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    正交實驗優(yōu)選潤肺散結膠囊提取工藝的研究

    2013-12-31 00:00:00雷朝天唐勇琛梁學政王三虎馮獻斌
    中國現代醫(yī)生 2013年22期

    [摘要] 目的 篩選潤肺散結膠囊的最佳提取工藝。 方法 采用正交實驗設計,以人參皂苷Rb1的含量和水提浸出物得率為考察指標,以加水量、煎煮時間、煎煮次數為考察因素,優(yōu)選煎煮工藝;以濃縮液相對密度、醇沉濃度、醇沉時間為考察因素,優(yōu)選醇沉工藝。 結果 最佳提取工藝為煎煮3次,第1、2次分別為1.5 h,加8倍量水;第3次1 h,加6倍量水;濃縮液相對密度為1.05,醇沉濃度為60%,醇沉18 h。 結論 該工藝簡便,方法準確可靠,制成品質量穩(wěn)定。

    [關鍵詞] 潤肺散結膠囊;正交實驗;煎煮工藝;醇沉工藝

    [中圖分類號] R284 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701(2013)22-0075-03

    潤肺散結膠囊是廣西柳州市中醫(yī)院通過臨床實踐研制出的純中藥制劑,由紅參、海浮石、麥冬、百合、瓜蔞、半夏等14味中藥組成,具有益氣養(yǎng)陰、化痰散結之功效。從2004年7月起,我院腫瘤科、藥學部將潤肺散結湯作為院內協定方劑已經治療肺癌600余例,效果良好。其中系統(tǒng)觀察了潤肺散結膠囊治療氣陰兩虛痰濁泛肺型非小細胞肺癌72例,治療組采用潤肺散結湯口服并加用化療(36例),對照組采用單純化療(36例)。觀察顯示,潤肺散結膠囊合并化療,臨床療效可靠,主癥好轉率治療組(87.15%)明顯高于對照組(64.08%);生活質量的好轉和穩(wěn)定方面、毒副反應發(fā)生率、完成化療方面,治療組也明顯優(yōu)于對照組[1]。證明潤肺散結膠囊是治療氣陰兩虛、痰濁泛肺型非小細胞肺癌的有效制劑,值得臨床推廣應用。此外,我們還進行了潤肺散結膠囊對Lewis肺癌(荷瘤)小鼠的抑瘤作用實驗。實驗結果表明,潤肺散結膠囊對體外培養(yǎng)的Lewis肺癌細胞有明顯的抑制作用,其機制可能為誘導腫瘤細胞凋亡和提高機體免疫功能[2],為臨床用藥和本課題的深入研究提供了理論依據。為了更好地控制其質量,為制備工藝提供科學性依據,本文以人參皂苷Rb1含量和水提浸出物得率作為提取工藝評價指標,采用正交實驗法對提取工藝進行系統(tǒng)考察,以篩選出最佳工藝。

    1 儀器與試藥

    DH64型電熱恒溫干燥箱(上海市躍進醫(yī)療器械一廠);KQ-200VDE型雙頻數控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);CAL204電子天平(瑞士梅特勒-托利多儀器有限公司);KDM可調控溫電熱套(山東鄄城科源儀器設備廠);HH-4數顯恒溫水浴鍋(國華電器有限公司);HP-01無油真空泵 (上海市躍進醫(yī)療器械一廠);LK-1000A型搖擺式高速中藥粉碎機(浙江溫嶺市創(chuàng)力藥材器械廠);GC2105格力電磁爐(格力電器中山市小家電制造有限公司)。

    紅參、鱉甲、瓜蔞(廣西柳州百草堂藥業(yè)有限公司,批號:20110208);百合、法半夏、麥冬、白英(國藥控股柳州有限公司,批號:20110211);玄參、靈芝、炙甘草、生地黃、炮山甲(廣西柳州百草堂藥業(yè)有限公司,批號:20110126);海浮石、生牡蠣(廣西萬豐藥業(yè)有限公司,批號:20110209)。其他試劑均為分析純。

    2 方法與結果

    2.1 藥材吸水率試驗

    按處方比例稱取1/4處方量藥材6份,分別加入10倍量水,放入6個500 mL以上的燒杯中,編號,于不同時間濾出浸泡液,精密稱定吸液后的藥材重量,量取濾液體積,直至全部藥材浸泡過心、吸水量不再增加為止,見表1。

    結果表明,吸水率約為藥材重量的146%,故第一次煎煮時應多加1.26 倍量的水。

    2.2 煎煮工藝正交實驗設計

    結合文獻報道[3,5],以加水量(A)、煎煮時間(B)、煎煮次數(C)為主要考察因素,以人參皂苷Rb1含量和水提浸出物得率為考察指標,以兩項指標分別占60和40、總分為100分進行綜合評分,設計每個因素選擇三個水平進行實驗,采用L9(34)正交設計法對提取工藝進行優(yōu)化。煎煮工藝的因素水平見表2;煎煮工藝正交實驗結果見表4;方差分析結果見表5。

    2.3 煎煮試驗樣品的制備

    將處方中各藥材粉碎成粗粉,按比例稱取適量,根據表2的安排加水煎煮提取,煎煮前用規(guī)定量水浸泡。煎煮液用四層紗布濾過,合并,濃縮至200 mL,即得9份煎煮液,冷卻置于冰箱,保存?zhèn)溆谩?/p>

    2.4 人參皂苷Rb1含量測定[6]

    2.4.1 色譜條件 色譜柱:Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);流動相A:0.05%磷酸溶液,流動相B:乙腈,按表3進行梯度洗脫;流速:0.8 mL/min ;檢測波長:203 nm;柱溫:30℃;進樣量:20 μL;理論塔板數按人參皂苷Rb1色譜峰計算不低于5 000,與相鄰色譜峰的分離度>1.5。

    2.4.2 對照品溶液的制備 精密稱取人參皂苷Rb1對照品適量置于10 mL量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,配成濃度1.020 mg/mL 的人參皂苷Rb1對照品溶液備用。

    2.4.3 供試品溶液的制備[7] 取潤肺散結膠囊樣品內容物約10 g,精密稱定,置索氏提取器中,加石油醚(30℃~60℃)100 mL,加熱回流2 h,棄去石油醚,揮干藥渣溶劑,加甲醇提取至無色,合并提取液,水浴蒸干,殘渣加水60 mL使溶解,用水飽和的正丁醇振搖提取3次,每次40 mL,合并正丁醇液,蒸干,殘渣加甲醇溶解并定量轉移至10 mL量瓶中,加甲醇到刻度,搖勻,用0.45 μm微孔濾膜濾過,即得。

    2.4.4 陰性對照液的制備 按“2.3 煎煮試驗樣品的制備” 項下方法制備得到一份缺紅參藥材的煎煮液,后按上述 2.4.5 供試品溶液的制備 項下方法同法制備,得到缺紅參的陰性對照液。

    2.4.6 樣品測定 取人參皂苷Rb1對照品加甲醇溶解后在200~400 nm波長下掃描,最大吸收峰位置與2010年版中國藥典下相同,均為203 nm。分別吸取對照品溶液、供試品溶液及陰性對照液,注入高效液相色譜儀,以外標兩點法計算含量,結果見表3。

    2.5 得膏率的測定

    分別精密移取10 mL煎煮液,置于已恒重的干燥蒸發(fā)皿中水浴蒸干后,置于105℃烘箱中干燥3 h,迅速置于干燥器放冷,稱重,計算得膏率。

    2.6 煎煮工藝優(yōu)選

    見表4。

    由表3、表4可知,因素C即提取次數對人參皂苷Rb1含量及得膏率的綜合結果影響有顯著性,因素A和因素B對本試驗體系的影響沒有統(tǒng)計學意義,即加水倍數和煎煮時間對于試驗結果影響不大。影響程度依次為C>A>B,因而確定最佳煎煮工藝為A2B2C3,即煎煮3次,第1、2次分別為1.5 h,加8倍量水;第3次1 h,加6倍量水。

    2.7 醇沉工藝的正交設計

    本實驗以濃縮液相對密度(A)、醇沉濃度(B)、靜置時間(C)為主要考察因素,以人參皂苷Rb1含量為考察指標,設計每個因素選擇三個水平進行實驗,采用L9(34)正交設計法對醇沉工藝進行優(yōu)化,醇沉工藝因素水平見表6;醇沉工藝正交實驗結果見表7;方差分析結果見表8。

    2.8 醇沉試驗樣品的制備及測定

    根據最佳煎煮工藝制備9份煎煮液,分別濃縮至相對密度(60℃時測)為1.05、1.10、1.15,冷卻后,按照醇沉工藝正交表,邊快速攪拌邊緩慢加入95%的乙醇,使含醇量達到各實驗號所要求的含醇濃度,按要求靜置、抽濾,沉淀用相應濃度乙醇兩倍量體積分兩次沖洗,合并濾液。濾液回收乙醇,濃縮液水浴蒸干,減壓干燥得到干膏,研細。稱取0.5 g干膏,精密稱定,置于100 mL具塞錐形瓶中,精密加入50 mL甲醇,稱重,超聲60 min,放冷,補重。濾過,得供試品溶液,按“煎煮工藝正交實驗設計”中“2.4人參皂苷Rb1含量測定”項下測定。

    2.9醇沉工藝優(yōu)選

    見表6~8。由表7、表8可知,因素A對醇沉工藝的影響顯著,因素B、C基本無影響,影響程度依次為A>B>C,結合直觀分析表結果可以確定最佳醇沉工藝為: A1B2C2,即濃縮液相對密度為1.05,醇沉濃度為60%,靜置時間18 h。

    2.10 工藝驗證試驗

    取1倍量的處方投料,按照最佳煎煮工藝提取,合并煎煮液。按“2.4.3 供試品溶液的制備”項下制備供試品溶液,測定提取液中人參皂苷Rb1的含量,并測定浸膏得率,實驗數據及結果見表9;另取1倍量的處方投料,按照最佳煎煮工藝提取,最佳醇沉工藝處理,按“2.8醇沉試驗樣品的測定”項下自“按要求靜置”同法操作,測定干膏中人參皂苷Rb1的含量,實驗數據及結果見表10。由驗證實驗結果可見,按優(yōu)化的條件重復操作3次,煎煮工藝中,人參皂苷Rb1的平均含量為0.667 2 mg/g,平均得膏率為31.00%,人參皂苷Rb1含量的RSD=3.72%,浸膏得率的RSD=2.31%;醇沉工藝中,醇沉后所得干膏中人參皂苷Rb1的含量平均為0.657 6 mg/g,RSD=2.89%,結果均比較理想。表明此煎煮和醇沉方法重現性好,工藝條件合理、穩(wěn)定、可行。

    3 討論

    在實驗中,考慮到藥材的吸水性,因而對藥材的吸水率進行了考察,通過實驗得出該處方藥材的吸水率為146%,進一步提高了試驗的準確性。

    本研究通過正交實驗確立了潤肺散結膠囊提取工藝中的一系列參數,為工業(yè)化生產條件的制定提供了參考依據。在研究中發(fā)現不同供應商及產地的藥材含量相差太大,如不同批次購買紅參中人參皂苷Rb1的含量相差數倍。故本研究中所優(yōu)選最優(yōu)水平的有關指標數值僅作為制劑工藝篩選依據,不宜作為制定質量標準的含量參考。

    因紅參為方中君藥,人參皂苷Rb1為紅參有效成分之一,在水提工藝中采用高效液相法測定提取物中人參皂苷Rb1的含量,并以此評價工藝的優(yōu)劣,故其為重要指標之一,權重系數定為0.6。另將得膏率作為大類成分間接控制的指標,考察水提液得膏率量,確定權重系數為0.4。通過正交試驗,確定了最佳的提取工藝。確定的提取工藝操作簡單,重復性好,提取效率高,在制備潤肺散結膠囊的過程中有較高的應用價值。

    [參考文獻]

    [1] 王三虎,王宗仁,馮獻斌,等. 潤肺散結膠囊治療氣陰兩虛痰濁泛肺型非小細胞肺癌臨床觀察[J]. 中國中醫(yī)急癥,2007,16(10):1158-1186.

    [2] 王三虎,王宗仁,王四旺,等. 潤肺散結膠囊抗小鼠Lewis肺癌的實驗研究[J]. 中國中西醫(yī)結合急救雜志,2008,15(5):289-292.

    [3] 梁學政,陳惠紅,唐勇琛,等. 正交實驗優(yōu)選弱視明口服液的提取工藝[J]. 中國藥房,2011,22(31):2914-2916.

    [4] 任振學,張燕平. 正交實驗法優(yōu)選消黃靈注射液水煎煮提取工藝的研究[J]. 解放軍藥學學報,2001,17(6):338-339.

    [5] 李榮,胡成穆,鐘明媚,等. 正交設計研究金銀花綠原酸煎提工藝[J]. 安徽中醫(yī)學院學報,2006,25(1):39-40.

    [6] 國家藥典委員會編. 中華人民共和國藥典(一部)[S]. 北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:8,143.

    [7] 姜澤,李東飛,姚維民,等. 補金片質量標準研究[J]. 中國現代中藥,2011,13(4):37-40.

    [8] 張愛麗,潘衛(wèi)東. 補腎健骨片水煎藥材的提取、純化及制劑工藝研究[J]. 淮海工學院學報[J]. 2007,16(4):43-45.

    (收稿日期:2013-03-21)

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