三種梅毒血清學(xué)檢驗方法在臨床中的應(yīng)用

歐慧

梅毒是由梅毒螺旋體（treponema pallidum，TP）的病毒引起的一種慢性全身性性傳播疾病。近年來，梅毒在全球范圍內(nèi)的發(fā)病率逐年上升，且有不斷蔓延的趨勢[1]。蒼白密螺旋體感染機體后可產(chǎn)生兩種抗體[2]，即抗梅毒螺旋特異性抗體及非特異性抗體。目前臨床常用血清學(xué)檢測方法較多，為篩選有效的檢測試劑，現(xiàn)對酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）、甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST）、梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗（TPPA）3種不同的血清學(xué)檢測方法在梅毒診斷中的結(jié)果進(jìn)行分析，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 標(biāo)本來源于2011年12月-2012年12月的職業(yè)健康體檢10 286例，臨床常規(guī)ELISA梅毒篩選病例，其中S/CO>1陽性標(biāo)本675例。年齡18～73歲，平均51歲；男310例，女365例。

1.2 儀器與試劑 儀器采用全自動酶免疫分析儀（奧地利tecan），電熱恒溫水浴箱，梅毒旋轉(zhuǎn)震蕩器。TRUST試劑盒由上海榮盛生物有限公司提供；ELISA試劑盒由北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司提供；TPPA試劑盒為日本富士瑞必歐株式會社生產(chǎn)。上述試劑均為合格產(chǎn)品，并在有效期內(nèi)使用。

1.3 方法 所有標(biāo)本采用ELISA檢測法進(jìn)行梅毒篩查，陽性者再采用TPPA檢測法確診，并檢測TRUST（血清作原倍、1：2、1：4、1：8稀釋），判定結(jié)果肉眼清晰可見并作詳細(xì)記錄。TRUST、ELISA、TPPA 檢測的操作和結(jié)果判定均按照試劑盒說明書嚴(yán)格進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 ELISA法檢出陽性標(biāo)本675例中，經(jīng)TPPA確證陽性657例，陽性符合率97.33%。TRUST法檢出陽性424例，均經(jīng)TPPA確證陽性，而251例TRUST陰性中，TPPA確證試驗陽性233例，18例陰性。而對于ELISA篩查陽性而TRUST陰性的標(biāo)本有7.17%（18/251）的假陽性結(jié)果，見表1。

表1 ELISA法檢出陽性標(biāo)本TPPA和TRUST檢測結(jié)果 例

2.2 ELISA法是否存在假陰性結(jié)果研究 筆者對ELISA法篩查疑似標(biāo)本（S/CO在0.70～0.99）58例做TPPA和TRUST檢測，結(jié)果TRUST均為陰性，而TPPA陽性15例，見表2。

表2 ELISA法檢出疑似標(biāo)本的TPPA和TRUST檢測結(jié)果 例

3 討論

ELISA法常用于大量樣品的篩查及臨床診斷[3]。其特異性和靈敏度高達(dá)100%和99.5%[4]，且檢測方法快速簡便，影響因素少，由于采用自動化的操作和檢測方法，所以可以對大批量的樣品進(jìn)行分析處理，結(jié)果客觀準(zhǔn)確。明膠凝集試驗TPPA其優(yōu)點在于靈敏度高，特異性好，不受生物因素影響，而且能測定抗體的效價。但價格昂貴，且需主觀判斷結(jié)果，主觀性較高，因而限制了其在醫(yī)院的廣泛應(yīng)用。TRUST簡單快速，結(jié)果清晰易辨，穩(wěn)定性相對較好，但會出現(xiàn)假陽性，故應(yīng)結(jié)合其他檢測方法同時進(jìn)行檢測，只有兩種檢測方法同時檢測為陰性，方能確認(rèn)沒有感染梅毒[5]。

本研究結(jié)果顯示ELISA法和TRUST同時陽性的標(biāo)本424例，經(jīng)TPPA確證均為陽性，符合率為100%，這說明ELISA篩查陽性標(biāo)本，并TRUST檢出陽性，可報告梅毒抗體確認(rèn)試驗陽性。另外本研究結(jié)果也顯示ELISA法篩查陽性而TRUST檢出陰性的標(biāo)本有7.17%的假陽性結(jié)果。因此，如果ELISA篩查陽性，而TRUST檢出陰性標(biāo)本，進(jìn)一步做TPPA確證，對排除假陽性是非常必要的。

對血清中極低濃度的抗體檢測，ELISA要先于TPPA[6]。但本組ELISA 58例疑似病例TPPA檢出15例陽性，分析病例組成和試劑質(zhì)量的差異是造成各種試劑敏感性和特異性文獻(xiàn)報道不一的原因[7-9]。由于兩者敏感性的差異，作TPPA確證對于部分隱性或潛伏期梅毒患者的檢測，具有重要臨床意義。因此對于ELISA篩查S/CO值0.70～0.99的臨床梅毒疑似病例，應(yīng)作TPPA確認(rèn)試驗。

綜上所述，TPPA準(zhǔn)確可靠，但由于成本較高，結(jié)果難以自動化，是目前公認(rèn)的梅毒血清學(xué)確證試驗[10]；ELISA操作簡便，靈敏度高、特異性好，結(jié)果判斷客觀準(zhǔn)確，自動化程度高等優(yōu)點，可作為大批量標(biāo)本篩查的首選方法；而TRUST檢測一期梅毒靈敏度較高，可指導(dǎo)臨床治療[3]，如果TRUST陰性，應(yīng)進(jìn)一步作TPPA確證，若TPPA陰性，報告TPPA確證陰性，若TPPA陽性，則報告TRUST陰性和TPPA陽性。筆者建議3種檢測方法結(jié)合應(yīng)用能更有效提高梅毒臨床診斷符合率，對及早診斷臨床梅毒和指導(dǎo)治療、控制梅毒蔓延有重要臨床意義。

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