啤酒花對朱砂蓮所致馬兜鈴酸腎病的拮抗作用

龐俊偉

（山西中醫(yī)學院，山西 太原 030024）

朱砂蓮辛、寒，味苦，為馬兜鈴科馬兜鈴屬植物朱砂蓮的根莖，具有清熱解毒、消腫止痛之功效［1］。朱砂蓮中含有毒性成分是馬兜鈴酸，可以引起腎功能損傷。馬兜鈴酸引起的腎臟損傷主要是由于引起腎小管-間質(zhì)的損傷導致溶菌酶（LYS）、血肌肝（Scr）、β2-微球蛋白（β2-MG）含量明顯增高。啤酒花性平，味苦，為蕁麻目大麻科葎草屬植物啤酒花的花序，具有能健胃消食、利尿安神之功效。《食物中藥與便方》中記載飲用啤酒花球果泡制成的茶汁能輔助治療腎臟疾?。?］。本研究通過中醫(yī)理論指導下的方藥配伍減毒方法，測定尿中極微量的蛋白和酶的變化，觀察朱砂蓮與啤酒花不同配比對馬兜鈴酸腎毒性的拮抗作用，以探討其藥理作用機制。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 實驗動物 近交系SD 大鼠，雌雄各半，170 g～230 g，由中國中醫(yī)科學院實驗動物研究所提供，合格證號：SCXK（京）2011-0002。飼養(yǎng)環(huán)境通風良好，飼養(yǎng)溫度25 ℃～28 ℃，濕度為70%，自由飲水、進食。

1.1.2 藥物與試劑 朱砂蓮購自新疆阿合奇縣人民醫(yī)院藥劑科，由山西藥科職業(yè)技術(shù)學院通過薄層鑒別和性狀鑒別確認系馬兜鈴科植物朱砂蓮，啤酒花購自新疆阿合奇縣人民醫(yī)院藥劑科，經(jīng)鑒定為正品。血清肌酐測定試劑盒（上海生物制品研究所提供，批號：20120423），β2-微球蛋白（寧波瑞源生物科技有限公司提供，批號：20120711），堿性磷酸酶（鄭州蘭森生物技術(shù)有限公司提供，批號：20120206），溶菌酶（上海西唐生物科技有限公司提供，批號：20120522）。

1.1.3 實驗儀器 MS4002SDR 精密天平（梅特勒-托利多儀器公司生產(chǎn)），TDL-5-A 離心機（深圳市三利化學儀器生產(chǎn)），7170A 型全自動生化分析儀（日本Hitachi 公司）。

1.2 實驗方法

1.2.1 朱砂蓮藥液制備 朱砂蓮加冷水浸泡30 min，初用強火加熱煮沸，沸后用小火保持30 min，過濾，藥渣復煎，合并濾液，60 ℃～100 ℃水浴濃縮至1 g/mL，120 ℃濕熱滅菌后裝瓶冷藏備用，使用前適當加熱。

1.2.2 朱砂蓮配伍啤酒花藥液制備 制備方法同朱砂蓮藥液的制備，二者按照如下比例配伍后煎熬濃縮至1 g/mL，120 ℃濕熱滅菌后裝瓶冷藏備用，使用前適當加熱。干啤酒花與朱砂蓮：高劑量為10∶1，中劑量為5∶1，低劑量為2∶1；鮮啤酒花與朱砂蓮：高劑量為100∶1；中劑量為50∶1；低劑量為20∶1。

1.2.3 分組及給藥 SD 大鼠適應性飼養(yǎng)（實驗室）1 w 后，按照體重、雌雄各半隨機分為朱砂蓮高劑量組（A 組）、朱砂蓮中劑量組（B 組）、朱砂蓮低劑量組（C組）、干啤酒花配朱砂蓮高劑量組（D 組）、干啤酒花配朱砂蓮中劑量組（E 組）、干啤酒花配朱砂蓮低劑量組（F 組）、鮮啤酒花配朱砂蓮高劑量組（G 組）、鮮啤酒花配朱砂蓮中劑量組（H 組）、鮮啤酒花配朱砂蓮低劑量組（I 組）、空白組（J 組）10 組，每組12 只。各組均精飼料喂養(yǎng)、自由飲水。根據(jù)現(xiàn)在藥物的一般用量，以古人用量的1/3 作為現(xiàn)在成人的常用劑量，并根據(jù)成人1 d 用量按大鼠的體重體表面積換算所得劑量，A、B、C 組分別按10 g/（kg·d）、5 g/（kg·d）、1 g/（kg·d）給藥，其余各組均按照10 g/（kg·d）給藥，每天灌胃1 次，每次5 mL，連續(xù)60 d?？瞻捉M以等量生理鹽水灌胃。

1.2.4 標本采集與指標測定 實驗開始時對各組大鼠稱重，并定期稱定體重。60 d 后，以上10 組大鼠均在空腹時用代謝籠稱重。取尿液，股動脈取血后處死，留取標本作血尿檢測。堿性磷酸酶（AKP）、血肌酐（SCr）、溶菌酶（LYS）、β2微球蛋白（β2-MG）的測定依照試劑盒說明進行。

1.3 統(tǒng)計學方法

結(jié)果采用SPSS17.0 統(tǒng)計軟件分析，數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標準差（±s）來表示，組間差異采用方差分析檢驗，若P<0.05 則認為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

與朱砂蓮高劑量組比較，其余各組大鼠體重明顯升高（P<0.05），AKP 含量明顯降低，LSY 和β2-MG 含量均有不同程度的降低（P<0.05），除鮮啤酒花配朱砂蓮中劑量組升高外其余各組均有不同程度的降低。與空白組比較，朱砂蓮高劑量組、朱砂蓮中劑量組Scr、β2-MG 含量顯著升高，LYS 含量雖然升高，但差異無統(tǒng)計學意義。然而朱砂蓮低劑量組與空白組Scr、β2-MG、LYS 含量比較差異無統(tǒng)計學意義。說明朱砂蓮中高劑量組能引起大鼠腎臟損傷。經(jīng)配伍啤酒花后，干啤酒花配伍朱砂蓮各劑量組AKP、Scr、β2-MG、LYS 含量與朱砂蓮高劑量組比較均明顯下降。鮮啤酒花配伍朱砂蓮各劑量組與朱砂蓮高劑量組比較AKP 含量明顯下降。而鮮啤酒花配伍朱砂蓮高、低劑量組Scr 含量較朱砂蓮高劑量組有所降低，鮮啤酒花配伍朱砂蓮中劑量組Scr 含量較朱砂蓮高劑量組有所升高，但差異比較無統(tǒng)計學意義；鮮啤酒花配伍朱砂蓮各劑量組與朱砂蓮高劑量組LSY 含量比較有所下降，但差異無統(tǒng)計學意義；鮮啤酒花配伍朱砂蓮高、中劑量組與朱砂蓮高劑量組β2-MG 含量比較明顯下降（P<0.05），但鮮啤酒花配伍朱砂蓮低劑量組與朱砂蓮高劑量組β2-MG 含量比較有所下降，但差異無統(tǒng)計學意義。說明啤酒花在一定程度上可以緩解馬兜鈴酸腎病導致的津液代謝障礙，達到預防和延緩馬兜鈴酸腎病的發(fā)生以及減輕腎臟功能損害的作用。與鮮啤酒花配伍朱砂蓮相應的各劑量組比較，干啤酒花配伍朱砂蓮相對應的各劑量組AKP、Scr、β2-MG、LYS 含量均有不同程度的降低。說明干啤酒花在一定程度上能夠減輕朱砂蓮所致腎臟的毒性，而且效果優(yōu)于鮮啤酒花。結(jié)果見表1。

表1 各組大鼠體重、生化指標比較 （±s）

表1 各組大鼠體重、生化指標比較 （±s）

注：與A 組比較，1）P<0.05；與G 組比較，2）P<0.05；與H 組比較，3）P<0.05；與I 組比較，4）P<0.05

3 討論

中醫(yī)學認為，津液在體內(nèi)的代謝主要依靠肺、脾、腎三臟的功能?！端貑柦?jīng)脈別篇》曰：“飲入于胃，游溢精氣，上輸于脾；脾氣散精，上歸于肺，通調(diào)水道，下輸膀胱；水精四布，五經(jīng)并行?！狈?、脾、腎相互協(xié)調(diào)，共同維持人體水液的生成、輸布與排泄，對于津液的清濁升降運動起著主導作用。肺的宣發(fā)肅降、脾的健運，腎的蒸騰氣化之功能協(xié)調(diào)，則津液代謝正常，馬兜鈴酸就能及時排出體外，不在腎臟蓄積，對腎臟的損害，對馬兜鈴酸所致腎病具有一定的防治作用。

［1］謝宗萬.全國中草藥匯編（上、下冊）［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，1996：383-384.

［2］葉桔泉.食物中藥與便方［M］.南京：江蘇科學出版社，1971：118-119.