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    肺癌患者T細(xì)胞亞群和D—二聚體與臨床分期相關(guān)性分析

    2013-12-31 00:00:00李姝君沈湘吳愛兵吳艷霞王永存唐志
    中國現(xiàn)代醫(yī)生 2013年22期

    [摘要] 目的 研究肺癌患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群、D-二聚體與臨床分期、臨床病理分級之間的關(guān)系。 方法 運(yùn)用流式細(xì)胞術(shù)和免疫比濁法分別測定80例肺癌患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群比例和D-二聚體含量。 結(jié)果 臨床分期Ⅲ~Ⅳ期(晚期)外周血中CD4+(%)比例較臨床Ⅰ~Ⅱ期(早期)低(P < 0.01)、Ⅲ~Ⅳ期(晚期)CD8+(%)比例較臨床Ⅰ~Ⅱ期(早期)高(P < 0.01)、CD4+/CD8+(%)比例較臨床Ⅰ~Ⅱ期(早期)低(P < 0.01),D-二聚體含量(μg/L)較臨床Ⅰ~Ⅱ期(早期)高,外周血T細(xì)胞亞群比例和D-二聚體的含量與病理類型和病理分級無相關(guān)性(P > 0.05)。 結(jié)論 肺癌患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群和D-二聚體含量與肺癌的臨床分期早晚相關(guān),與肺癌的病理類型和分化級別無關(guān),提示可作為肺癌患者分期的參考指標(biāo)。

    [關(guān)鍵詞] T淋巴細(xì)胞;D-二聚體;肺癌;臨床分期

    [中圖分類號] R734.2 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] B [文章編號] 1673-9701(2013)22-0058-02

    腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移與腫瘤微環(huán)境密切相關(guān)。而微環(huán)境內(nèi)執(zhí)行細(xì)胞免疫功能主要依賴于T淋巴細(xì)胞。正常情況下,T細(xì)胞及亞群的數(shù)目處于相對平衡狀態(tài),維持免疫功能穩(wěn)定;若T細(xì)胞總數(shù)或者CD4+/CD8+T細(xì)胞比值發(fā)生異常時,即可視為免疫調(diào)節(jié)紊亂,宿主免疫功能低下或受抑制,易發(fā)生腫瘤或自身免疫疾病[1]。腫瘤抗原識別通過CD4+完成,肺癌患者體內(nèi)CD4+細(xì)胞數(shù)減少,CD8+細(xì)胞數(shù)增多,則有利于腫瘤增長。而CD4+/CD8+比值增加,會抑制腫瘤增殖。故檢測肺癌患者外周血T細(xì)胞亞群,對于判斷腫瘤患者的免疫功能有一定價(jià)值,特別是對監(jiān)視腫瘤復(fù)發(fā)、提高療效、估計(jì)預(yù)后均有一定的臨床意義[2]。

    D-二聚體是纖維蛋白單體經(jīng)活化的因子交聯(lián)后再經(jīng)纖溶酶水解所產(chǎn)生的一種特異降解產(chǎn)物,有報(bào)道在肺癌[3]、肝癌[4]、結(jié)直腸癌[5]等惡性腫瘤中均有較高的表達(dá)。因而近年來有關(guān)惡性腫瘤患者D-二聚體水平的變化引起了許多學(xué)者的關(guān)注,D-二聚體的水平可能與腫瘤的臨床分期有關(guān)。本文通過測定不同肺癌分期T細(xì)胞亞群的比例、D-二聚體的含量,分析兩者在肺癌臨床分期、病理類型及病理分化級別中的意義,以期為肺癌診斷和治療提供理論支持。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    80例肺癌患者為2011年7月~2012年7月在我院腫瘤科或胸外科住院患者,其中男43例,女37例,年齡42~85歲,中位年齡59.4歲。所有患者均為經(jīng)支氣管鏡或手術(shù)病理證實(shí)的初診肺癌患者,其中支氣管鏡活檢確診32例,手術(shù)病理48例,根據(jù)2009年國際抗癌聯(lián)盟(UICC)的TNM分期標(biāo)準(zhǔn),其中Ⅰ期患者24例、Ⅱ期患者21例、Ⅲ期患者25例、Ⅳ期患者10例。所有患者均為初治患者,不伴有免疫缺陷性疾病、器官移植或其他系統(tǒng)的腫瘤,近3個月未使用過免疫增強(qiáng)或抑制的藥物及其他生物治療。

    1.2 主要試劑與儀器

    小鼠抗人IgG-PE、IgG-FITC、CD4+-FITC、CD8+-FITC、CD4+-PE、CD8+-PE為美國CST公司生產(chǎn),流式細(xì)胞儀為美國COULER EPICS XL,SIEMENS公司D-二聚體試劑盒,SYSMEX CA1500 全自動生化分析儀。

    1.3 方法

    收集治療前患者清晨空腹靜脈血2 mL,分別檢測患者治療前血漿D-二聚體水平及T淋巴細(xì)胞亞群的情況。采用SYSMEX CA1500全自動生化分析儀,D-二聚體試劑盒,應(yīng)用免疫比濁法檢測研究對象血漿D-二聚體含量。用流式細(xì)胞分析法測定T細(xì)胞亞群,方法為:用PE熒光標(biāo)記的單克隆抗體20 μL加入EDTA抗凝血100 μL發(fā)生抗原抗體反應(yīng),溶血劑2 mL破壞紅細(xì)胞,磷酸鹽緩沖液洗滌,固定液固定后用COULER EPICS XL流式細(xì)胞儀檢測外周血T淋巴細(xì)胞。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,并用SPSS 13.0軟件包對T淋巴細(xì)胞亞群和血清D-二聚體含量與肺癌臨床分期的關(guān)系進(jìn)行兩獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn), T淋巴細(xì)胞亞群和血清D-二聚體含量與病理分化級別的關(guān)系采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),以P < 0.01為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 肺癌的分期與肺癌患者T細(xì)胞亞群分布及D-二聚體含量的關(guān)系

    對肺癌臨床分期Ⅰ~Ⅱ期(早期)和Ⅲ~Ⅳ期(晚期)的樣本進(jìn)行兩獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn)按α=0.01的標(biāo)準(zhǔn),CD4+細(xì)胞比例(t=5.523,P=0.00047)、CD8+細(xì)胞比例(t=5.690,P=0.00032)、CD4+/CD8+比例(t=6.418,P=0.00063)及D-二聚體含量(t=6.154,P=0.00082)的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1。

    2.2 肺癌病理類型及病理分化級別與肺癌患者T細(xì)胞亞群分布及D-二聚體含量的關(guān)系

    肺癌病理類型分為鱗癌41例,腺癌39例。CD4+細(xì)胞的比例(鱗癌:t=3.193,P=0.592,腺癌:t=4.803,P = 0.843)、CD8+細(xì)胞比例(鱗癌:t=4.492,P = 0.321,腺癌:t = 5.52,P = 0.582)、CD4+/CD8+的比例(鱗癌:t = 0.546,P = 0.605,腺癌:t=0.558,P =0.642)與病理分化級別之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,D-二聚體含量(鱗癌:t = 3.28,P = 0.910,腺癌:t = 4.231,P = 0.431)與病理分化級別的差異亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表2。

    3 討論

    在惡性腫瘤形成過程中腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生免疫抑制因子抑制淋巴細(xì)胞分化增殖,使得淋巴細(xì)胞表面CD4+抗原減少,CD4+ T細(xì)胞降低,免疫反應(yīng)誘導(dǎo)及效應(yīng)不足,特異抗腫瘤效應(yīng)下降[5];CD8+T細(xì)胞反應(yīng)性增多,則CD8+T可直接作用于B淋巴細(xì)胞表面的同種異型受體,使與腫瘤抗原結(jié)合的受體被封閉,CD8+T細(xì)胞升高則免疫反應(yīng)低下,CD4+/CD8+降低,免疫抑制反應(yīng)的效應(yīng)高于免疫誘導(dǎo)[6],國內(nèi)已有報(bào)道T淋巴細(xì)胞亞群與結(jié)直腸癌、宮頸癌等臨床分期的關(guān)系,本研究發(fā)現(xiàn)外周血中CD4+比例、CD8+比例、CD4+/CD8+比例的改變與臨床分期早晚有關(guān),臨床分期Ⅲ~Ⅳ期(晚期)外周血中CD4+比例較臨床Ⅰ~Ⅱ期(早期)低、CD8+的比例較臨床Ⅰ~Ⅱ期(早期)高、CD4+/CD8+比例較臨床Ⅰ~Ⅱ期(早期)低,這與董暉等[7]、劉小林等[8]的報(bào)道類似。

    D-二聚體作為交聯(lián)纖維蛋白的降解產(chǎn)物,是繼發(fā)性纖溶的特異性分子標(biāo)志物之一,對惡性腫瘤的觀測有重要臨床價(jià)值。有報(bào)道稱約90%以上轉(zhuǎn)移癌和一半以上的原發(fā)癌存在凝血參數(shù)異常,研究發(fā)現(xiàn)D-二聚體含量與胃癌、乳腺癌、腸癌的TNM分期有關(guān)[9]。我們的數(shù)據(jù)顯示血清中D-二聚體與肺癌患者的TNM分期級別高低有關(guān),臨床晚期較于早期的外周血D-二聚體含量明顯增高,提示可以利用D-二聚體含量來檢測腫瘤的存在,同時同一病理類型(鱗癌或腺癌)分化級別與D-二聚體含量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,不同病理類型同一分化級別的腫瘤D-二聚體的含量亦無顯著性差異,說明D-二聚體的含量與肺癌的分期級別高低有關(guān)而與肺癌病理類型無關(guān)。

    本研究發(fā)現(xiàn)肺癌患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群和血清D-二聚體含量與臨床分期級別高低有關(guān),同時T淋巴細(xì)胞亞群和血清D-二聚體含量與肺癌的病理類型和分化級別無關(guān),提示T淋巴細(xì)胞亞群和D-二聚體可以作為臨床分期的輔助參考指標(biāo)。

    [參考文獻(xiàn)]

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    [2] Zhang J,Huang SH,Zhang Y,et al. Preoperative lymphocyte count is a favorable prognostic factor of disease-free survival in non-small-cell lung cancer[J]. Medical oncology,2013,30(1):352.

    [3] Ferroni P,Martini F,Justin B,et al. Novel high-sensitive D-dimer determination predicts chemotherapy-associated venous thromboembolism in intermediate risk lung cancer patients[J]. Clinical Lung Cancer,2012,13(6):482-487.

    [4] Alkim H,Ayaz S,Zhu HL,et al. Hemostatic abnormalities in cirrhosis and tumor-related portal vein thrombosis[J]. Clinical and Applied Thrombosis-Hemostasis,2012,18(4): 409-415.

    [5] Gothert JR,Eisele L,Bruce L,et al. Expanded CLL CD8+T-cells are driven into a senescent KLRG1(+) effector memory phenotype[J]. Blood,2010,116(21):403-403.

    [6] Zimmerer JM,Horne PH,Smith T,et al. Cytotoxic effector function of CD4+-independent, CD8+ T cells is mediated by TNF-alpha/TNFR[J]. Transplantation,2012,94(11):1103-1110.

    [7] 董暉,王朝杰. 結(jié)直腸癌患者免疫狀況與腫瘤分期的關(guān)系[J]. 國外醫(yī)學(xué):放射醫(yī)學(xué)核醫(yī)學(xué)分冊,2005,29(5):115-117.

    [8] 劉小林,王忠明. 宮頸癌患者淋巴細(xì)胞亞群檢測的臨床意義[J]. 放射免疫學(xué)雜志,2010, 23(5):592-593.

    [9] Suega K,Bakta IM. Correlation between clinical stage of solid tumor and D dimer as a marker of coagulation activation[J]. Acta medica Indonesiana,2011,43(3):162-167.

    (收稿日期:2013-04-02)

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