腔科經(jīng)病理學(xué)檢驗(yàn)確診的OLP患者頰部病變組織,為研究組;另取同期口腔拔牙患者健康口腔黏膜組織30例,為對(duì)照組;進(jìn)行樣本制備和垂直電泳處理,觀察兩組樣本的CK陽(yáng)性情況。 結(jié)果 研究組患者CK2、CK4和CK5陽(yáng)性率明顯低于對(duì)照組,而研究組CK10、CK13和CK14的陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。 結(jié)論 口腔細(xì)胞角蛋白與口腔扁平苔蘚的發(fā)病有一定相關(guān)性,CK2、CK4、CK5的淺表達(dá)和CK10、CK13、CK14的過(guò)表達(dá),影響上皮細(xì)胞組織的增殖、分裂、角化等,進(jìn)而影響OLP的發(fā)病。

    [關(guān)鍵詞] 老年患者;口腔細(xì)胞角蛋白;口腔扁平苔蘚;相關(guān)性

    [中圖分類(lèi)號(hào)] R781.5 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701(2013)25-0149-02

    老年人體質(zhì)差,易發(fā)生各類(lèi)口腔感染??谇槐馄教μ\(OLP)是一種較為常見(jiàn)的口腔內(nèi)慢性非感染性病變,主要發(fā)病于口腔黏膜,表現(xiàn)為上皮的過(guò)度角化,可累及口腔頰、牙齒、舌等其他部位的黏膜組織,屬于免疫反應(yīng)性疾病的一類(lèi)[1]。目前臨床對(duì)OLP的治療比較困難,易反復(fù)且有惡性?xún)A向,被世界衛(wèi)生組織(WHO)列入到癌前狀態(tài)范疇中。研究表明,細(xì)胞角蛋白(CK)與上皮角質(zhì)細(xì)胞的增殖具有相關(guān)性[2]。CK屬于角質(zhì)細(xì)胞中的骨架性蛋白,多于上皮細(xì)胞中表達(dá),具有組織分化的特異性和高度保守性[3]。為探討老年患者口腔CK與OLP的相關(guān)性,給臨床的疾病診斷和制定治療方案提供依據(jù),早期遏制癌變,筆者選取我院自2011年6~12月間收集的OLP標(biāo)本共32例,現(xiàn)報(bào)道如下。

    1 資料與方法

    1.1 臨床資料

    32例病例樣本來(lái)源于我院口腔科經(jīng)病理學(xué)檢驗(yàn)確診的OLP患者頰部病變組織,為研究組,其中男18例,女14例;年齡60~82歲,平均(69.4±5.3)歲;排除服用激素類(lèi)藥物患者和有口腔黏膜病變者。另取同期口腔拔牙患者健康口腔黏膜組織30例為對(duì)照組,其中男15例,女15例,年齡60~78歲,平均(66.2±4.8)歲。

    1.2 方法

    1.2.1 儀器與試劑 采用北京天誠(chéng)活德生物技術(shù)有限公司提供的DYY-12C型號(hào)電泳儀,由同廠提供的DYCZ-30型夾芯式垂直電泳槽。紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)由上海精密儀器儀表有限公司供應(yīng),型號(hào)UV-3200PCGLP。聚偏二氟乙烯(PVDF)膜由美國(guó)BIO-RAD伯樂(lè)公司生產(chǎn)。鼠抗人廣譜細(xì)胞角蛋白(P-CK)單克隆抗體由上海麗臣生物科技有限公司供應(yīng),配有ELISA試劑盒。辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記羊抗小鼠IgG由上海萬(wàn)安生物科技有限公司提供。DAB染色試劑盒由北京賽馳生物科技有限公司提供。

    1.2.2 樣本制備 取兩組口腔黏膜標(biāo)本各分為2份,一份行病理學(xué)HE染色驗(yàn)證確診,一份行樣本制備與檢測(cè)。將口腔黏膜標(biāo)本置入濃度3 mmol/L的乙二胺四乙酸(EDTA)無(wú)鈣鎂磷鹽緩沖液中,置于37℃環(huán)境下靜置2 h后取出,利用顯微外科組織鑷在10×4倍的觀察視野下分離上皮組織。分離后的上皮組織置入碾缽中,加入液氮研磨至粉末狀,再加入高鹽緩沖液1 mL,于4℃環(huán)境下勻漿1 h后,移入離心管進(jìn)行離心處理10 min,轉(zhuǎn)速5 000 r/min,棄除上清液后,將沉淀物重懸于低鹽緩沖液中,繼續(xù)混勻攪拌,于4℃環(huán)境下移入離心管離心處理5 min,轉(zhuǎn)速5000 r/min,再次棄除上清液,將沉淀物以PBS洗滌5 min,第3次離心,轉(zhuǎn)速5 000 r/min,棄除上清液,沉淀物加入細(xì)胞角蛋白溶解液1 mL后于沸水浴中攪拌7 min,冷卻后再行離心,離心后上清液用紫外分光光度計(jì)測(cè)定蛋白定量,蛋白濃度為2.5 μg/μL。

    1.2.3 電泳 進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠垂直電泳,凝膠上的樣孔均勻分為兩份,各放入5個(gè)樣本,兩份樣本一一對(duì)應(yīng)。兩份凝膠一份使用考馬斯亮藍(lán)R250進(jìn)行染色處理后觀察色帶變化情況,另一份應(yīng)用Western雜交電泳處理,證實(shí)獲得蛋白條帶屬于角蛋白。各樣品槽內(nèi)加樣,濃縮膠5%,分離膠12%。電泳后將凝膠切取一半移至PVDF膜上,再使用封閉液封閉好,于4℃環(huán)境下靜置過(guò)夜,次日加入抗CK抗體,靜置于4℃環(huán)境下過(guò)度,再以PBST液洗滌PVDF膜,反復(fù)3次后,加入辣根過(guò)氧化物酶,二抗標(biāo)記,置于37℃環(huán)境下行2 h振蕩,取出后用PBST洗滌PVDF膜,反復(fù)3次,參照DAB染色試劑盒的相關(guān)說(shuō)明進(jìn)行顯色處理。

    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    獲得數(shù)據(jù)錄入統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包SPSS15.0中并建立數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    分別對(duì)研究組和對(duì)照組檢驗(yàn)樣本中CK陽(yáng)性率進(jìn)行比較,兩組計(jì)數(shù)資料CK2、CK4和CK5、 CK10、CK13和CK14分別進(jìn)行卡方檢驗(yàn),見(jiàn)表1,研究組患者CK2、CK4和CK5陽(yáng)性率明顯低于對(duì)照組,而研究組CK10、CK13和CK14的陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

    3 討論

    OLP的病理改變與CK的變化密切相關(guān)。李寧等[4]研究指出,基底層細(xì)胞凋亡過(guò)程中角質(zhì)形成細(xì)胞形成嗜伊紅小體,尤以O(shè)LP基底膜破壞區(qū)域、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)區(qū)域、上皮T細(xì)胞侵入?yún)^(qū)域等更為明顯?;准?xì)胞可通過(guò)將抗原提呈給細(xì)胞毒性T細(xì)胞促成角質(zhì)形成細(xì)胞形成免疫損傷的靶細(xì)胞,從而降低黏膜上皮的自我修復(fù)能力,促進(jìn)OLP的形成及進(jìn)展。CK主要于上皮組織細(xì)胞表達(dá),屬于細(xì)胞中間絲的主要成分,研究認(rèn)為其具有高度的組織和細(xì)胞特異性[5]。

    CK2是二型細(xì)胞角蛋白,簡(jiǎn)潔等[6]報(bào)道口腔黏膜中的角化上皮和非角化上皮一般情況下較少出現(xiàn)在CK2的表達(dá)。Presland等[7]研究OLP中未發(fā)現(xiàn)CK2的表達(dá)。在本組研究中,研究組的CK2無(wú)表達(dá),對(duì)照組的CK2表達(dá)陽(yáng)性率僅20%,與相關(guān)報(bào)道相符,提示在正常口腔黏膜組織中可能存在不穩(wěn)定CK2,但OLP可能引起DK2的表達(dá)減少甚至是消失。CK4屬于上皮分層和非角化標(biāo)志,一般和CK13形成角蛋白對(duì),于口腔上皮組織中呈現(xiàn)。CK5屬于基底層標(biāo)志,一般是與CK14呈現(xiàn)角蛋白對(duì),二者可形成彈性纖維網(wǎng),從而適應(yīng)細(xì)胞分裂以及組織形成變化,為細(xì)胞的形變提供環(huán)境。在本組研究中,CK4、CK5在研究組中的表達(dá)均極少,在對(duì)照組中表達(dá)相對(duì)多,與CK2的表達(dá)相似,筆者認(rèn)為可能是OLP的進(jìn)展引起CK4和CK5的減少或消失。CK2、CK4、CK5在OLP中表達(dá)不足可作為臨床研究的一種現(xiàn)象,但其消失過(guò)程及誘因等仍需進(jìn)一步的臨床深入研究。

    CK10、CK13和CK14是目前對(duì)OLP研究中較為關(guān)注的幾種角蛋白,毛良軍[8]直接對(duì)該三種CK的顯微鏡下表現(xiàn)進(jìn)行報(bào)道,并指出該三種CK表達(dá)的變化與OLP病灶的角化、增殖和分化有關(guān)。CK10作為角化標(biāo)志,在角化復(fù)層的鱗狀上皮基底層中表達(dá),在細(xì)胞角化的過(guò)程中產(chǎn)生變化。CK10過(guò)度表達(dá)可能會(huì)致使上皮細(xì)胞的角化和分化,在本組研究中研究組DK10陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組,提示CK10在OLP中存在過(guò)度表達(dá),可能也是引發(fā)OLP發(fā)病及進(jìn)展的因素之一。CK13屬于細(xì)胞分層與分化的標(biāo)志,主要于頰黏膜上皮的基底組織上層表達(dá),臨床可通過(guò)CK13的表達(dá)了解上皮組織的分化與成熟情況。在本組研究中,研究組CK13陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組,提示CK13的表達(dá)過(guò)度可能影響OLP上皮細(xì)胞的分化與分層。CK14屬于基底層的標(biāo)志,主要集中表現(xiàn)在基底層細(xì)胞中,由于基底層細(xì)胞具有較高的分裂與增殖能力,因而CK14的變化可表達(dá)細(xì)胞分裂增殖的能力與程度。在本組中研究組CK14陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組,提示CK14的過(guò)度表達(dá)可能影響到OLP上皮細(xì)胞加強(qiáng)增殖與分裂,從而引發(fā)病變或加重病情。

    總之,口腔細(xì)胞角蛋白與口腔扁平苔蘚的發(fā)病有一定相關(guān)性,CK2、CK4、CK5的淺表達(dá)和CK10、CK13、CK14的過(guò)表達(dá),影響上皮細(xì)胞組織的增殖、分裂、角化等,進(jìn)而影響OLP的發(fā)病。當(dāng)然,CK與OLP相關(guān)性之間的病理因素仍需要進(jìn)一步研究獲得。

    [參考文獻(xiàn)]

    [1]田燕,劉瑋,吳延芳,等. 細(xì)胞分化標(biāo)志分子在扁平苔蘚皮損中異常表達(dá)的研究[J]. 臨床皮膚科雜志,2010,31(8):448-450.

    [2]汪群,諸煥穎,孫紅英. 人口腔扁平苔蘚角質(zhì)形成細(xì)胞的體外培養(yǎng)及生物學(xué)鑒定[J]. 復(fù)旦學(xué)報(bào),2007,34(5):776-778.

    [3]毛良軍,古亞蘭,聶敏海,等. 細(xì)胞角蛋白10、13、14和19在OLP中的表達(dá)研究[J]. 臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志,2007,23(12):710-712.

    [4]李寧,翦新春. 口腔扁平苔蘚中細(xì)胞角蛋白19的表達(dá)及意義[J]. 臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志,2008,24(5):307-309.

    [5]于世鳳. 口腔組織病理學(xué)[M]. 第5版. 北京:人民衛(wèi)生出版社,2006: 200-202.

    [6]簡(jiǎn)潔,聶敏海,古亞蘭,等. 細(xì)胞角蛋白在口腔扁平苔蘚中表達(dá)的電泳研究[D]. 瀘州醫(yī)學(xué)院,2008:1-32.

    [7]Presland RB,Dale BA. Epithelial structural proteins of the skin and oral cavity:function in health and disease[J]. Crit Rev Oral Biol Med,2010,11(4):383-386.

    [8]毛良軍. CK10、CK13、CK14、CK19在口腔扁平苔蘚中的表達(dá)研究[D]. 瀘州醫(yī)學(xué)院,2007:12-53.

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