高效液相色譜法檢測(cè)食品接觸材料中三聚氰酸的殘留量*

陳旻實(shí)，呂水源，李小晶，曾樹金，鄭思遠(yuǎn)

(1.福建出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心，福建省檢驗(yàn)檢疫技術(shù)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，國(guó)家消費(fèi)品安全檢測(cè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，福州 350001 ；2.泉州出入境檢驗(yàn)檢疫局，泉州 362000)

三聚氰酸（Cyanuric Acid，CYA）是三聚氰胺的水解產(chǎn)物，毒性較小，但與三聚氰胺同時(shí)被人體攝入后，通過分子間的氫鍵結(jié)合形成網(wǎng)狀三聚氰胺氰尿酸鹽（Melamine cyanurate，MCA），該晶體難溶于水，易在腎臟中積聚形成結(jié)石，堵塞腎小管，最終導(dǎo)致腎衰竭［1］。原材料中三聚氰酸含量的多少，直接影響三聚氰酸在成型品中的遷移量。通過建立可靠的三聚氰酸殘留量檢測(cè)方法，篩選出合格原料，從源頭把關(guān)產(chǎn)品品質(zhì)，進(jìn)而達(dá)到限制三聚氰酸在食物中的遷移量的目的。

目前，國(guó)內(nèi)外有關(guān)飼料和食品中三聚氰酸檢測(cè)的報(bào)道較多［2-5］，而有關(guān)食品接觸材料的報(bào)道則較少［6-8］，且主要是對(duì)成型品在水、4%乙酸、10%乙醇等食品模擬物中遷移量的測(cè)定，對(duì)原料和成型品中的單體殘留量的測(cè)定尚未見報(bào)道。筆者用乙醇溶液作為提取液，建立了以高效液相色譜檢測(cè)食品接觸材料（包括原料和成型品）中三聚氰酸殘留量的簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確、可靠的方法。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要儀器與試劑

高效液相色譜儀：1100型，配有二極管陣列檢測(cè)器（DAD），美國(guó)Agilent公司；

超聲波清洗器：KQ250E型，中國(guó)昆山儀器公司；

分析天平：AB204-L型，德國(guó)賽多利斯儀器公司；

研磨機(jī)：HY98-A型，中國(guó)南昌紅燕公司；

三聚氰酸標(biāo)準(zhǔn)品：純度大于99.0%，德國(guó)Dr. Ehrenstorfer公司；

三聚氰酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：準(zhǔn)確稱取三聚氰酸標(biāo)準(zhǔn)品100 mg，置于100 mL容量瓶中，用水超聲溶解并定容，濃度為1 000 mg／L，置于冰箱中保存，使用時(shí)用水稀釋成需要濃度的三聚氰酸標(biāo)準(zhǔn)工作液；

乙腈：色譜純，德國(guó)Meker公司；

乙醇：分析純，上海試一化學(xué)試劑公司；

磷酸鹽（PBS）緩沖溶液：5 mmol／L，pH 6.5。

1.2 樣品制備

將原料樹脂或成型品樣品制成1 cm×1 cm大小，然后用研磨機(jī)破碎成粒徑小于0.2 mm大小顆粒。稱取0.5 g（精確到0.1 mg）均質(zhì)樣品顆粒于50 mL帶蓋離心管中，加入10 mL 10%乙醇溶液，渦旋混勻，超聲振蕩20 min，以轉(zhuǎn)速2 500 r／min離心5 min。取1 mL上清液，過0.45 μm濾膜，上機(jī)測(cè)定。

1.3 色譜條件

色譜柱：Phenomenex Luna 氨基柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），美 國(guó)Phenomenex公 司；檢 測(cè)器：DAD；檢測(cè)波長(zhǎng)：214 nm；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：5 μL；流動(dòng)相：乙腈-PBS緩沖溶液（體積比為75∶25）；洗脫方式：等度洗脫；流速：1.0 mL／min。

2 結(jié)果與討論

2.1 提取條件的優(yōu)化

2.1.1 提取液

三聚氰酸微溶于水(20℃下溶解度為5 g／L)，溶于熱水、熱醇、吡啶，也溶于氫氧化鈉和氫氧化鉀水溶液，屬于極性化合物，提取溶劑一般選用稀酸溶液、有機(jī)溶劑與水的混合溶液、極性較強(qiáng)的有機(jī)溶劑或緩沖溶液［4］。先選用常見有機(jī)溶劑甲醇、乙醇、乙腈為提取液，考察同一提取方式下，不同有機(jī)溶劑對(duì)三聚氰酸的提取，結(jié)果見表1。由表1可知，甲醇和乙醇的提取效率相近，且明顯優(yōu)于乙腈，因此選用乙醇作為提取液有機(jī)溶劑。

表1 不同有機(jī)溶劑提取三聚氰酸的質(zhì)量濃度

選用體積分?jǐn)?shù)分別為10%，20%，50%的乙醇溶液和乙醇為提取液，考察不同提取液對(duì)三聚氰酸的提取效果，結(jié)果見表2。由表2可知，10%乙醇溶液的提取效率最高，因此選用10%乙醇溶液作為提取液。

表2 不同濃度乙醇溶液提取所得三聚氰酸的濃度

2.1.2 提取方式

分別考察了渦旋混合提取、振蕩提取、超聲提取、索氏回流提取等提取方式，結(jié)果表明索氏回流提取和超聲提取的效率較高，振蕩提取和渦旋混合提取效率低。由于索氏回流耗時(shí)長(zhǎng)且操作較繁瑣，因此選用超聲提取方式。

2.1.3 提取時(shí)間

以超聲提取為提取方式，以10%乙醇溶液為提取液，對(duì)同一份均質(zhì)樣品，考察不同超聲時(shí)長(zhǎng)的提取效果，結(jié)果見圖1。由圖1可知，超聲時(shí)間超過20 min，樣品中的三聚氰酸已基本提取完全。因此，超聲時(shí)間選擇20 min。

圖1 不同超聲時(shí)間三聚氰酸的提取濃度

2.2 色譜條件的選擇

色譜條件參照三聚氰胺及其衍生物遷移量的研究中所建立的方法［1］，具體參數(shù)見1.3。

2.3 線性范圍及檢出限

配制三聚氰酸系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，按照選用的色譜條件進(jìn)行測(cè)定。以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，色譜峰面積為縱坐標(biāo)，得三聚氰酸的檢出限為0.1 mg／L，線性方程為Y=56.12X +11.63，線性范圍為0.5～50 mg／L，相關(guān)系數(shù)為0.999 4。結(jié)果表明三聚氰酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍寬、檢出限低，可以滿足定量分析的要求。

2.4 精密度與回收率

將適量三聚氰酸標(biāo)品與三聚氰胺樹脂混勻，使得混勻后的三聚氰酸含量為0.1%。將混勻后的樹脂原料壓制成密胺餐盤，作為陽性樣品備測(cè)。將密胺餐盤破碎成粒徑小于0.2 mm的顆粒與樹脂原料混合后按本方法進(jìn)行提取和測(cè)定，同時(shí)對(duì)未添加樣品進(jìn)行空白測(cè)試。重復(fù)試驗(yàn)6次，扣除空白平均值，考察方法的精密度和回收率，結(jié)果列于表4。由表4可知，三聚氰酸含量測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為1.36%～2.54%，回收率在80%～93%之間，表明該方法精密度和準(zhǔn)確度良好。

表4 食品接觸材料中三聚氰酸單體殘留量回收率

2.5 殘留量與遷移量的關(guān)系

將不同量的三聚氰酸標(biāo)準(zhǔn)品與三聚氰胺樹脂混勻，使得混勻后三聚氰酸含量分別為0.1%和0.2%。將混勻后的樹脂原料分別壓制成10只密胺餐盤。將樹脂原料按本研究所建立的方法進(jìn)行提取和殘留量測(cè)定，同時(shí)將壓制成型的密胺餐盤用于三聚氰酸遷移量測(cè)定（食品模擬物為10%乙醇溶液，浸泡溫度為70℃，浸泡時(shí)間為4 h），結(jié)果見圖2。

圖2 原料中三聚氰酸殘留量與其成型品中三聚氰酸遷移量的對(duì)應(yīng)關(guān)系

由圖2可知，三聚氰酸遷移量隨著原料中殘留量的增大而增大，呈現(xiàn)正相關(guān)關(guān)系，因此可以認(rèn)為質(zhì)控原料三聚氰酸殘留量是降低成型品三聚氰酸遷移量、提升產(chǎn)品品質(zhì)的有效途徑。

3 結(jié)語

建立了用液相色譜技術(shù)檢測(cè)食品接觸材料中三聚氰酸殘留量的方法，該方法靈敏度好，檢出限低，適用線性范圍廣，前處理簡(jiǎn)單，揭示了原料三聚氰酸殘留量與成型品三聚氰酸遷移量的正相關(guān)關(guān)系，滿足我國(guó)對(duì)食品接觸材料中污染物殘留監(jiān)控和檢測(cè)的要求。

［1］陳旻實(shí)，井偉，呂水源，等.高效液相色譜法檢測(cè)食品接觸產(chǎn)品中三聚氰胺及其衍生物的遷移量［J］.分析化學(xué)，2011，39(10): 1 572-1 576.

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