DC-CIK 過繼細胞免疫聯(lián)合消癌平注射液治療老年晚期非小細胞肺癌療效觀察

肖 艷，肖振君

（1.山西省腫瘤醫(yī)院，山西 太原 030013；2.山西省中醫(yī)院，山西 太原 030012）

肺癌是目前世界上發(fā)病率和死亡率增長最快，對人群健康和生命威脅最大的惡性腫瘤之一。有研究報道，近年來肺癌的發(fā)病率和死亡率均明顯增高，而且男性肺癌發(fā)病率和死亡率均占所有惡性腫瘤的第1 位。肺癌的病因至今尚不完全明確，有的研究證明，長期大量吸煙與肺癌的發(fā)生有非常密切的關(guān)系，長期大量吸煙者患肺癌的概率是不吸煙者的10～20倍，而且吸煙開始的年齡越小，患肺癌的概率越高。在我國，隨著社會老齡化，在肺癌的發(fā)病群體中，每年約有30%70 歲以上的老人診斷為肺癌［1］，而老年患者體質(zhì)弱，內(nèi)科基礎(chǔ)疾病多，多合并重要臟器功能衰退，且免疫功能低下，不能耐受手術(shù)、放化療這些傳統(tǒng)治療方案，因此需要給予中藥抗腫瘤治療及最佳支持治療。消癌平注射液為烏骨藤提取物，是臨床常用的中藥抗腫瘤藥物，經(jīng)臨床研究證實療效確切。近年來DC-CIK 細胞療法經(jīng)過很多臨床研究被證實為新一代抗腫瘤過繼細胞免疫治療的首選方案。經(jīng)臨床篩選，我們在部分老年晚期非小細胞肺癌患者中選擇DC-CIK 過繼細胞免疫聯(lián)合消癌平注射液抗腫瘤治療，以期起到更好的療效，現(xiàn)總結(jié)報道如下。

1 臨床資料

82 例病例均為我院近年來經(jīng)病理組織學或細胞學檢查確診為晚期非小細胞肺癌（NSCLC）患者，隨機分為兩組。對照組40 例，其中男21 例，女19例；年齡66 歲～80 歲，中位年齡71.3 歲；病理類型：腺癌26 例，鱗癌11 例，腺鱗癌3 例；臨床分期：ⅢB期25 例，Ⅳ期15 例；腦轉(zhuǎn)移5 例，骨轉(zhuǎn)移4 例，惡性胸腔積液3 例，肺轉(zhuǎn)移3 例；KPS 評分：60 分12 例，70 分23 例，80 分以上5 例。治療組42 例，其中男24 例，女18 例；年齡65 歲～84 歲，中位年齡73.5歲；病理類型：腺癌30 例，鱗癌10 例，腺鱗癌2 例；臨床分期：ⅢB 期29 例，Ⅳ期13 例；腦轉(zhuǎn)移2 例，骨轉(zhuǎn)移4 例，惡性胸腔積液5 例；KPS 評分：60 分15例，70 分23 例，80 分以上4 例。兩組病例在性別、年齡、臨床分期等方面經(jīng)統(tǒng)計學分析差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。所有病例均為初次治療，血常規(guī)及肝腎功能檢查正常，無嚴重心臟病，預(yù)計生存期>3 個月。

2 治療方法

兩組病例均給予消癌平注射液（南京圣和藥業(yè)公司，國藥準字Z20025868，20mL/支）60 mL 加入5%葡萄糖液500 mL 中靜脈滴注，1 次/d，共治療14 d。治療組在上述治療同時聯(lián)合DC-CIK 過繼細胞免疫治療。①DC-CIK 細胞制備及質(zhì)控：血液成分用COBE Spectra 血液成分分離機（美國Gambro BCT公司）采集單個核細胞，數(shù)量約1×108～3×108，加30 mLGT-T551 培養(yǎng)液［寶日醫(yī)生物技術(shù)（北京）有限公司］，CO2培養(yǎng)箱孵育2 h，將懸浮細胞移出（用作CIK 誘導），向培養(yǎng)瓶中加入含1 000 U/mL 的注射用重組人粒細胞巨噬細胞刺激因子（GM-CSF，廈門特寶生物工程股份有限公司）和1 000 U/mL 的白細胞介素-4（IL-4，Peprotech 公司）誘導DC，每3 d 換液1 次并補充相關(guān)細胞因子，第6 天加入相關(guān)細胞因子的同時加入注射用重組人干擾素-γ（IFN-γ，上海凱茂生物醫(yī)藥有限公司），誘導DC 成熟；懸浮細胞置于GT-T601 培養(yǎng)袋中，加入含有1 000 U/mL IFN-γ的GT-T551 培養(yǎng)基培養(yǎng)，24 h 后加入50 ng/mLCD3單克隆抗體（古巴分子免疫學中心生產(chǎn)）和1 000 U/mL 的重組人白介素-2 注射液（rhIL-2，北京四環(huán)生物制藥有限公司），每隔3 d 換液1 次，補充rhIL-2；第7 天收獲成熟DC 并與CIK 細胞共培養(yǎng)7 d～8 d，收獲細胞回輸。細胞質(zhì)量控制：收獲后細胞數(shù)量應(yīng)達到1×1010以上；臺盼藍染色檢測細胞活力應(yīng)在80%以上；采用流式細胞學方法對采集物和培養(yǎng)物細胞免疫表型檢測；進行細菌、真菌、支原體和內(nèi)毒素檢測，無菌試驗。②DC-CIK 細胞回輸：將制備好的CIK 細胞溶于含5×105U IL-2、0.5%人血白蛋白的0.9%NaCl 溶液中回輸入患者體內(nèi)，每次回輸CIK 細胞數(shù)應(yīng)在為1.0×1010以上，30 d 為1 個周期，2 周期后評價療效，每位患者治療不少于2 周期。兩組病例分別于治療前及治療2 w 后分別檢測NK、NKT 細胞以及T 細胞亞群及按照WHO 抗癌藥物急性及亞急性毒性反應(yīng)標準評價毒性反應(yīng)，分為0～Ⅳ度。研究數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布均以均數(shù)±標準差（±s）表示，以獨立樣本t 檢驗進行分析；同組治療前后數(shù)據(jù)以配對t檢驗進行分析，率的比較采用χ2檢驗；P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

3 結(jié)果

3.1 療效標準

3.1.1 近期療效評定 按照WHO 1981 年制定的實體瘤統(tǒng)一評價標準，療效分為完全緩解（CR），部分緩解（PR），穩(wěn)定（SD），進展（PD），有效率（RR）為CR+PR 之和占治療觀察例數(shù)的百分比。

3.1.2 生活質(zhì)量評定標準 依據(jù)KPS 評分［2］，治療前后計分增加≥10 分為提高，降低≥10 分為下降，變化在10 分以內(nèi)為穩(wěn)定。

3.1.3 體重變化 參照抗腫瘤藥物常見毒性分級標準［3］，除外體腔積液、浮腫等因素引起的體重變化。好轉(zhuǎn)：體重增加>2 kg，并維持4 w 以上；穩(wěn)定：體重增加或減少<2 kg；惡化：體重減少>2 kg，持續(xù)4 w以上。

3.2 療效觀察

3.2.1 兩組病例治療后近期療效比較 結(jié)果見表1。

表1 兩組病例治療后近期療效比較 （例）

由表1 可以看出，對照組治療后近期療效有效率為35.0%，治療組治療后近期療效有效率為52.4%，兩組病例治療后近期療效比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

3.2.2 兩組病例治療后生活質(zhì)量比較 結(jié)果見表2。

表2 兩組病例治療后生活質(zhì)量比較 ［例（%）］

3.2.3 體重變化 治療組體重增加者14 例，穩(wěn)定者18 例，體重減少者10 例；對照組體重增加者12 例，穩(wěn)定者17 例，減少者11 例。兩組病例治療后體重變化比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。

3.2.4 兩組及兩組治療前后NK 細胞、T 細胞亞群變化 治療組治療后NK、NKT 及CD3+、CD8+T 細胞比例明顯高于治療前（P<0.05）；治療組治療后較對照組治療后NK、NKT 及CD3+、CD8+T 細胞比例明顯增高。結(jié)果見表3。

4 討論

肺癌是嚴重威脅人類生命的惡性腫瘤之一，是全世界目前發(fā)病率和死亡率最高的癌癥。其中非小細胞肺癌約占80%，5 年生存率僅為15%，預(yù)后較差。肺癌的臨床表現(xiàn)比較復雜，癥狀和體征的有無、輕重以及出現(xiàn)的早晚，取決于腫瘤發(fā)生部位、病理類型、有無轉(zhuǎn)移及有無并發(fā)癥，以及患者的反應(yīng)程度和耐受性的差異。肺癌早期癥狀常較輕微，甚至可無任何不適。中央型肺癌癥狀出現(xiàn)早且重，周圍型肺癌癥狀出現(xiàn)晚且較輕，甚至無癥狀，常在體檢時被發(fā)現(xiàn)。姑息性化療是晚期非小細胞肺癌的常用治療手段，但化療藥物對腫瘤細胞的選擇性不高，在殺滅腫瘤細胞的同時，抑制了機體免疫功能，而且全身用藥毒副作用較大，最常見得有惡心、嘔吐、食欲不振、骨髓抑制等毒副反應(yīng)，這些因素使很多老年及一般狀況較差的患者不能耐受而終止化療。因此，近年來提高患者生活質(zhì)量、延長患者帶瘤生存期已成為中晚期肺癌臨床治療和研究的獨立評價指標和治療目的［4］。在此背景下，尋求一種對于晚期肺癌患者可行的、有效的治療手段尤為重要。

表3 兩組病例外周血T 細胞亞群的變化比較 （%，±s）

表3 兩組病例外周血T 細胞亞群的變化比較 （%，±s）

注：與本組治療前比較，1）P＜0.05；與對照組治療后比較，2）P＜0.05

過繼性細胞免疫治療（ACI）主要有樹突狀細胞（DC），細胞因子誘導的殺傷細胞（CIK）及細胞毒T淋巴細胞（CTL）等，是通過注射免疫活性細胞激發(fā)或調(diào)動機體的免疫系統(tǒng)，增強腫瘤微環(huán)境的抗腫瘤免疫力，從而控制和殺傷腫瘤細胞。DC 細胞是目前已知功能最強的專職抗原提呈細胞，成熟DC 細胞可有效的誘導抗原特異性T 細胞增殖和活化，激活NK 及自然殺傷T 細胞（NKT）。CIK 細胞是在多種細胞因子的刺激下，兼具T 淋巴細胞強大的抗瘤活性和自然殺傷（NK）細胞的廣譜的殺瘤優(yōu)點，被認為是新一代腫瘤過繼性細胞免疫治療的首選方案［5-8］。

消癌平為中藥烏骨藤的精提取物?，F(xiàn)代植化分析認為，其主要成分為多糖、皂苷和生物堿［9］，有抗炎、平喘、利尿等作用。晚期肺癌患者可出現(xiàn)咳嗽、氣喘、消瘦、浮腫等癥狀，威脅到患者的生活質(zhì)量。消癌平注射液可以一定程度上緩解晚期肺癌的癥狀。近年來的臨床研究也表明，消癌平注射液單獨給藥或與其他療法并用，都顯示出明顯的抗腫瘤效果。據(jù)報道用消癌平注射液單藥治療晚期肺癌，臨床獲益率達77.8%，有效率17.6%，均明顯高于對照組［10］。

在臨床工作中，我們對晚期非小細胞肺癌患者病情進行綜合評估后選擇個體化治療方案，本文總結(jié)了82 例用DC-CIK 過繼性細胞免疫治療聯(lián)合消癌平和單純用消癌平患者的病例資料，統(tǒng)計結(jié)果提示，生物治療聯(lián)合消癌平對老年肺癌晚期患者提高治療有效率、改善生活質(zhì)量及調(diào)節(jié)患者細胞免疫方面有較大優(yōu)勢。在臨床工作中我們會進一步研究和總結(jié)，以放化療為基礎(chǔ)，不斷認識并利用過繼性細胞免疫治療作為腫瘤內(nèi)科重要治療手段的優(yōu)越性，吸取中醫(yī)藥的精髓，為腫瘤患者尋求更佳的治療方案。

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