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    人工養(yǎng)殖鹿角珊瑚寄生蟲櫛水虱病害防治

    2013-10-12 06:19:36王爾棟陳韻竹陳國華李洪武
    關(guān)鍵詞:敵百蟲鹿角白化

    王爾棟,陳韻竹,陳國華,蔡 楓,李洪武*

    (1.海南大學(xué) 海洋學(xué)院,海南 ???570228;2.海口瀾邦生物技術(shù)有限公司,海南 海口 570203)

    由于自然環(huán)境的變化和人為破壞,世界上大部分的珊瑚正在以驚人的速度退化消失[1].擁有珊瑚礁30%的東南亞地區(qū),已有60%的遭到破壞,其中菲律賓為70%,印度尼西亞則高達80%,以此速度,40年內(nèi)整個東南亞的珊瑚礁生態(tài)系統(tǒng)將完全消失[2-4].另外據(jù)澳大利亞的全球珊瑚礁生態(tài)系統(tǒng)監(jiān)測網(wǎng)估計,近年來,珊瑚捕捉和采集技術(shù)的提高以及珊瑚人工養(yǎng)殖研究者之間的交流都有效地促進了珊瑚人工養(yǎng)殖的發(fā)展[5].相關(guān)的問題也相繼的出現(xiàn)在養(yǎng)殖過程中[6],如病原體的發(fā)生、傳播與擴散,寄生蟲以及捕食者的危害.其中珊瑚養(yǎng)殖中出現(xiàn)的寄生蟲問題,國內(nèi)外都報道極少[7].尤其對珊瑚寄生蟲的報道極少;而國內(nèi)的珊瑚人工養(yǎng)殖更是還在起步階段,沒有對珊瑚寄生蟲的任何描述.國外文獻中較為常見的珊瑚寄生蟲是紅蟲[8-10],一般治理的方法是用治療大型狗類犬心蟲的菌素氧化物(每1436 L水中有23mg菌素氧化物含量為0.016mg·L-1),將其加入水缸中放置5~7h.但是關(guān)于鹿角珊瑚寄生蟲櫛水虱的報道幾乎沒有,所以很有必要對實驗室出現(xiàn)的櫛水虱進行詳細的研究[11-13].本研究探索人工養(yǎng)殖下鹿角珊瑚出現(xiàn)寄生蟲櫛水虱的防治方法,為未來珊瑚礁的保護提供數(shù)據(jù)和資料.

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 實驗生物

    供試珊瑚為松枝鹿角珊瑚(Acropora brueggemanni)和寄生蟲櫛水虱 Asellus aquaticuse,分離自被寄生蟲感染的珊瑚體,由??跒懓钌锟萍加邢薰咎峁?

    1.1.2 實驗試劑

    供試試劑見表1.

    1.1.3 供試所需設(shè)備和器材

    供試所需設(shè)備和器材見表2.

    1.2 研究方法

    1.2.1 實驗藥品的配制

    量取O,O-二甲基-(2,2,2-三氯-1-羥基乙基)膦酸酯(敵百蟲)晶體藥品20 mg,加入200 mL蒸餾水,混勻,得到濃度為100 mg·L-1的敵百蟲藥品母液.置于室溫保存.

    表1 供試試劑Tab.1 The experimental reagents

    表2 供試所需設(shè)備和器材Tab.2 The instruments and experimental methods

    1.2.2 供試生物采集

    取中出現(xiàn)被寄生蟲感染并白化鹿角珊瑚,在解剖鏡下對珊瑚白化部分進行觀察,發(fā)現(xiàn)其白化和未白化交界區(qū)域有寄生蟲(A.aquaticuse).其體長為2~3 mm.使用解剖將櫛水虱從珊瑚上分離(見圖1).截取3 cm左右的健康鹿角珊瑚斷肢,固定在塑料板上[14].

    1.2.3 供試所需養(yǎng)殖環(huán)境建立

    供試所需培養(yǎng)方法為室內(nèi)循環(huán)水珊瑚人工養(yǎng)殖,該方法主要依靠柏林系統(tǒng)珊瑚養(yǎng)殖方法[9-10].應(yīng)用ELH JCR鹵素?zé)艉蚑5HO燈管作為光源,以蛋白質(zhì)分離器、鈣反應(yīng)器和沸石桶反應(yīng)器等控制水體環(huán)境(恒溫26℃).

    1.2.4 供試所需帶藥養(yǎng)殖環(huán)境制作

    圖1 櫛水虱的變化Fig.1 The change of Asellus aquaticuse

    據(jù)Mitch Carl等櫛水虱在敵百蟲濃度為3 mg·L-1的海水中,48 h內(nèi)必定會死亡,所以3 mg·L-1為最高濃度.在超凈臺上,按所需的質(zhì)量稱取供試試劑O,O-二甲基-(2,2,2-三氯-1-羥基乙基)膦酸酯(敵百蟲)后,將溶入到養(yǎng)殖環(huán)境中(恒溫26℃)混合均勻后,迅速蓋好,達到實驗所需藥品濃度.按照各濃度梯度配置,依次設(shè)置3.0、2.8、2.5、2.0、1.8、1.5、1.0、0.8、0.5 mg·L-19個濃度梯度.用等體積蒸餾水為對照組.

    1.2.5 供試養(yǎng)殖環(huán)境水質(zhì)測定

    采用《GB17378.4-2007海洋檢測規(guī)范:第四部分海水分析》的方法對有寄生蟲的珊瑚養(yǎng)殖缸中水質(zhì)進行測定.

    1.2.6 敵百蟲對寄生蟲櫛水虱的毒性研究

    每個濃度下的實驗組與對照組各放將10只櫛水虱.分別放入氧氣泵,將通氣量調(diào)整到合適的大小進行充氧并造流.從放置寄生蟲時間開始計時,在12、24、48h后和觀察櫛水虱對敵百蟲的毒性反應(yīng).為保證實驗質(zhì)量,每個濃度下進行3次重復(fù)實驗,分別命名為A組,B組和C組.

    1.2.7 敵百蟲對鹿角珊瑚毒性研究

    為保證藥品敵百蟲不會在殺滅櫛水虱時對珊瑚本體造成影響.根據(jù)敵百蟲對櫛水虱的毒性研究的結(jié)果,由于3.0、2.8 mg·L-1的含量會對珊瑚形成明顯刺激,分泌腔液并迅速白化,所以確定使用2.5、2.0、1.8、1.5、1.0 mg·L-14個敵百蟲濃度梯度對鹿角珊瑚進行實驗.每2個一組分別放入實驗缸和對照缸.向?qū)嶒灲M中加入所需敵百蟲母液,將實驗組的濃度調(diào)整到所需濃度.記錄珊瑚狀態(tài),根據(jù)敵百蟲對櫛水虱的實驗結(jié)果,決定對珊瑚先進行24h觀察,記錄下珊瑚情況并拍照.后將實驗鹿角珊瑚清潔后放回原養(yǎng)殖缸中,觀察其生存狀態(tài).

    1.2.8 供試試劑殺蟲效果測定

    分別記錄A組,B組和C組各6、12、24、48h后寄生蟲的死亡個數(shù),取3次平均值,計算公式為:平均死亡率=(3組供試寄生蟲總數(shù)—3組剩余寄生蟲數(shù))/(3組供試寄生蟲總數(shù))×100%.

    2 結(jié)果與分析

    2.1 供試養(yǎng)殖環(huán)境水質(zhì)測定結(jié)果

    測定結(jié)果見表3.

    表3 供試養(yǎng)殖環(huán)境水質(zhì)測定結(jié)果Tab.3 The results of water quality of the coral husbandry exhibit

    2.2 敵百蟲對櫛水虱毒性研究結(jié)果(見表4)

    將A組、B組和C組求平均值后,將死亡個數(shù)同濃度梯度建立線性關(guān)系(見圖2).

    2.3 試驗時間內(nèi)櫛水虱死亡和存活狀態(tài)

    通過分析和觀察分別放置在實驗組和對照組的10只櫛水虱試驗時間內(nèi)死亡和存活情況,選取有明顯分辨的組別進行整理和分析,判斷在某一濃度下敵百蟲溶液能否有效地殺死寄生蟲(見表5).

    2.4 敵百蟲對鹿角珊瑚毒性研究結(jié)果

    敵百蟲對鹿角珊瑚毒性研究結(jié)果見表6.

    表4 三組敵百蟲對櫛水虱毒性刺激結(jié)果Tab.4 The results of three groups toxicity experiment

    圖2 敵百蟲對櫛水虱的試驗結(jié)果Fig.2 The results of toxicity experiment

    2.5 分析與討論

    據(jù)表3,珊瑚所需海水水質(zhì)環(huán)境是符合自然界珊瑚生存所適范圍,所以水體環(huán)境是試受珊瑚所適宜的.如圖3所示,在櫛水虱出現(xiàn)前后珊瑚的變化.當(dāng)相同的水環(huán)境下(如表3所示)在櫛水虱出現(xiàn)之前珊瑚狀態(tài)可見觸手完全伸展,色彩明艷,可鑒定為健康珊瑚.在櫛水虱出現(xiàn)之后珊瑚狀態(tài)可見觸手萎縮或珊瑚分泌腔液,表面有明顯的白化,1~2 d珊瑚即可見嚴重蛻皮,完全裸露白色骨骼,可鑒定珊瑚瀕臨死亡.

    據(jù)表4,確定24 h內(nèi),3.0、2.8、2.5、2.0、1.5 mg·L-1質(zhì)量濃度中的櫛水虱都基本死亡:完全麻痹,身體翻轉(zhuǎn),步足無法爬行和附著,只有尾部抽動,最終從被感染珊瑚體上脫落.如圖1所示,櫛水虱受藥前后對比.

    如圖2所示,36h內(nèi)絕大多數(shù)櫛水虱已經(jīng)死亡或已經(jīng)腐化消失,而含量為1.0 mg·L-1時,敵百蟲溶液對櫛水虱48 h內(nèi)基本沒有影響.從實驗結(jié)果可以看出,在含量為1.5~3.0 mg·L-1的敵百蟲溶液中,櫛水虱會在24 h內(nèi)基本死亡,從珊瑚上脫落.36 h內(nèi),所有櫛水虱會腐化,完全死亡.說明在此濃度間,敵百蟲溶液能有效地殺死寄生蟲櫛水虱.

    據(jù)表5,當(dāng)敵百蟲含量為1.5 mg·L-1到2.0 mg·L-1之間時,對珊瑚無影響.36 h內(nèi)(放回原缸中),當(dāng)含量為2.0 mg·L-1時,珊瑚在原缸中白化死亡.分析可能其受到了敵百蟲的影響,不能適應(yīng)原缸中的生存條件.而含量為2.5 mg·L-1時,珊瑚會在24 h內(nèi)死亡.從實驗結(jié)果可以看出,在含量為1.5 mg·L-1和1.8 mg·L-1的敵百蟲溶液中,鹿角珊瑚24h內(nèi)不會受到影響,并且在被放回原缸后的24 h后,也不會有白化現(xiàn)象.

    由表6,根據(jù)本次對寄生蟲櫛水虱和珊瑚的實驗結(jié)果,可以得出結(jié)論:當(dāng)敵百蟲溶液質(zhì)量濃度為1.5 mg·L-1和1.8 mg·L-1時,36h內(nèi)可有效使鹿角珊瑚附著的寄生蟲櫛水虱脫落,且對鹿角珊瑚的生長不造成任何影響.后將鹿角珊瑚移出放回原缸,24 h內(nèi)櫛水虱會腐化,而鹿角珊瑚則能繼續(xù)生存.

    危害生物櫛水虱屬于甲殼綱(Crustacea),等足目(Isopoda),櫛水虱亞目身體細長,2 mm-11 mm.有的種類具眼.其生存于海底表面或底內(nèi)[15-16].因為自然界珊瑚白化死亡的主要原因是全球氣候變化和人為破壞,可能寄生蟲這方面沒有引起足夠的重視,鮮見報道.由于在室內(nèi)循環(huán)水養(yǎng)殖環(huán)境下,沒有自然環(huán)境的影響,寄生蟲的危害就被凸顯出來.雖然國外珊瑚礁人工養(yǎng)殖資料已經(jīng)比較豐富[12],但是對珊瑚寄生蟲的報道極少;而國內(nèi)的珊瑚人工養(yǎng)殖更是還在起步階段,沒有對珊瑚寄生蟲的任何描述.本次實驗希望能為以后的研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù).

    表5 試驗時間內(nèi)死亡和存活情況Tab.5 The death and the servive during the experiment

    表6 敵百蟲對鹿角珊瑚毒性研究Tab.6 The results of toxicity experiment

    圖3 珊瑚狀態(tài)的變化Fig.3 The change of coral state

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