鹽續(xù)斷中試工藝的優(yōu)化

摘要：采用L9（34）正交試驗(yàn)，以續(xù)斷水溶性浸出物和川續(xù)斷（Dipsacus asper Wall. ex Henry）皂苷Ⅵ為測(cè)定指標(biāo)，考察鹽使用量、炒制溫度、炒制時(shí)間、炒藥機(jī)轉(zhuǎn)速4個(gè)因素對(duì)鹽續(xù)斷質(zhì)量的影響，并采用多指標(biāo)綜合評(píng)分法優(yōu)化鹽續(xù)斷中試炮制工藝。結(jié)果表明，鹽續(xù)斷中試最佳炮制工藝為每100 kg續(xù)斷飲片用2 kg食鹽，210 ℃炒12 min，炒藥機(jī)轉(zhuǎn)速40 r/min。綜合評(píng)分法優(yōu)選出的鹽續(xù)斷中試炮制工藝穩(wěn)定、可行，能較好地保證產(chǎn)品的質(zhì)量。

關(guān)鍵詞：續(xù)斷；鹽制；中試；工藝優(yōu)化

中圖分類號(hào)：S567.2；R943 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2013）18-4481-03

續(xù)斷為川續(xù)斷科（Dipsacaceae）多年生草本植物川續(xù)斷（Dipsacus asper Wall. ex Henry）的干燥根，主產(chǎn)于湖北、四川等地。味苦、辛，微溫，歸肝、腎經(jīng)，具有補(bǔ)肝腎、行血脈、續(xù)折傷的功效，臨床上多用于腰膝酸軟、風(fēng)濕痹痛、崩漏、胎漏、跌打損傷等癥[1]。研究表明續(xù)斷有抗骨質(zhì)疏松[2]、促進(jìn)骨愈合[3]、治療阿爾茨海默病的作用[4]及其他藥理作用，是治療骨科疾病及治療阿爾茨海默病的潛在藥物。酒續(xù)斷自古有之，目前已有較佳的炮制工藝[5]，而鹽續(xù)斷是近些年才發(fā)展起來的，鹽引藥走腎[6]，故鹽續(xù)斷補(bǔ)腎之功增強(qiáng)。目前鮮見關(guān)于鹽續(xù)斷炮制工藝的研究。為此采用正交試驗(yàn)，以續(xù)斷水溶性浸出物和川續(xù)斷皂苷Ⅵ含量為指標(biāo)，對(duì)加鹽量、炒制時(shí)間、炒制溫度和炒藥機(jī)轉(zhuǎn)速4個(gè)影響因素進(jìn)行分析，以期優(yōu)化鹽續(xù)斷的中試炮制工藝。

1 材料與方法

1.1 材料及設(shè)備

乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純。續(xù)斷購自浙江中醫(yī)藥大學(xué)中藥飲片廠（批號(hào)091214），經(jīng)浙江中醫(yī)藥大學(xué)來平凡教授鑒定為中國(guó)藥典規(guī)定的川續(xù)斷的干燥根。續(xù)斷經(jīng)凈制、切制得到薄片。對(duì)照品川續(xù)斷皂苷Ⅵ（批號(hào)111685-200401）購自中國(guó)藥品生物制品檢定所。該工藝研究中每次試驗(yàn)飲片用量為5 kg，炮制條件與大規(guī)模生產(chǎn)相近，可以指導(dǎo)續(xù)斷大規(guī)模生產(chǎn)的炮制工作。

Agilent 1200高效液相色譜儀（美國(guó)安捷倫公司）；CGY（Q）-750Z智能化炒藥機(jī)（杭州海善制藥設(shè)備有限公司）；KQ-500DB型數(shù)控超聲波清潔器（昆山市超聲儀器有限公司）；AL204電子分析天平（瑞士梅特勒-托利多公司）。

1.2 方法

1.2.1 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì) 續(xù)斷鹽制工藝正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)見表1。

1.2.2 水溶性浸出物含量的測(cè)定 取供試品約2 g置于100 mL的錐形瓶中，加水定容至50 mL，稱定重量，靜置1 h后連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸1 h。放冷后取下錐形瓶，再稱定重量，用去離子水補(bǔ)足減失的重量，搖勻，干燥濾器濾過，量取濾液2 mL置于干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，水浴上蒸干后于105 ℃干燥3 h，置干燥器中冷卻30 min，迅速精密稱定重量[1]。除另有規(guī)定外，以干燥品計(jì)算供試品中水溶性浸出物的含量。

1.2.3 川續(xù)斷皂苷Ⅵ含量的測(cè)定

1）色譜條件。反相色譜柱為Eclipse XDB-C18（4.6 mm×150 mm，5 μm），以乙腈-水（30∶70，V/V）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)212 nm，流速1 mL/min[1]。理論板數(shù)按川續(xù)斷皂苷Ⅵ峰計(jì)算應(yīng)不低于3 000。

2）對(duì)照品溶液的制備。精密稱取川續(xù)斷皂苷Ⅵ對(duì)照品適量，用甲醇配制成1.5 mg/mL的溶液。精確量取1 mL溶液置于10 mL的容量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻。

3）供試品溶液的制備。取鹽續(xù)斷細(xì)粉約0.5 g置于具塞錐形瓶中，加入甲醇25 mL，稱定重量，超聲波處理（功率100 W，頻率40 kHz）30 min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過。量取續(xù)濾液5 mL置于50 mL容量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻。

2 結(jié)果與分析

2.1 續(xù)斷鹽制正交試驗(yàn)結(jié)果及分析

以續(xù)斷水溶性浸出物和川續(xù)斷皂苷Ⅵ的總量為指標(biāo)進(jìn)行綜合加權(quán)評(píng)價(jià)，續(xù)斷水溶性浸出物和川續(xù)斷皂苷Ⅵ的總量權(quán)重各占50%，綜合加權(quán)得分=（第i個(gè)處理水溶性浸出物含量÷水溶性浸出物含量最大值）×50+（第i個(gè)處理川續(xù)斷皂苷Ⅵ含量÷川續(xù)斷皂苷Ⅵ含量最大值）×50。正交試驗(yàn)結(jié)果見表2。

從表2可以看出，各因素對(duì)鹽續(xù)斷質(zhì)量的影響為A>D>B>C，但影響均不顯著。因各因素都沒有顯著影響，故可以根據(jù)生產(chǎn)實(shí)際進(jìn)行適當(dāng)選擇。溫度的影響最大，但藥典要求炒至表面稍有焦斑即可，溫度太高會(huì)炒焦，故根據(jù)炮制要求及從節(jié)能角度綜合考慮，選擇炒制溫度為210 ℃；加鹽量對(duì)質(zhì)量影響不大，故選擇中藥飲片鹽制時(shí)普遍的鹽用量每100 kg飲片用2 kg食鹽；炒制時(shí)間影響最小，但由于是飲片加鹽水潤(rùn)透后再炒，飲片需炒干，根據(jù)本研究12 min可炒干并稍有焦斑；炒藥機(jī)轉(zhuǎn)速影響較大，但與實(shí)際有出入，攪拌的目的是使飲片炒得均勻，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果再考慮到節(jié)能，選擇炒藥機(jī)轉(zhuǎn)速為40 r/min。最后炮制條件選擇組合A3B2C1D2，即加鹽量為每100 kg飲片加食鹽2 kg，210 ℃炒制12 min，自動(dòng)炒藥機(jī)轉(zhuǎn)速為40 r/min。

2.2 驗(yàn)證試驗(yàn)

稱取同批次續(xù)斷飲片3份各5 kg，按照優(yōu)選的炮制工藝進(jìn)行重復(fù)性試驗(yàn)，結(jié)果見表3。從表3可以看出，各重復(fù)的續(xù)斷水溶性浸出物和川續(xù)斷皂苷Ⅵ含量穩(wěn)定，重復(fù)性良好，工藝穩(wěn)定可行。

2.3 續(xù)斷鹽制前后各項(xiàng)指標(biāo)含量比較

按照中國(guó)藥典規(guī)定的測(cè)定方法比較鹽制前后續(xù)斷水溶性浸出物和川續(xù)斷皂苷Ⅵ兩項(xiàng)指標(biāo)含量的變化，具體見表4。表4結(jié)果表明，續(xù)斷飲片鹽制后水溶性浸出物含量明顯升高，可能是鹽和高溫促使某些物質(zhì)在水中易溶出；川續(xù)斷皂苷Ⅵ含量略有降低，可能是高溫破壞了部分川續(xù)斷皂苷Ⅵ的結(jié)構(gòu)。

3 小結(jié)

通過4因素3水平正交試驗(yàn)優(yōu)選出續(xù)斷的最佳鹽制中試工藝，即每100 kg續(xù)斷飲片食鹽用量為2 kg，210 ℃炒制12 min，自動(dòng)炒藥機(jī)轉(zhuǎn)速為40 r/min。驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果表明該工藝穩(wěn)定可行，為續(xù)斷炮制的深入研究打下了一定的基礎(chǔ)。續(xù)斷鹽制正交試驗(yàn)以水溶性浸出物和川續(xù)斷皂苷Ⅵ的含量為指標(biāo)，這兩項(xiàng)指標(biāo)各占權(quán)重50%，綜合評(píng)判鹽續(xù)斷的炮制工藝，使炮制溫度、炮制時(shí)間、加鹽量、炒藥機(jī)轉(zhuǎn)速評(píng)判客觀化，克服了傳統(tǒng)的單憑經(jīng)驗(yàn)判斷各個(gè)影響因素因人而異的主觀性。該炮制工藝每個(gè)處理均用全自動(dòng)炒藥機(jī)炒制5 kg飲片，炮制的條件與大規(guī)模生產(chǎn)相近，可以直接指導(dǎo)續(xù)斷大規(guī)模生產(chǎn)的炮制工作。該研究對(duì)飲片炮制前悶潤(rùn)條件例如鹽水悶潤(rùn)時(shí)間及調(diào)鹽水時(shí)水的用量等未詳加考察，今后可研究各種悶潤(rùn)條件對(duì)鹽續(xù)斷質(zhì)量的影響。

參考文獻(xiàn)：

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（一部）[Z].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010.

[2] 馬中書，王 蕊，邱明才，等.單劑補(bǔ)腎中藥防治去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松的骨形態(tài)計(jì)量學(xué)研究[J]. 天津醫(yī)藥，1999（3）：131-134.

[3] 紀(jì)順心，關(guān)雪軍，李崇芳.中藥續(xù)斷對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性骨損傷愈合作用的觀察[J].中草藥，1997（2）：98-99.

[4] 錢亦華，胡海濤，楊 杰，等.川續(xù)斷對(duì)Alzheimer病模型大鼠頂葉皮質(zhì)內(nèi)淀粉樣蛋白沉積的作用[J].中國(guó)老年學(xué)雜志，2002， 22（1）：44-46.

[5] 許臘英，陳華曦，楊 慶，等.酒炙續(xù)斷最佳炮制工藝的研究[J].中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2006，28（17）：1475-1477.

[6] 趙燕鳳，趙變香.淺談中藥鹽制的作用[J].基層醫(yī)學(xué)論壇，2004， 8（3）：244.