梅毒血清試驗(yàn)對梅毒診斷及療效的臨床價值

熊文翠，馬雅英，劉士君

(平湖市第一人民醫(yī)院，浙江 平湖 314200)

·基礎(chǔ)與臨床研究·

梅毒血清試驗(yàn)對梅毒診斷及療效的臨床價值

熊文翠，馬雅英，劉士君

(平湖市第一人民醫(yī)院，浙江 平湖 314200)

目的：探討3種梅毒血清學(xué)試驗(yàn)對梅毒診斷及療效的臨床價值。方法對10711例血清標(biāo)本用梅毒螺旋體抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(TP-ELISA)進(jìn)行梅毒篩查，陽性標(biāo)本進(jìn)一步用梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)和甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)(TRUST)滴度檢測。結(jié)果10711例血清標(biāo)本進(jìn)行TP-ELISA篩查，檢出陽性441例，經(jīng)TPPA法確診陽性422例，陽性符合率為95.69%。441例TP-ELISA陽性標(biāo)本進(jìn)行TRUST法檢出陽性240例，陽性符合率為54.42%，符合率明顯低于TP-ELISA，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=402.83,P<0.05)。結(jié)論TP-ELISA法敏感性較高，操作方便，可作為梅毒的常規(guī)篩查，但存在假陽性問題，尤其以60歲以上的老年人居多。TPPA法敏感性和特異性最高，作為確診試驗(yàn)，但操作繁瑣，不適合常規(guī)篩查。TRUST法敏感性和特異性均低于TP-ELISA法和TPPA法，僅可作為療效觀察和隨訪有無復(fù)發(fā)或再感染的指標(biāo)。

梅毒；梅毒螺旋體抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)；梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)；甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)

Abstract: [Objective] To explore the clinical value of three kinds of syphilis serology test for syphilis diagnosis and curative effect.[Method]All of 10711 clinical specimens underwent routine TP antibody screening with enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) method; positive samples were further tested by treponema pallidum particle agglutination (TPPA) and toluidine red unheated serunm test (TRUST) . [Result]10711 serum samples were screened.there were 441 positive samples tested by TP-ELISA. Among them, the number of the same result tested by TPPA was 422 and the positive coincidence rate was 95.69%. Among the 441 positive samples, 240 were positive results by TRUST, the positive coincidence rate was 54.42%. Positive rate was significantly lower than TP-ELISA. There was significant difference (χ2=402.83,P<0.05). [Conclusion]TP-ELISA shows better sensibility, easy automation, as routine screening method, but it exists false positive, especially for old people of (≥60 years old). The sensitivity and specificity of TPPA are highest, as confirmed diagnose test. However, the complicated operation TPPA is not suitable as a routine screening method. The sensitivity and specificity of TRUST are the lowest, only be as a curative effect observation and follow-up whether relapse re-infection indicators.

Keywords: syphilis ; TP-ELISA ; TPPA ; TRUST

梅毒是由蒼白螺旋體(Treponema Pallidum ,TP)引起的一種性傳播疾病，病程呈慢性病變，可以侵犯皮膚粘膜及神經(jīng)、心血管、骨骼等組織器官，該病臨床表現(xiàn)復(fù)雜，危害大。因此，選擇敏感性、特異性均高的血清學(xué)實(shí)驗(yàn)方法無論是對梅毒的診斷、治療、預(yù)防，還是對血液制品的梅毒篩查都是十分重要的。目前主要是通過檢測血清中的非特異性反應(yīng)素和特異性抗體診斷梅毒。近年來我院采取TP-ELISA作為梅毒篩查試驗(yàn)，陽性結(jié)果經(jīng)TPPA確證，并以TRUST滴度為療效觀察，現(xiàn)針對這一檢測體系做一個回顧性分析。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源

本院2012年1～6月住院和門診檢測梅毒抗體的患者共10711人，年齡0～90歲,中位數(shù)M=41歲。

1.2 試劑和儀器

TP-ELISA試劑和TRUST試劑由北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司提供，TPPA由日本富士瑞必歐株式會社生產(chǎn)。儀器為安圖斯Anthos2010酶標(biāo)儀、新波SYM-B10全自動酶標(biāo)洗板機(jī)、XK96-8型梅毒旋轉(zhuǎn)振蕩器。

1.3 方法

用TP-ELISA法對臨床標(biāo)本進(jìn)行篩查，大于臨界(cut-off)值為陽性，并對陽性標(biāo)本進(jìn)一步做TPPA確證和TRUST滴度檢測。所有試驗(yàn)均按試劑說明嚴(yán)格操作。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS13.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2．1 3種血清血清學(xué)方法對TP抗體檢測的結(jié)果比較

采用TP-ELISA法對10711例標(biāo)本進(jìn)行篩查，篩查出陽性441例，陽性檢出率為4.12%。其中經(jīng)TPPA確診陽性422例，陰性19例，2種試驗(yàn)陽性符合率為95.69%。441例TP-ELISA陽性標(biāo)本進(jìn)行TRUST法檢出陽性240例，經(jīng)TPPA確診240例，陽性符合率為54.42%。而201例TRUST陰性中，TPPA確診182例，陰性19例。3種方法比較結(jié)果，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=402.83,P<0.05)。結(jié)果見表1。

表1 TP-ELISA、TPPA與TRUST3種方法檢測結(jié)果比較

2．2 TP-ELISA法的假陽性分析

TP-ELISA陽性的441例標(biāo)本中有19例(4.3%)TPPA陰性，且以老年人居多，≥60歲的9例(47.37%)。針對這一特殊現(xiàn)象，本文對這19例患者進(jìn)行調(diào)查，結(jié)果見表2。

表2 441例TP-ELISA法陽性標(biāo)本中TPPA陰性和TPPA陽性病人基本資料比較

2．3 3種血清學(xué)方法檢測梅毒抗體的臨床意義

根據(jù)實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果與實(shí)際臨床分析，再結(jié)合有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道[1]，總結(jié)其臨床意義。結(jié)果見表3。

表3 3種血清學(xué)方法聯(lián)合檢測梅毒抗體的臨床意義

3 討論

TP-ELISA法是近年來隨著梅毒螺旋體基因工程研制成功而發(fā)展起來的一種血清學(xué)檢測方法，具有較高的敏感性和特異性。有文獻(xiàn)報(bào)道，TP-ELISA可以比TPPA更早地檢測出TP特異性抗體[2]。TP-ELISA實(shí)際操作技術(shù)簡便，試劑價格較便宜，適合血站獻(xiàn)血者篩查、醫(yī)院大批量標(biāo)本的檢測。其主要缺點(diǎn)是存在假陽性率偏高的問題[3]。本文結(jié)果顯示，TP-ELISA陽性的441例患者中有19例TPPA確證陰性，且臨床上找不到梅毒感染的其他依據(jù)，假陽性率4.31%。這19例患者以老年人居多，≥60者9例(47.37%),包括11例有多年糖尿病、心腦血管疾病、高血壓等病史，4例有乙肝病毒、丙肝病毒或結(jié)核桿菌感染等傳染病史，2例輸血史。武建國[4]報(bào)道老年患者梅毒血清學(xué)試驗(yàn)假陽性的原因可能是：老年患者所患的基礎(chǔ)疾病可能使機(jī)體釋放誘導(dǎo)產(chǎn)生抗類脂質(zhì)抗體和/或抗梅毒抗體的交叉抗原；另外，TP-ELISA法因抗原可能不純，而且使用了人血清白蛋白，使假陽性抗原位點(diǎn)的可能性增加[5]。所以TP-ELISA陽性的患者還需進(jìn)一步做TPPA，以免誤診。

TPPA是將特異性的梅毒螺旋體抗原包被在明膠顆粒上進(jìn)行血清抗體檢測，不受生物素影響，有很高的敏感性和特異性，是梅毒抗體的確診方法[6]。但TPPA試劑價格昂貴，試驗(yàn)時間較長，且操作繁瑣，不適合大批量標(biāo)本的檢測。

TRUST采用重懸于含有特制的甲苯胺紅溶液中制成，在白色卡片上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以檢測血清或血漿中的反應(yīng)素。由于TP感染后，抗心磷脂抗體出現(xiàn)晚于特異性螺旋體抗體，而且梅毒晚期又可能轉(zhuǎn)陰，故TRUST法不適宜一期梅毒、三期梅毒的診斷，對潛伏期和神經(jīng)梅毒也不敏感[7]。但此法操作較為簡單，其滴度變化可作為梅毒治療療效觀察的指標(biāo)。TRUST試驗(yàn)滴度與病程有關(guān)，當(dāng)感染者接受治療后或疾病處于非活動期時，TRUST滴度下降或消失，復(fù)發(fā)或感染時又會轉(zhuǎn)陽，故其滴度變化有助于判斷梅毒復(fù)發(fā)及再感染。

這3種血清學(xué)方法聯(lián)合應(yīng)用對梅毒的篩查、確診、療效觀察可謂相輔相成，其結(jié)果解釋如表3。TP-ELISA敏感性較高，對于初次檢測TP-ELISA陽性而TPPA陰性的檢測者，建議2周后隨訪復(fù)查TPPA，以排除窗口期因特異性抗體效價低而出現(xiàn)的TPPA假陰性。徐樹良等[8]隨訪調(diào)查26例梅毒抗體TP-ELISA陽性而TPPA陰性獻(xiàn)血者，發(fā)現(xiàn)有9例TPPA先后轉(zhuǎn)陽性。但是TP-ELISA由于存在“鉤狀效應(yīng)”而造成的假陰性問題不容忽視，當(dāng)TP-ELISA陰性而TPPA陽性、TRUST滴度陽性的矛盾結(jié)果時應(yīng)考慮到這種情況，應(yīng)將標(biāo)本稀釋后復(fù)檢；或TP-ELISA初篩陰性而臨床高度懷疑為梅毒時，應(yīng)建議進(jìn)一步檢測TPPA。

綜上所述，3種方法在臨床上的意義不同，TP-ELISA法是梅毒篩查的理想方法，對于陽性標(biāo)本應(yīng)做TPPA確證，TRUST可作為療效觀察和隨訪有無復(fù)發(fā)或再感染的指標(biāo)。值得重視的是沒有任何一種梅毒螺旋體血清學(xué)檢測方法其敏感性和特異性可以達(dá)到100%，為了避免生物學(xué)假陽性干擾，應(yīng)結(jié)合患者的病史，臨床表現(xiàn)等進(jìn)行綜合分析，才能作出正確的判斷。

[1]彭紅,劉熔,趙素元.梅毒血清學(xué)檢測流程的臨床流行病學(xué)評價[J]. 中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志, 2010,20 (2):329-331.

[2]徐樹良,趙源源,王寧武,等. 26例梅毒抗體ELISA陽性TPPA陰性獻(xiàn)血者隨訪調(diào)查[J]. 中國輸血雜志, 2002,15(4) :265-266.

[3]季德成,李曉平,董春雷,等. ELISA法檢測老年人梅毒抗體易產(chǎn)生假陽性分析[J]. 放射免疫學(xué)雜志, 2005,18 (3): 239-240.

[4]武建國. 老年人抗梅毒螺旋體抗體測定的假陽性率偏高[J]. 臨床檢驗(yàn)雜志, 2006, 24(4): 241-243.

[5]彭明喜. 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測梅毒抗體假陽性的原因分析[J]. 現(xiàn)代實(shí)用醫(yī)學(xué)，2006, 18 (2) :127-128.

[6]馬聰,王芳,徐武夷. 梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)室檢測技術(shù)的研究進(jìn)展[J]. 中華醫(yī)院感染學(xué)雜志, 2002, 12(12): 959.

[7]黃永梅. ELISA﹑TPPA和TRUST﹑RPR梅毒檢測方法的比較[J]. 國際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào), 2006, 12(8): 88-89.

[8]徐樹良,趙源源,王寧武,等. 26例梅毒抗體ELISA陽性TPPA陰性獻(xiàn)血者隨訪調(diào)查[J]. 中國輸血雜志, 2002,15(4) :265-266.

Clinicalvalueofsyphilisserologytestforsyphilisdiagnosisandcurativeeffect

XIONGWencui，MAYaying,LIUShijun

(The First People′s Hospital of Pinghu , Zhejiang 314200,China)

熊文翠(1978-)，女，浙江平湖人，本科，主管技師。研究方向：免疫檢驗(yàn)

R446

B

1672-0024(2013)06-0055-03