高效液相色譜法測(cè)定鹽酸沙格雷酯緩釋片中鹽酸沙格雷酯的含量*

董 杰

(天津田邊制藥有限公司，天津 300385)

鹽酸沙格雷酯緩釋片為5－HT2受體拮抗劑，臨床上主要用于改善慢性動(dòng)脈閉塞癥所引起的潰瘍、疼痛以及冷感等缺血性諸癥狀的治療。本實(shí)驗(yàn)采用高效液相色譜法測(cè)定鹽酸沙格雷酯緩釋片中鹽酸沙格雷酯的含量，取得了滿意結(jié)果。

1 儀器和試藥

LC－6A高效液相色譜儀(日本島津)，SPD－6AV紫外檢測(cè)器，N－2000型色譜工作站。鹽酸沙格雷酯對(duì)照品(天津田邊制藥有限公司提供，純度99.0%，批號(hào)SAR0201)。鹽酸沙格雷酯緩釋片(自制，批號(hào)130711、130712、130713)。乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱:Phenomenex C18柱(4.6 mm ×250 mm，5 μm);流動(dòng)相:乙腈 － 水 － 三氟乙酸(48∶52∶0.1);柱溫:40 ℃;檢測(cè)波長(zhǎng):272 nm;流速:1.0 ml/min;進(jìn)樣量:10 μl。

2.2 溶液配制

2.2.1 對(duì)照品溶液 精密稱取鹽酸沙格雷酯對(duì)照品約50 mg，置50 ml量瓶中，加乙腈，振搖使之充分溶解后稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 ml，置50 ml量瓶中，用乙腈－水(1∶1)稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。

2.2.2 供試品溶液 取鹽酸沙格雷酯緩釋片20片，稱重，研細(xì)，精密稱取細(xì)粉適量(約相當(dāng)于含鹽酸沙格雷酯100 mg)，置100ml量瓶中，加乙腈超聲提取，冷卻至室溫后加乙腈稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，續(xù)濾液經(jīng)離心(1500 r/min，5 min)后，精密量取上清液 5 m l，置 50 ml量瓶中，用乙腈－水(1∶1)稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

2.2.3 空白溶液 按處方中各輔料的比例配制成不含鹽酸沙格雷酯的空白樣品，照“2.2.2”項(xiàng)下方法配制溶液，作為空白溶液。

2.3 方法適用性試驗(yàn) 依給定的色譜條件，量取鹽酸沙格雷酯對(duì)照品溶液、供試品溶液和空白溶液各10 μl，分別進(jìn)樣，記錄色譜圖，見圖1。鹽酸沙格雷酯的保留時(shí)間約為8 min，與其他組分峰的分離度＞1.5，理論板數(shù)為5289;空白輔料對(duì)鹽酸沙格雷酯峰無(wú)干擾。

2.4 線性關(guān)系 分別取鹽酸沙格雷酯對(duì)照品適量，照“2.2.1”項(xiàng)下方法配制溶液，制成濃度為 20、50、100、150、200和300 μg/ml對(duì)照品溶液，按給定的色譜條件進(jìn)行測(cè)定，記錄各濃度的色譜峰面積，以峰面積對(duì)溶液濃度求得回歸方程為 Y=2.3×104X－3876(r=0.9996)。在 20 ～300 μg/ml范圍內(nèi)，峰面積與濃度呈良好的線性關(guān)系。

圖1 對(duì)照品(A)樣品(B)空白樣品(C)HPLC色譜圖

2.5 精密度試驗(yàn) 取濃度為100 μg/ml的對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，RSD為0.38%。表明所選定的色譜條件系統(tǒng)穩(wěn)定。

2.6 重現(xiàn)性試驗(yàn) 取同一批樣品(批號(hào)130711)進(jìn)行5次測(cè)定，平均含量為標(biāo)示量的 100.1%，RSD為0.35%(n=5)，表明該方法重現(xiàn)性良好。

2.7 回收率試驗(yàn) 精密稱取鹽酸沙格雷酯對(duì)照品80、100和120 mg各3份，分別加入處方量的輔料，照“2.2.2”項(xiàng)下方法配制溶液，依給定的色譜條件，取10 μl進(jìn)樣，記錄色譜圖，測(cè)得平均回收率為99.9%，RSD為 0.27(n=9)，結(jié)果見表 1。

表1 回收率試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果

2.8 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一供試品溶液在室溫條件下放置，依給定的色譜條件，測(cè)定 0、1、2、4、6 和 8 h 時(shí)的峰面積，RSD為0.55%(n=6)，表明樣品溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.9 樣品含量測(cè)定 取不同批號(hào)的鹽酸沙格雷酯緩釋片各20片，稱重，研細(xì)，照“2.2.2”項(xiàng)下方法配制溶液，依給定的色譜條件，取10 μl進(jìn)樣，各批分別進(jìn)樣3次，記錄色譜圖。另精密稱取鹽酸沙格雷酯對(duì)照品約50 mg，置 50 ml量瓶中，照“2.2.1”項(xiàng)下方法配制溶液，依給定的色譜條件，取10 μl進(jìn)樣，記錄色譜圖。按照外標(biāo)法以峰面積計(jì)算3批樣品(批號(hào)130711、130712、130713)平均標(biāo)示量的百分含量(n=3)，結(jié)果分別為 100.2%、100.4%和 99.8%。

3 討論

3.1 在樣品處理過(guò)程中，超聲處理可使樣品充分溶解，經(jīng)離心處理可以去除未被濾除的微小不溶物，以確保溶液的澄清。

3.2 樣品測(cè)定結(jié)果表明，采用該方法測(cè)定鹽酸沙格雷酯緩釋片含量，能消除輔料的影響，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好，可用于該制劑的質(zhì)量控制。