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    甲胎蛋白異質(zhì)體3、高爾基體蛋白73及熱休克蛋白27在原發(fā)性肝癌中的診斷價(jià)值

    2013-12-09 00:27:42黃琳淋李光迪
    中外醫(yī)療 2013年13期
    關(guān)鍵詞:高爾基體甲胎蛋白異質(zhì)

    黃琳淋 李光迪

    蘭州大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院,甘肅蘭州 730030

    原發(fā)性肝癌(primary liver cancer)是我國常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤,由于起病隱匿,發(fā)展迅速,確診時(shí)多數(shù)患者已經(jīng)處于癌癥晚期,治療效果不佳,死亡率高,每年有100 萬肝癌新患者,有11萬人死于肝癌,其全球發(fā)病率和死亡率分別列所有腫瘤的第5位和第3位[1],發(fā)病率最高的國家大多在亞洲,其次在非洲等欠發(fā)達(dá)國家,大洋洲國家較低,美洲國家最低,且男性發(fā)病率高于女性,在我國,根據(jù)全國三次死亡回顧調(diào)查結(jié)果(1973-1975年;1990-1992年;2004-2005年) 肝癌在全部惡性腫瘤中的死亡順位分別為第3位、第2位、第2位,而農(nóng)村地區(qū)發(fā)病率高于城市地區(qū)[2],東南高于西北、華北和西南地區(qū),東南沿海高于內(nèi)陸[1],嚴(yán)重威脅了人們的健康。目前除了影像學(xué)檢查外,肝癌的診斷和篩查主要依靠甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP),根據(jù)《2011年原發(fā)性肝癌診療規(guī)范》:對于AFP≥400 ug/L 超過1個(gè)月,或是≥200 ug/L持續(xù)2個(gè)月,排除妊娠、生殖腺胚胎癌和活動性肝病,就高度懷疑肝癌。但是AFP 對診斷肝癌的敏感性不高,只有30%~60%[3],且在其他一些腫瘤患者中也有發(fā)現(xiàn)AFP 異常增高。因此,AFP 對于診斷原發(fā)性肝癌的應(yīng)用十分受限。近年來,有學(xué)者通過大量的電泳實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),原發(fā)性肝癌血清中都存在高爾基體蛋白73(GP73)、甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)及熱休克蛋白27(HSP27),該研究通過定量檢測原發(fā)性肝癌、肝轉(zhuǎn)移癌、胃癌中三種蛋白的表達(dá)情況,并與甲胎蛋白做對比,為探討它們在原發(fā)性肝癌中的診斷價(jià)值,現(xiàn)對甘肅省蘭州大學(xué)第二醫(yī)院2011年10月—2012年5月住院患者及健康體檢者進(jìn)行回顧性分析,報(bào)道如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    該研究共收集血清標(biāo)本98例,來自甘肅省蘭州大學(xué)第二醫(yī)院2011年10月—2012年5月住院患者及健康體檢者,男60例,女38例,年齡24~77歲,中位數(shù)為52.5歲,其中原發(fā)性肝癌36例,肝轉(zhuǎn)移癌14例,胃癌20例,健康對照28例。原發(fā)性肝癌、肝轉(zhuǎn)移癌、胃癌患者均為治療前抽血,健康對照組排除了肝炎患者,肝功、腎功異常者。疾病診斷符合2011版“原發(fā)性肝癌診療規(guī)范”。

    1.2 主要試劑及儀器

    GP73 酶聯(lián)免疫試劑盒,AFP-L3 酶聯(lián)免疫試劑盒,HSP27 酶聯(lián)免疫試劑盒;model AT-858型自動酶標(biāo)分析儀;Roche cobas 6 000 電化學(xué)發(fā)光儀。

    1.3 實(shí)驗(yàn)方法

    1.3.1 標(biāo)本采集 抽取待測者清晨空腹靜脈血3 mL,室溫靜置2h,3 500 r/min,離心10 min。分離血清置-50 ℃冰箱保存。

    1.3.2 GP74、AFP-L3、HSP27 測定 采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定,嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。

    1.3.3 AFP 測定 采用Roche 發(fā)光試劑上機(jī)(Roche 2010 化學(xué)發(fā)光)定量檢測。

    1.4 統(tǒng)計(jì)方法

    采用SPSS 17.0 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。多組血清標(biāo)本檢測呈偏態(tài)分布,用中位數(shù)(95%參考范圍)表示,多組間比較采用Kruskal-Wallis 檢驗(yàn),兩兩比較采用Mann-Whitney 檢驗(yàn)。

    圖1 AFP-L3 在各組中的表達(dá)情況

    2 結(jié)果

    2.1 各組血清標(biāo)本AFP-L3、GP73、HSP27 的檢測結(jié)果及比較

    2.1.1 各組的檢測結(jié)果 肝癌組、肝轉(zhuǎn)移癌組、胃癌組、正常對照組血清標(biāo)本AFP、AFP-L3、HSP27、GP73 的表達(dá)水平(中位數(shù)及95%參考范圍),見表1。

    2.1.2 各組間數(shù)據(jù)的總體比較 總體比較經(jīng)Kruskal-Wallis 檢驗(yàn)顯示,原發(fā)性肝癌組、肝轉(zhuǎn)移癌組、胃癌組、對照組間AFP-L3、HSP27、GP73 三種蛋白含量不全相同,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05(Chi-Square值:AFP-L3:62.862;HSP27:64.367;GP73:62.462);原發(fā)性肝癌組的三種蛋白平均秩次明顯高于其他組。見圖1,2,3。

    圖2 HSP27 在各組中的表達(dá)情況

    圖3 GP73 在各組中的表達(dá)情況

    表1 三種蛋白在各組標(biāo)本中的表達(dá)水平

    2.1.3 Mann-Whitney 檢驗(yàn)兩兩比較 原發(fā)性肝癌組中AFPL3、HSP27、GP73 分別與其他三組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,結(jié)果如下,AFP-L3(U=3,Z=-5.38,P<0.05;U:48,Z=5.335,P<0.05;U=0,Z=-6.821,P<0.05),HSP27 (U=4,Z=-5.359,P<0.05;U=29,Z=-5.660,P<0.05;U=0,Z=-6.821,P<0.05),GP73 (U=4,Z=-5.359,P<0.05;U=45,Z=-5.386,P<0.05;U:0,Z=-6.821,P<0.05)。肝轉(zhuǎn)移癌組、胃癌組及正常對照各組間比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

    2.2 AFP-L3、GP73、HSP27 在原發(fā)性肝癌中的診斷價(jià)值

    以各組三種蛋白水平繪制受試者工作特征曲線(receiver operating characteristic curve,ROC 曲線)。AFP-L3 診斷原發(fā)性肝癌的曲線下面積為0.977,HSP27 診斷原發(fā)性肝癌的曲線下面積為0.985,GP73 診斷原發(fā)性肝癌的曲線下面積為0.978。AFP 在臨界值為400 ng/mL時(shí),診斷原發(fā)性肝癌的靈敏度為66.7%,特異度為96.7%。

    2.3 AFP-L3、HSP27、GP73 與AFP 間的相關(guān)性分析

    實(shí)驗(yàn)時(shí)發(fā)現(xiàn)AFP-L3、HSP27、GP73 三種蛋白顏色的深淺與AFP的含量有明顯關(guān)系,為驗(yàn)證是否具有相關(guān)性,采用Spearman檢驗(yàn),AFP 與AFP-L3、HSP27、GP73 的相關(guān)水平分別為:0.896、0.853、0.838,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

    2.4 AFP-L3、HSP27、GP73 與乙肝表面抗原的相關(guān)性分析

    原發(fā)性肝癌患者乙肝表面抗原表達(dá)情況為26例表面抗原陽性患者,10例表面抗原陰性患者,采用Spearman 檢驗(yàn),乙肝表面抗原(HBV-SAg)與AFP-L3、HSP27、GP73 的相關(guān)水平(r)分別為:0.119、0.176、0.176,雙側(cè)檢驗(yàn)P值分別0.488、0.304、0.304,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

    3 討論

    當(dāng)前,診斷原發(fā)性肝癌的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)主要依靠甲胎蛋白(AFP),但其靈敏度、特異度有限,學(xué)者們通過各種方法尋找原發(fā)性肝癌的特異指標(biāo),其中甲胎蛋白異質(zhì)體(AFP-L3)、高爾基體蛋白73(GP73)、熱休克蛋白27(HSP27)是近年來的研究熱點(diǎn)。

    根據(jù)AFP 分子存在糖鏈異質(zhì)性,通過凝集素親和電泳可把AFP 異質(zhì)體分成3個(gè)條帶,依據(jù)電泳遷移率大小,依次命名為AFP-L1、AFP-L2、AFP-L3。AFP-L1 在良性肝病中占主要部分;AFP-L2 來自孕婦;AFP-L3 是由肝癌細(xì)胞產(chǎn)生[4],因此AFP-L3的診斷靈敏度和特異度都應(yīng)高于AFP。高爾基體蛋白73(GP73)是美國學(xué)者Kladney 發(fā)現(xiàn)的一種新的跨膜糖蛋白,在正常肝臟中,GP73 主要是在匯管區(qū)的膽管上皮細(xì)胞中表達(dá),在其他肝細(xì)胞中不表達(dá)表達(dá)或是表達(dá)微弱[5]。有學(xué)者[6]分析肝癌患者血清中GP73 的靈敏度和特異度,都明顯好于AFP,在肝轉(zhuǎn)移癌組中尤為明顯。趙建忠[7]等應(yīng)用酶聯(lián)免疫試劑盒檢測GP73,研究發(fā)現(xiàn),與AFP-L3 相比,原發(fā)性肝癌組具有更高的GP73 陽性率,而在肝硬化和肝炎組中GP73 的陽性率低于AFP-L3,因此血清中GP73 含量可能是比AFP-L3 更好的一個(gè)分子標(biāo)志物。熱休克蛋白27(HSP27)是低分子量熱休克蛋白家族成員,與藥物的抗性,細(xì)胞生長、凋亡,腫瘤的發(fā)生,轉(zhuǎn)移等功能密切相關(guān)的蛋白質(zhì),保護(hù)細(xì)胞免受應(yīng)激損傷,參與細(xì)胞增殖分化,抑制細(xì)胞凋亡,參與癌癥的發(fā)生,在細(xì)胞凋亡時(shí)表達(dá)增加等,與腫瘤的惡性程度及預(yù)后有關(guān)[8-10]。Feng 等[11]結(jié)合了2-DE 和MALDI-TOF-MS/MS,分析了正常人、乙肝患者、HCC患者,鑒定出了8種差異蛋白,包括甲胎蛋白、熱休克蛋白27、叢生蛋白等,通過進(jìn)步一蛋白免疫印跡驗(yàn)證,HSP27 存在于90%HCC 中。

    該研究結(jié)果顯示,AFP-L3、GP73、HSP27 在原發(fā)性肝癌中表達(dá)明顯高于肝轉(zhuǎn)移癌組、胃癌組及正常對照組,為評價(jià)三種蛋白對原發(fā)性肝癌的診斷價(jià)值,特做了ROC 曲線,HSP27 的曲線下面積最大。與甲胎蛋白相比,三種蛋白的診斷價(jià)值優(yōu)于甲胎蛋白。由于只選擇了腫瘤標(biāo)本,未選擇活動性肝炎、生殖系統(tǒng)腫瘤等AFP 出現(xiàn)假陽性的標(biāo)本,引起本試驗(yàn)特異度較高。該研究提示,AFP-L3、GP73、HSP27 與AFP 存在明顯的相關(guān)性,與某些研究不一致[12],這可能與實(shí)驗(yàn)方法有關(guān),這有待進(jìn)一步的研究證實(shí)。其次,AFP-L3、GP73、HSP27 與乙肝表面抗原無明顯相關(guān),即是患者否患有乙肝對三種蛋白的原發(fā)性肝癌的診斷無明顯影響。

    總之,甲胎蛋白異質(zhì)體、高爾基體蛋白73、熱休克蛋白27 是診斷原發(fā)性肝癌的優(yōu)秀的候選血清標(biāo)志物,陽性率高,特異性好,操作簡單易行,在診斷原發(fā)性肝癌中具有較大的應(yīng)用價(jià)值,研究前景廣闊。

    [1]葉家才.原發(fā)性肝癌的流行病學(xué)特征及其危險(xiǎn)因素[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2008,24(10):1839-1841.

    [2]陳建國.中國肝癌發(fā)病趨勢和一級預(yù)防[J].臨床肝膽病雜志,2012(4):22-26.

    [3]Uto,H.,S.Kanmura,Y.Takami,et al.Clinical proteomics for liver disease:a promising approach for discovery of novel biomarkers[J].Proteome Science,2010(8):51-54.

    [4]Li,D,T.Mallory,S.Satomura.AFP-L3:a new generation of tumor marker for hepatocellular carcinoma[J].Clin Chim Acta,2001,313(1-2):15-19.

    [5]顧劍鋒,李明峰,顧樹南.GP73 與肝癌關(guān)系的研究進(jìn)展[J].肝膽胰外科雜志,2011(20):54-57.

    [6]付超,齊軍,李學(xué)祥,等.高爾基體蛋白73(GP73)檢測在肝細(xì)胞癌中的應(yīng)用價(jià)值[J].中國腫瘤,2010(8):66-69.

    [7]趙建忠,李智山,許東強(qiáng),等.甲胎蛋白異質(zhì)體3 和高爾基體蛋白73 檢測在原發(fā)性肝癌診斷中的臨床意義[J].中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2011(9):106-108.

    [8]王金龍,胡樹珍,潘東曉,等.血清HSP27 在原發(fā)性肝細(xì)胞癌早期診斷中的應(yīng)用[J].解剖學(xué)研究,2011(3):38-41,51.

    [9]武凱,張生彬,敖利.熱休克蛋白HSP-27 在肝癌中作用機(jī)制的研究進(jìn)展[J].內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)雜志,2010(12):27.

    [10]Romani,A.A,P.Crafa,S.Desenzani,et al.The expression of HSP27 is associated with poor clinical outcome in intrahepatic cholangiocarcinoma[J].BMC Cancer,2007(7):232.

    [11]Feng,J T,Y K.Liu,H Y.Song,et al.Heat-shock protein 27:a potential biomarker for hepatocellular carcinoma identified by serum proteome analysis.[J].Proteomics,2005,5(17):4581-4588.

    [12]王壽明,高蕾,于樂成,等.甲胎蛋白異質(zhì)體對肝癌診斷及療效評估價(jià)值研究進(jìn)展.[J].實(shí)用肝臟病雜志,2011(6):84-86.

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