尾葉香茶菜化學(xué)成分研究

胡孝鵬，高原，王飛，劉守金*

(1.安徽中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院 安徽省現(xiàn)代中藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，安徽 合肥 230031；2.云南西力生物技術(shù)有限公司，云南 昆明 650204)

尾葉香茶菜化學(xué)成分研究

胡孝鵬1，高原2，王飛2，劉守金1*

(1.安徽中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院 安徽省現(xiàn)代中藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，安徽 合肥 230031；2.云南西力生物技術(shù)有限公司，云南 昆明 650204)

目的：研究唇形科植物尾葉香茶菜Rabdosiaexcisa地上部位的化學(xué)成分。方法：采用硅膠柱色譜、Sephadex LH-20凝膠柱色譜、反相硅膠柱色譜等柱層析方法進(jìn)行分離純化，依據(jù)化學(xué)方法和現(xiàn)代波譜技術(shù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果：從尾葉香茶菜地上部位分離得到9個(gè)單體化合物，分別鑒定為dayecrystal A(1)，acetylsventenic acid(2)，sventenic acid(3)，trichokaurin(4)，maoyerabdosin(5)，pedalitin(6)，syringic acid(7)，β-谷甾醇(8)和胡蘿卜苷(9)。結(jié)論：化合物1、2、3、4和5為首次從尾葉香茶菜植物中分離得到。

唇形科；尾葉香茶菜；地上部位；化學(xué)成分

尾葉香茶菜Rabdosiaexcisa是唇形科Labiatae香茶菜屬植物，主要分布在我國(guó)吉林、甘肅、遼寧、湖南、四川、云南、江西、廣東、廣西等省區(qū)[1]。中國(guó)最早記載其藥用價(jià)值及用法的書(shū)籍是1962年編印的內(nèi)部資料《揭陽(yáng)縣民間常用草藥簡(jiǎn)編》，但其中未記載其植物圖和學(xué)名，在民間作清熱解毒、抗癌消炎、健脾、活血、抗菌藥來(lái)使用約有30種[2]。人們對(duì)該屬植物的成分作了大量研究，已從中提取了近500種化學(xué)成分[3]。為了進(jìn)一步尋找該植物的生物活性成分，闡明其藥理作用的物質(zhì)基礎(chǔ)，課題組對(duì)尾葉香茶菜地上部位進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分研究。從尾葉香茶菜地上部位分得9個(gè)化合物，經(jīng)波譜分析和化學(xué)方法分別鑒定為dayecrystal A(1)，acetylsventenic acid(2)，sventenic acid(3)，trichoka-urin(4)，maoyerabdosin(5)，pedalitin(6)，syringic acid(7)，β-谷甾醇(8)和胡蘿卜苷(9)(見(jiàn)圖1)。其中，化合物1、2、3、4、5為首次從尾葉香茶菜植物中分離得到。

圖1 化合物1～7的結(jié)構(gòu)式

1 儀器和材料

Bruker DRX-500型核磁共振儀，以TMS為內(nèi)標(biāo)，F(xiàn)innigan-MAT 90質(zhì)譜儀。柱色譜硅膠(200～300目，青島海洋化工廠)；Sephadex LH-20(Amersham Biosciences公司)；反相硅膠C18(40～75 μm)(hemical公司)；尾葉香茶菜2011年10月采于安徽省六安市金寨縣湯家匯鎮(zhèn)香茶菜引種栽培基地，經(jīng)安徽中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院生藥教研室劉守金教授鑒定為唇形科香茶菜屬(Rabdosia)植物尾葉香茶菜Rabdosiaexcisa(Maxim.)Hara。

2 提取分離

將尾葉香茶菜地上部位12 kg粉碎后分別用75%，90%乙醇加熱回流提取3次，減壓回收溶劑得浸膏約430 g，分別用乙酸乙酯、正丁醇萃取。取乙酸乙酯萃取物(75 g)經(jīng)硅膠柱層析，以三氯甲烷-丙酮溶劑系統(tǒng)(20∶1，10∶1，8∶1，6∶1，4∶1，2∶1，1∶1)進(jìn)行梯度洗脫，每1 500 mL收集一個(gè)流分，用薄層色譜檢測(cè)，合并共得6個(gè)部分(1～6)。

部分1經(jīng)200～300目硅膠柱層析，以三氯甲烷-丙酮(200∶1，100∶1，50∶1，25∶1，10∶1)梯度洗脫，每個(gè)梯度300 mL，每個(gè)流分收集約50 mL，共收集10份，其中第5、6份析出白色結(jié)晶為化合物8(95 mg)。

部分2經(jīng)200～300目硅膠柱層析，以三氯甲烷-甲醇(200∶1～10∶1)梯度洗脫，每個(gè)梯度400 mL，每個(gè)流分收集約100 mL，共收集10份，其中第3～4份再經(jīng)硅膠柱層析以三氯甲烷-甲醇(200∶1～100∶1)梯度洗脫，經(jīng)TLC檢查后合并相同流分，分得化合物9(45 mg)；第6～9份再經(jīng)200～300目硅膠柱層析，以三氯甲烷-甲醇(150∶1～50∶1)洗脫后經(jīng)RP-18反相硅膠柱層析，以60%～100%甲醇/水純化，分別得到化合物1(12 mg)和2(4 mg)。

部分4經(jīng)200～300目硅膠柱層析，以三氯甲烷-甲醇(150∶1-10∶1)梯度洗脫，每個(gè)梯度400 mL，每個(gè)流分收集約100 mL，共收集5份，TLC檢查合并相同流分后經(jīng)RP-18反相硅膠柱層析，以70%～100%甲醇/水純化，分得化合物3(40 mg)。

部分5經(jīng)200～300目硅膠柱層析，以三氯甲烷-甲醇(100∶1～10∶1)梯度洗脫，每個(gè)梯度400 mL，每個(gè)流分收集約100 mL，共收集6份，經(jīng)TLC檢查，合并為2份。第1份放置一段時(shí)間經(jīng)甲醇過(guò)濾后析出白色粉末，為化合物5(500 mg);第2份經(jīng)Sephadex LH-20后，再上RP-18反相硅膠柱層析，以70%～100%甲醇/水純化，分得化合物4(419 mg)。

部分6經(jīng)200～300目硅膠柱層析，以三氯甲烷-甲醇(90∶1～10∶1)梯度洗脫，每個(gè)梯度400 mL，每個(gè)流分收集約100 mL，共收集5份，經(jīng)TLC檢查，合并為2份。分別經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱層析純化后，得到化合物6(35 mg)和7(48 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

3.1 化合物1

白色粉末，ESI-MSm/z:319[M-H]-，mp 173～175 ℃，分子式為C20H32O3；1H-NMR(500 MHz，C5D5N)δ:10.50(1H，s，H-20)，4.30(1H，s，H-14)，2.80(1H，dd，J=13.2 Hz，H-12α)，2.70(1H，dd，J=13.5 Hz，H-1α)，2.25(1H，brs，H-13)，1.49(1H，s，H-9)，1.26(1H，m，H-12β)，1.11(1H，dd，J=12.0 Hz，H-5)，0.54(1H，m，H-1)；13C-NMR(100 MHz，C5D5N)δ:33.5(t，C-1)，17.6(t，C-2)，41.8(t，C-3)，33.7(s，C-4)，54.5(d，C-5)，19.6(t，C-6)，23.8(t，C-7)，39.5(s，C-8)，59.6(d，C-9)，55.7(s，C-10)，19.6(t，C-11)，32.0(t，C-12)，54.4(d，C-13)，80.9(d，C-14)，55.4(t，C-15)，79.8(s，C-16)，23.8(q，C-17)，32.0(q，C-18)，20.8(q，C-19)，207.4(d，C-20)。以上理化常數(shù)和波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[4]報(bào)道的基本一致，鑒定為dayecrystal A。

3.2 化合物2

白色粉末，ESI-MSm/z:373[M-H]-，mp 194～196 ℃，分子式為C23H34O4；1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ:4.81(1H，s，H-17α)，4.74(1H，s，H-17β)，4.63(1H，brs，H-7)，2.69(1H，brs，H-13)，2.03(3H，s，Ac)，1.05(3H，s，H-19)，0.92(3H，s，H-20)；13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ:40.1(t，C-1)，18.6(t，C-2)，42.0(t，C-3)，47.0(s，C-4)，51.5(d，C-5)，27.2(t，C-6)，79.6(d，C-7)，49.4(s，C-8)，45.9(d，C-9)，39.3(s，C-10)，17.6(t，C-11)，33.3(t，C-12)，43.4(d，C-13)，39.5(t，C-14)，47.0(t，C-15)，154.4(s，C-16)，103.6(t，C-17)，183.6(s，C-18)，17.4(q，C-19)，15.9(q，C-20)，170.8(s，C-1′)，21.1(q，C-2′)。以上理化常數(shù)和波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[5]報(bào)道的基本一致，鑒定為acetylsventenic acid。

3.3 化合物3

白色粉末，ESI-MSm/z:331[M-H]-，mp 182～184 ℃，分子式為C21H32O3；1H-NMR(500 MHz，C5D5N)δ:4.93(1H，s，H-17α)，4.90(1H，s，H-17β)，3.72(1H，brs，H-7)，1.43(3H，s，H-19)，1.06(3H，s，H-20)；13C-NMR(125 MHz，C5D5N)δ：39.9(t，C-1)，18.3(t，C-2)，37.4(t，C-3)，47.6(s，C-4)，49.2(d，C-5)，31.4(t，C-6)，76.6(d，C-7)，51.0(s，C-8)，46.5(d，C-9)，39.0(s，C-10)，18.0(t，C-11)，33.9(t，C-12)，44.4(d，C-13)，38.8(t，C-14)，47.5(t，C-15)，156.2(s，C-16)，103.4(t，C-17)，181.2(s，C-18)，18.0(q，C-19)，17.4(q，C-20)。以上理化常數(shù)和波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[5]報(bào)道的基本一致，鑒定為sventenic acid。

3.4 化合物4

白色粉末，ESI-MSm/z:433[M-H]-，mp 161～163 ℃，分子式為C24H34O7；1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ:5.62(1H，s，H-15)，5.18(1H，d，J=6.8 Hz，H-6)，5.03(1H，d，J=1.6 Hz，H-17α)，4.89(1H，brs，H-17β)，3.92(2H，d，J=3.6 Hz，H2-20)，3.76(1H，s，1-OH)，3.56(1H，s，H-1)，2.57(2H，m，H2-2)，2.18和2.06(2×3H，s，2×OAc)，1.11(3H，s，H-18)，0.87(3H，s，H-18)；13C-NMR(125 MHz，CDCl3)δ:65.1(d，C-1)，27.6(t，C-2)，34.2(t，C-3)，34.0(s，C-4)，51.5(d，C-5)，76.2(t，C-6)，96.6(d，C-7)，51.4(s，C-8)，38.9(d，C-9)，41.3(s，C-10)，15.6(t，C-11)，28.3(t，C-12)，37.4(d，C-13)，32.5(t，C-14)，76.0(d，C-15)，160.4(s，C-16)，109.6(t，C-17)，33.6(q，C-18)，24.4(q，C-19)，66.9(t，C-20)，171.8(s，C-1′)，21.6(q，C-2′)，171.8(s，C-3′)，21.1(q，C-4′)。以上理化常數(shù)和波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[6]報(bào)道的基本一致，鑒定為trichokaurin。

3.5 化合物5

白色粉末，ESI-MSm/z：467[M-H]-，mp 244～246 ℃，分子式為C24H36O9；1H-NMR(500 MHz，C5D5N)δ:8.50(1H，s，7-OH)，5.87(1H，d，J=3.5 Hz，OH-1β)，5.74(1H，d，J=5.0 Hz，H-6α)，5.41(1H，s，16-OH)，4.50，4.37(1H，AB，d，J=11.0 Hz，H2-17)，4.42(1H，d，J=3.5 Hz，15β-OH)，4.18，4.07(1H，AB，d，J=9.5 Hz，H2-20)，3.73(1H，brs，H-1α)，3.23(1H，dd，J=6.0 Hz，H-9β)，2.27(1H，m，H-12β)，2.16(3H，s，OAc)，2.10(1H，m，H-3β)，2.07(1H，d，J=4.0 Hz，H-14β)，2.03(1H，d，J=6.5 Hz，H-11β)，1.98(1H，d，J=13.0 Hz，H-14α)，1.90(3H，s，OAc)，1.71(1H，m，H-11α)，1.68(1H，m，H-3α)，1.15(3H，s，H-18)，0.89(3H，s，H-19)；13C-NMR(125 MHz，C5D5N)δ:64.9(d，C-1)，27.3(t，C-2)，34.24(t，C-3)，33.6(s，C-4)，51.2(d，C-5)，75.4(d，C-6)，96.6(s，C-7)，53.0(s，C-8)，36.5(d，C-9)，41.0(s，C-10)，15.0(t，C-11)，19.7(t，C-12)，36.4(d，C-13)，25.7(t，C-14)，72.5(d，C-15)，78.2(s，C-16)，71.4(t，C-17)，32.2(q，C-18)，23.0(q，C-19)，65.4(t，C-20)，171.8(s，C-1′)，22.0(q，C-2′)，170.0(s，C-3′)，20.8(q，C-4′)。以上理化常數(shù)和波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7]報(bào)道的基本一致，鑒定為maoyerabdosin。

3.6 化合物6

黃色粉末，ESI-MSm/z:315[M-H]-，mp 301～302 ℃，分子式為C16H12O7；1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ:7.40(2H，m，H-2′、6′)，6.88(1H，d，J=8.0 Hz，H-5′)，6.80(1H，s，H-3)，6.60(1H，s，H-8)，3.89(3H，s，7-OCH3);13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ164.9(s，C-2)，103.0(d，C-3)，184.0(s，C-4)，151.2(s，C-5)，131.9(s，C-6)，156.6(s，C-7)，92.0(d，C-8)，153.0(s，C-9)，107.0(s，C-10)，124.0(s，C-1′)，114.7(d，C-2′)，146.4(s，C-3′)，150.7(s，C-4′)，116.5(d，C-5′)，120.2(d，C-6′)，57.4(q，7-OCH3)。以上理化常數(shù)和波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]報(bào)道的基本一致，鑒定為pedalitin。

3.7 化合物7

黃色粉末，ESI-MSm/z:197[M-H]-，mp 204～206 ℃，分子式為C9H10O5；1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ:7.40(2H，s，H-2，6)，3.85(3H，s，-OCH3)，6.80(1H，s，H-3)，6.60(1H，s，H-8)，3.89(3H，s，7-OCH3)；13C-NMR(125 MHz，CDCl3)δ120.9(s，C-1)，107.0(d，C-2，6)，140.7(s，C-3，5)，147.2(s，C-4)，171.9(s，COOH)，56.6(q，OCH3)。以上理化常數(shù)和波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]報(bào)道的基本一致，鑒定為syringic acid。

3.8 化合物8

無(wú)色針晶。與β-谷甾醇標(biāo)準(zhǔn)品共薄層層析，Rf值一致；對(duì)照氫譜數(shù)據(jù)一致，故鑒定為β-谷甾醇。

3.9 化合物9

白色粉末。與胡蘿卜苷標(biāo)準(zhǔn)品共薄層層析，Rf值一致；對(duì)照氫譜數(shù)據(jù)一致，故鑒定為胡蘿卜苷。

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StudiesontheChemicalConstituentsofRabdosiaexcisa

HU Xiao-peng1, GAO Yuan2, WANG Fei2, LIU Shou-jin1*

(1.AnhuiCollegeofTraditionalChineseMedicine,AnhuiKeyLaboratoryofModernizedChineseMateriaMedica,Hefei230031,China；2.BioBioPhaCo.,Ltd.,Kunming650204,China)

Objective：To study the chemical constituents of the aerial parts ofRabdosiaexcisa.Methods: The compounds were isolated and purified by silica gel column chromatography and their structures were established on the basis of modern spectroscopic analysis.Results: 9 compounds isolated from the aerial parts of this plant were identified as: dayecrystal A (1), acetylsventenic acid (2), sventenic acid (3), trichokaurin (4), maoyerabdosin (5)，pedalitin (6)，syringic acid (7),β-sitosterol (8) and daucosterol (9).Conclusion: It is the frist time that compound 1, 2, 3, 4 and 5 were isolated fromRabdosiaexcisa.

Labiatae;Rabdosiaexcisa; Aerial parts; Chemical constituents

2012-11-05)