肝素抗凝血漿用于急診生化檢驗(yàn)的可行性分析

陳明坤

在傳統(tǒng)的血清標(biāo)本分離方法中，分離速度緩慢嚴(yán)重延長(zhǎng)了檢驗(yàn)報(bào)告，尤其是急診檢驗(yàn)報(bào)告的發(fā)出時(shí)間，對(duì)患者的治療造成了阻礙[1]。另外，利用傳統(tǒng)方法制備的血清中常常遺留下纖維蛋白凝絲等雜質(zhì)，在接下來的檢驗(yàn)中，會(huì)對(duì)檢驗(yàn)的器械造成損傷，在管道比較狹窄的器械中造成堵塞。同時(shí)，利用常規(guī)方法對(duì)血液進(jìn)行分離，需要很高的操作技巧，一個(gè)小的失誤就會(huì)對(duì)血液成分造成破壞，從而延長(zhǎng)分離時(shí)間，不能滿足臨床對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的需要。為了避免傳統(tǒng)方法對(duì)血液檢驗(yàn)造成的不便，提升檢驗(yàn)速度，筆者所在科室采用肝素鈉抗凝血漿作為常規(guī)生化指標(biāo)檢測(cè)，整個(gè)過程花費(fèi)時(shí)間明顯縮短，檢驗(yàn)結(jié)果的誤差比常規(guī)方法更小[2-3]。為了對(duì)肝素抗凝血漿應(yīng)用于急診生化檢驗(yàn)的實(shí)用性和使用方法進(jìn)行探討，本科室在近期隨機(jī)抽取了120例患者進(jìn)行急診生化項(xiàng)目檢查，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 進(jìn)行本次實(shí)驗(yàn)的患者均是從本院近期所收治的患者中隨機(jī)抽取的，共120例，其中，男64例，年齡14～58歲，平均29.6歲，女56例，年齡16～63歲，平均32.1歲。在本次實(shí)驗(yàn)中，所用儀器為貝克曼DXC800。

1.2 方法 隨機(jī)抽取120例患者的血清和肝素抗凝血漿進(jìn)行10項(xiàng)急診生化項(xiàng)目測(cè)定。在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)過程中，應(yīng)該保障患者正常的生理狀態(tài)。空腹抽取患者靜脈血于真空肝素抗凝管和真空普通管各3.0 ml。將真空抗凝管的血液輕輕上下翻轉(zhuǎn)使得肝素鈉與血液混合均勻，便于肝素鈉發(fā)揮血液抗凝作用，進(jìn)行離心，離心速度3000 r/min，時(shí)間15 min，將血漿分離，實(shí)驗(yàn)備用。普通管放置在室溫下進(jìn)行血液自行凝固，然后在37 ℃恒溫箱中水浴15～30 min，應(yīng)特別注意血液在恒溫箱中的保管，進(jìn)行離心，離心速度和時(shí)間同真空抗凝管，將血清分離，實(shí)驗(yàn)備用。除去檢驗(yàn)過程中無法使用的實(shí)驗(yàn)標(biāo)本（脂血、溶血和黃疸等），在相同條件下進(jìn)行測(cè)定。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 13.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以（±s）表示，采用配對(duì)資料t檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

在檢驗(yàn)結(jié)果中，血清和血漿中所檢驗(yàn)的K+、Na+以及Glu的測(cè)定結(jié)果比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。而鉀（K+）的檢驗(yàn)中差異更為顯著（P<0.01）。其他幾個(gè)檢驗(yàn)項(xiàng)之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。根據(jù)血鉀濃度的比較，血清鉀平均濃度為（Y）0.5 mmol/L，高于血漿鉀平均濃度（X），回歸方程為Y=0.715X+0.499，r=0.749。這就說明，在利用肝素鈉進(jìn)行抗凝的真空管中的血液更適合于分離操作，方便血漿10項(xiàng)急診生化項(xiàng)目的檢驗(yàn)。詳見表1。

組別 K+（mmol/L） Na+（mmol/L） Cl-（mmol/L） Ca2+（mmol/L） Mg2+（mmol/L） Glu（mmol/L） Bun（mmol/L）血清組 4.09±0.32 134.5±3.2 102±2.3 2.2±0.11 0.801±0.052 4.66±1.29 3.88±1.33血漿組 3.77±0.33 138.9±3.3 103±2.6 2.19±0.23 0.812±0.065 5.33±1.36 3.86±1.16 P值 0.039 0.008 0.975 0.974 0.79 0.044 0.057

續(xù)表1

3 討論

患者的病情是不斷發(fā)展的，對(duì)于患者來說，擁有更多的治療時(shí)間無疑是獲得了更多的機(jī)會(huì)，只有在充足的治療時(shí)間中，才能使得急診患者搶救成功，提高搶救的成功率，降低醫(yī)療事故的發(fā)生。在臨床的治療中，快速準(zhǔn)確無疑是診斷工作的最基本的要求，是醫(yī)務(wù)人員挽救生命的關(guān)鍵因素。而快捷準(zhǔn)確的生化檢驗(yàn)工作在很大程度上影響著診斷工作的進(jìn)展，所以說，實(shí)現(xiàn)生化檢驗(yàn)工作的準(zhǔn)確迅速具有重要的意義[4]。近些年來，隨著患者人數(shù)的不斷上升，加快急診生化檢驗(yàn)報(bào)告的生成速度無疑成為了提高醫(yī)院經(jīng)濟(jì)效益的重要手段之一。對(duì)于患者血液的急診生化檢驗(yàn)而言，根據(jù)常規(guī)的檢驗(yàn)方法，耗時(shí)耗力，延長(zhǎng)了患者的病患時(shí)間，將肝素應(yīng)用于血液生化檢驗(yàn)之中，不僅大幅度降低了急診生化檢驗(yàn)所耗費(fèi)的時(shí)間，還為診斷和救治工作的進(jìn)行提供了更為可靠的診斷報(bào)告，實(shí)現(xiàn)了急診救治過程中死亡率的降低[5-6]。

肝素具有多方面的抗凝作用，是一種分子量較大的粘多糖，含有硫酸基團(tuán)，自身帶多個(gè)負(fù)電荷。對(duì)于血液抗凝的作用機(jī)制主要是對(duì)血液中的凝血活酶及凝血酶的形成和活性進(jìn)行抑制，阻礙血液中的血小板聚集，從而達(dá)到血液抗凝的作用。具體來說，肝素能夠與血液中的抗凝血酶發(fā)揮協(xié)同作用，在低濃度的環(huán)境下，血液中的IXa、Ⅷ和PF3之間不能發(fā)生有效的相互反應(yīng)。肝素還能進(jìn)一步強(qiáng)化抗凝血酶Ⅲ的抗凝作用，抑制血液中絲氨酸蛋白酶的活性，達(dá)到阻止凝血酶形成的目的[7]。同時(shí)，肝素還具有抑制凝血酶的自我催化的發(fā)生和抑制血液中的X因子的作用。由于肝素能夠在多方面對(duì)血液進(jìn)行抗凝，所以醫(yī)務(wù)人員在進(jìn)行血液生化檢驗(yàn)中，為防止血液發(fā)生凝集影響檢驗(yàn)結(jié)果，故多將肝素加入到將進(jìn)行檢驗(yàn)的血液中，方便檢驗(yàn)操作，縮短時(shí)間。下面本文將對(duì)肝素對(duì)幾項(xiàng)檢驗(yàn)項(xiàng)的作用進(jìn)行深入的研究。

肝素鈉抗凝血漿對(duì)K+檢驗(yàn)結(jié)果的影響，通過表1觀察可知，兩組檢驗(yàn)結(jié)果中的K+濃度差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），產(chǎn)生這種情況的原因主要包括以下幾點(diǎn)：（1）溶血現(xiàn)象的發(fā)生。在利用肝素鈉進(jìn)行血漿的抗凝過程中，發(fā)生了極少量的溶血，而在普通血液標(biāo)本的凝固過程中，血小板的破裂會(huì)釋放出一小部分的K+到血液中，同時(shí)在離心過程中，由于離心機(jī)和離心速度的影響，使得檢驗(yàn)對(duì)象中的部分紅細(xì)胞細(xì)胞膜遭到破壞，存在于細(xì)胞內(nèi)的K+流入血液。（2）K+的滲出。根據(jù)細(xì)胞膜內(nèi)外濃度差的滲透原理，隨著血清分離時(shí)間的延長(zhǎng)，紅細(xì)胞內(nèi)的部分K+會(huì)滲出到紅細(xì)胞外，升高血清中的K+濃度[8-9]。（3）肝素與血液中的K+生成肝素鉀，影響離子電極對(duì)K+的測(cè)定，使血漿K+濃度低于血清K+。

肝素鈉抗凝血漿對(duì)Na+檢驗(yàn)結(jié)果的影響，通過表格數(shù)據(jù)得知，兩組中的Na+含量也存在較大的差異（P<0.05），造成這種結(jié)果的原因主要是由于實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)生了肝素與Na+的結(jié)合，降低了離子電極對(duì)Na+的敏感性，但是在肝素鈉抗凝的血漿中含有較高的Na+，由于肝素的結(jié)合有所降低了Na+在血液中的含量，所以血漿Na+高于血清Na+濃度肝素鈉抗凝血漿對(duì)Glu檢驗(yàn)結(jié)果的影響，根據(jù)表1的檢測(cè)結(jié)果可知，肝素鈉抗凝血漿Glu含量明顯高于血清中Glu含量，造成這種現(xiàn)象發(fā)生的主要原因可能是因?yàn)闄z驗(yàn)對(duì)象在進(jìn)行檢驗(yàn)的過程中，由于檢驗(yàn)時(shí)間過長(zhǎng)，血液中的細(xì)胞需要進(jìn)行自身代謝，導(dǎo)致標(biāo)本中部分Glu作為底物被分解消耗。相比運(yùn)用肝素的抗凝血漿，由于血漿未凝集，分離過程持續(xù)時(shí)間較短，減少了細(xì)胞的代謝時(shí)間，使得Glu消耗量降低。

通過探究發(fā)現(xiàn)，肝素抗凝血漿中的LDH和α-HBD兩種物質(zhì)的含量低于血清組（P<0.05），造成這種情況發(fā)生的原因可能是因?yàn)樵谘哼M(jìn)行凝固和離心的過程中，由于離心機(jī)轉(zhuǎn)速過快和操作的失誤，導(dǎo)致血細(xì)胞在實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)了變形和被擠，細(xì)胞膜破裂，使得細(xì)胞內(nèi)高濃度的LDH釋放進(jìn)入血清中，導(dǎo)致血清中的LDH含量升高，兩組實(shí)驗(yàn)結(jié)果的差異性較大。對(duì)于α-HBD，當(dāng)α-羥基丁酸存在于周圍環(huán)境中，LDH的H亞基則與其發(fā)生反應(yīng)，生成物為α-HBD，隨著血清中的LDH數(shù)目的增多，其在血清中的含量也升高，使得兩組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果存在較大的差異性。

肝素鈉抗凝血漿對(duì)TP和GGT檢驗(yàn)結(jié)果的影響，在兩組實(shí)驗(yàn)結(jié)果中，TP含量也存在一定的差異，原因可能是因?yàn)槔酶嗡剡M(jìn)行抗凝后的血漿同血清比較而言，血漿中的纖維蛋白原的含量有所升高，若此時(shí)通過血漿中TP含量比血清中TP之間的比較，可以更為直接的得到體內(nèi)蛋白質(zhì)的總量。表格中肝素抗凝血漿中的GGT含量明顯低于血清中，這就表明，血漿中GGT的活力明顯高于血清，其在肝素抗凝酶催化下所進(jìn)行的活力變化機(jī)制仍需進(jìn)一步探討。

就目前臨床血清學(xué)應(yīng)用而言，靜脈血清作為生化檢驗(yàn)分析的標(biāo)本而得到了較為普遍的使用，靜脈血清在很大程度上決定著患者血液中各項(xiàng)指標(biāo)的測(cè)定以及臨床診斷依據(jù)。但是，在實(shí)際應(yīng)用過程中，血清的檢測(cè)不一定就代表著正常指標(biāo)的測(cè)定，也有可能因?yàn)闃?biāo)本的污染而影響測(cè)驗(yàn)的結(jié)果。這是因?yàn)檠宸蛛x的過程耗時(shí)較長(zhǎng)，在整個(gè)過程中血細(xì)胞所進(jìn)行的生理代謝和凝固、離心都有可能導(dǎo)致細(xì)胞變形、擠壓和破壞等情況的發(fā)生，這些情況一旦發(fā)生，都會(huì)對(duì)檢測(cè)的部分項(xiàng)目結(jié)果造成影響，并隨著研究時(shí)間的延長(zhǎng)導(dǎo)致結(jié)果差異的拉大。應(yīng)用肝素進(jìn)行抗凝后，可以避免血液凝固的發(fā)生，提高了血清學(xué)檢測(cè)過程和結(jié)果的準(zhǔn)確性，為臨床診斷提供了更為實(shí)用和可靠的依據(jù)。

經(jīng)過本實(shí)驗(yàn)的深入研究分析，確定肝素抗凝血漿檢驗(yàn)適合于血漿10項(xiàng)急診生化項(xiàng)目。將肝素運(yùn)用于血漿的生化檢驗(yàn)中，由于肝素自身的抗凝作用，能夠保證檢驗(yàn)過程中的檢驗(yàn)對(duì)象的活性，避免因?yàn)檠耗绊憴z驗(yàn)結(jié)果。同時(shí)，肝素的應(yīng)用還有效的降低了檢驗(yàn)所需要的時(shí)間，為臨床救治提供了更為充足的救治時(shí)間，適合于急診自動(dòng)生化檢驗(yàn)的需求。需要進(jìn)行特別說明的是，在進(jìn)行肝素的應(yīng)用中，在凝血過程中，血小板的參與也會(huì)釋放一定量的鉀離子，導(dǎo)致血漿和血清中的鉀離子的濃度存在差異，通常約為0.5 mmol/L，此濃度差在檢驗(yàn)中應(yīng)特別注意。

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