臨床血液檢驗(yàn)中的兩種不同細(xì)菌鑒定法應(yīng)用分析

李祖新

廣西來(lái)賓市象州縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣西來(lái)賓 545800

臨床中濫用抗生素， 常引起不同細(xì)菌的耐藥性和藥物敏感性改變，給臨床檢驗(yàn)帶來(lái)不同程度的難度。 同時(shí)由于不同細(xì)菌的菌株對(duì)抗生素的敏感性存在差異， 因此采用恰當(dāng)?shù)募?xì)菌鑒定法對(duì)臨床診斷治療具有積極意義， 藥敏試驗(yàn)中以檢測(cè)患者的血液樣本中的細(xì)菌對(duì)藥物的敏感性來(lái)準(zhǔn)確鑒定細(xì)菌類型[1]。 為此該文將對(duì)2010年3月—2012年3月期間該院門診及住院發(fā)燒并全身感染患者700 份陽(yáng)性血液樣品進(jìn)行鑒定，其宗旨是為了觀察直接藥敏試驗(yàn)在臨床血液檢驗(yàn)中的應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇該院門診及住院患者700 例， 所有患者均發(fā)燒并全身感染。 在患者周身發(fā)熱初期或高峰期采集700 份陽(yáng)性血液標(biāo)本，所有患者均采集一次，20 mL/人。將血液樣品冷藏保存，送至檢驗(yàn)科。所有采集者入院前48 h 內(nèi)未給予其他藥物及相關(guān)治療，排除血液系統(tǒng)及凝血功能障礙患者。

1.2 方法

將700 份血液樣本，分別采用直接藥敏試驗(yàn)和常規(guī)藥敏試驗(yàn)檢測(cè)，對(duì)比兩種檢測(cè)方法細(xì)菌鑒定及藥敏符合率。

1.2.1 直接藥敏試驗(yàn) 將血液樣本置入Bactec9240 系統(tǒng)自動(dòng)培養(yǎng)檢測(cè)，若系統(tǒng)提示檢測(cè)出陽(yáng)性時(shí)，立即收集10 mL 陽(yáng)性樣本注入無(wú)菌試管中，隨即對(duì)陽(yáng)性樣本進(jìn)行密度梯度離心分離。1 500 r/min離心5 min 后，去除上清液，再3 000 r/min 離心15 min，采用無(wú)菌生理鹽水洗滌2 次后重懸取沉淀。給予革蘭染色鏡檢。若為一般菌種（排除真菌）可接種于MH 平板，應(yīng)用無(wú)菌拭子均勻涂抹，貼上藥敏紙片，采用2005NCCLS 的診斷標(biāo)準(zhǔn)觀察耐藥性及藥物中度敏感、敏感度。 若檢測(cè)出革蘭陽(yáng)性球菌（G+球菌）呈鏈狀，應(yīng)給予MH+5%羊血平板初檢， 根據(jù)鏡檢報(bào)告選擇合適的氧化酶。調(diào)整菌液濃度為6.8×108 cfu/L 后接種于NC21 板上，進(jìn)行細(xì)菌鑒定和藥敏檢測(cè)[2]。

1.2.2 常規(guī)檢測(cè) 將采集的血液樣本分別接種于血平板、 巧克力平板、麥康凱平板，37 ℃恒溫下孵育20～24 h，對(duì)生長(zhǎng)菌落涂片革蘭染色經(jīng)驗(yàn)，并選擇適當(dāng)?shù)难趸浮?根據(jù)Walkaway40 系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)菌鑒定和藥敏試驗(yàn)[3]。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS13.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料采用百分率（%）表示，計(jì)量資料采用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 兩種方法細(xì)菌鑒定結(jié)果

700 份血液標(biāo)本中，共檢測(cè)出427 份陽(yáng)性血液樣本，G-桿菌349份，G+球菌78 份，直接發(fā)鑒定出，G-桿菌299 份，G+球菌60份，一致率分別為85.7%和76.9%，兩組不同細(xì)菌鑒定方法的總一致率為84.1%。 見表1。

表1 兩種方法細(xì)菌鑒定結(jié)果

2.2 兩種檢測(cè)方法藥物敏感度符合率對(duì)比

兩種檢測(cè)方法藥物耐藥、中度敏感及敏感度的符合率無(wú)明顯，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。 見表2。

表2 兩種檢測(cè)方法藥物敏感度符合率對(duì)比

3 討論

隨著抗生藥的濫用，常導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性增強(qiáng)，而誘發(fā)全身感染等疾病，常影響治療效果和生存質(zhì)量[4-5]。 為此通過(guò)有效的檢測(cè)有助于臨床合理用藥，臨床檢測(cè)中，常采用藥敏試驗(yàn)應(yīng)用于血液檢驗(yàn)，但藥敏檢測(cè)方法較多[6-7]。 常規(guī)檢測(cè)陽(yáng)性血液樣本，細(xì)菌鑒定和藥敏試驗(yàn)速度較慢，常影響臨床正確給藥[8]。 該研究中，采用Bactec9240 系統(tǒng)自動(dòng)培養(yǎng)檢測(cè)進(jìn)行直接藥敏試驗(yàn)。

直接藥敏試驗(yàn)將血液標(biāo)本直接接種于平板上， 貼上抗生素紙片，置于37℃恒溫孵育后，根據(jù)抑菌環(huán)的大小，進(jìn)行藥敏試驗(yàn)鑒定[9]。 該方法與常規(guī)方法相比，因省略了分離培養(yǎng)的步驟，更快捷、簡(jiǎn)單地初步報(bào)告藥敏試驗(yàn)結(jié)果，為臨床給藥提供依據(jù)[10-11]。

該研究結(jié)果顯示，700 份血液標(biāo)本中，共檢測(cè)出427 份陽(yáng)性血液樣本，對(duì)G-桿菌和G+球菌分別給予常規(guī)和直接兩種不同細(xì)菌鑒定方法鑒定，其總一致率為84.1%。 結(jié)果顯示采用直接法進(jìn)行血液檢驗(yàn)，其藥敏性好，能夠有效檢測(cè)鑒定對(duì)G-桿菌和G+球菌。 與其他文獻(xiàn)報(bào)道相符[12-13]。 對(duì)陽(yáng)性血液樣本進(jìn)行藥敏檢驗(yàn)中，兩種檢測(cè)方法藥物耐藥、中度敏感及敏感度的符合率，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)果提示采用直接法與常規(guī)方法進(jìn)行抗菌藥物敏感度菌無(wú)明顯差異， 可以通過(guò)Bactec9240 系統(tǒng)自動(dòng)培養(yǎng)檢測(cè)代替?zhèn)鹘y(tǒng)常規(guī)的檢測(cè)方法， 而且這種方法檢測(cè)時(shí)間短， 有效節(jié)約等待藥檢出結(jié)果的時(shí)間，能快速將結(jié)果報(bào)告給醫(yī)生，對(duì)合理指導(dǎo)臨床用藥具有積極意義[14-15]。

[1] 黎海東，謝文銳.細(xì)菌鑒定在臨床血液檢驗(yàn)中的應(yīng)用[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2007，10(5)：258.

[2] 鄧賓，張?zhí)N麗.細(xì)菌數(shù)值鑒定法及鑒定系統(tǒng)的發(fā)展[J].中國(guó)醫(yī)療設(shè)備，2011，26(3)：144.

[3] 蔣冬香，陳剛，高玲，等.重癥監(jiān)護(hù)病房病原菌分布與耐藥性分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2010，13（10）：201.

[4] 趙蘇瑛，李岷，李克涓.1320 例血培養(yǎng)結(jié)果分析[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2010，5（10）：263.

[5] 趙碩，朱以軍，單小云，等.576 株血液分離病原菌的分布及耐藥性分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2011，9（14）：218.

[6] 肖影，張健.血液感染的病原菌分布及耐藥性分析[J].西南國(guó)防醫(yī)藥，2007，4（6）：366.

[7] 黃東紅，林貴良，黃玉婷.4283 份血培養(yǎng)結(jié)果的細(xì)菌學(xué)分布及耐藥性分析[J].海南醫(yī)學(xué)，2009，7（5）：269.

[8] 曹敏華.2659 份血培養(yǎng)中病原菌的分布及耐藥性[J].海南醫(yī)學(xué)，2012，8（12）：264.

[9] 黃晶，張曼，許建成，等.兒科院內(nèi)感染常見致病菌及耐藥性監(jiān)測(cè)結(jié)果分析[J].中國(guó)婦幼保健，2007，11（10）：253.

[10] 彭代智，劉小玲，劉智勇，等.燒傷患者2748 株病原菌分布特點(diǎn)及耐藥性分析[J].中華燒傷雜志，2012，2（6）：288.

[11] 鄧賓，張?zhí)N麗.細(xì)菌數(shù)值鑒定法及鑒定系統(tǒng)的發(fā)展[J].中國(guó)醫(yī)療設(shè)備，2011，26(3)：368.

[12] 任光進(jìn)，虎風(fēng)俠.切口感染23 例的病原菌分布及藥物敏感試驗(yàn)分析[J].中國(guó)社區(qū)醫(yī)師(醫(yī)學(xué)專業(yè))，2009，2(23)：136.

[13] 崔艷芳，朱敏，劉瑾.常見革蘭陰性菌耐藥性變遷臨床分析同濟(jì)大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版）[J].2010，4(3)：298.

[14] 沈建箴，呂聯(lián)煌，佘菲菲.血液病念珠菌感染基因擴(kuò)增檢測(cè)技術(shù)建立及臨床應(yīng)用[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2009，12(10)：236.

[15] 柳振華.全自動(dòng)細(xì)菌分析系統(tǒng)在檢測(cè)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶細(xì)菌中的臨床應(yīng)用[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2010，7(23)：210.