香陳膠囊薄層色譜鑒別及其浸出物的測定

張霄岳，梁寶軍，尹文英

(山東省鄒平縣中醫(yī)院，山東 濱州 256200)

香陳膠囊由香附、陳皮、延胡索、白芍、白術等組方，經水提醇沉、濃縮、減壓干燥、濕法制粒等一系列工藝處理后制成，具有疏肝理氣、通經止痛的功效，用于肝氣郁結所致的乳癖、乳癰初起，癥見乳房脹痛、乳房結節(jié)、經前疼痛加重，以及乳腺增生、急性乳腺炎初期見上述證候者。為有效控制產品質量，對其質量標準進行了研究，增加了香附、陳皮、延胡索、白芍、白術等5味藥的薄層色譜鑒別方法，并確立了其浸出物的測定方法，為建立質量標準提供了基礎。

1 儀器與試藥

FA2004型電子天平;TD－Ⅰ型手動薄層鋪板機;ZF－Ⅰ型三用紫外分析儀;202型電熱干燥箱;JCX－250G型超聲波清洗機。香附對照藥材(批號 121059－200706)、白術對照藥材(批號120925－201109)、橙皮苷對照品(批號 110721－201014)、延胡索乙素對照品(批號 110726－201112)、芍藥苷對照品(批號110736－201035)均由中國食品藥品檢定研究院提供;硅膠GF254、硅膠G(青島海洋化工有限公司);其他試劑均為分析純;香陳膠囊(本院制劑室提供，批號 20100509，20100510，20100511，20100212，20100601，20100602，20100603，20100604，20100605，20100606，20101210，20101211，20101212)。

2 方法與結果

2.1 定性鑒別[薄層色譜(TLC)法]

香附:取本品3 g，研細，加乙醚30 mL，超聲處理20 min，濾過，濾液揮干，殘渣加乙醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。取不含香附的陰性樣品，同法制備陰性對照品溶液。另取香附對照藥材0.5 g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法[1]試驗，吸取上述3種溶液各10 μL，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以甲苯－乙酸乙酯(9∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254 nm)下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應位置上顯相同顏色的熒光主斑點，陰性對照無干擾(見圖1 A)。

陳皮:取本品3 g，研細，加水30 mL，超聲處理20 min，放冷，濾過，濾液用乙酸乙酯振搖提取3次，每次20 mL，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。取缺陳皮的陰性樣品，同法制成陰性對照品溶液。另取橙皮苷對照品，加甲醇制成飽和溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法[1]試驗，吸取供試品溶液及陰性對照品溶液各10 μL、對照品溶液5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷－甲醇－水(32∶17∶5)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%三氯化鋁甲醇溶液，在105℃加熱2～3 min，置紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜相應位置上顯相同顏色的熒光斑點，陰性對照無干擾(見圖1 B)。

延胡索:取本品3 g，研細，加濃氨試液1 mL，使?jié)駶?，加三氯甲?0 mL，超聲處理20 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。取缺延胡索的陰性樣品，同法制成陰性對照品溶液。另取延胡索乙素對照品，加乙醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法[1]試驗，吸取上述3種溶液各5 μL，分別點于同一用1%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以正己烷－三氯甲烷－甲醇(8∶4∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置碘蒸氣中熏至斑點顯色清晰，取出揮盡板上吸附的碘，置紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜相應位置上顯相同顏色的熒光斑點，陰性對照無干擾(見圖 1 C)。

白芍:取本品3 g，研細，加乙醇30 mL，超聲處理20 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20 mL溶解，用以水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次20 mL，合并正丁醇液，用水洗滌2次，每次10 mL，棄去水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣加乙醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。取缺白芍的陰性樣品，同法制成陰性對照品溶液。另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法[1]試驗，吸取供試品溶液及陰性對照品溶液各10 μL、對照品溶液5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷－乙酸乙酯－甲醇－甲酸(40∶5∶10∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜相應位置上顯相同顏色的斑點，陰性對照無干擾(見圖1 D)。

白術:取本品3 g，研細，加水30 mL使溶解，超聲處理20 min，放冷，離心，取上清液，用乙酸乙酯振搖提取3次，每次20 mL，合并乙酸乙酯液，加無水硫酸鈉適量，濾過，濾液濃縮至1 mL，作為供試品溶液。取缺白術的陰性樣品，同法制成陰性對照品溶液。另取白術對照藥材0.5 g，加水20 mL，超聲處理20 min，放冷，濾過，取濾液，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法[1]試驗，吸取上述3種溶液各10 μL，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以環(huán)己烷－乙酸乙酯(1∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，氨蒸氣中熏后，置紫外光燈(254 nm)下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應位置上顯相同顏色的斑點，陰性對照無干擾(見圖 1E)。

圖1 薄層色譜圖

2.2 浸出物限量檢查

取按同一工藝規(guī)程制備的香陳膠囊樣品，照醇溶性浸出物測定法[1]項下的熱浸法測定，用65%乙醇作溶劑。取供試品約3 g，精密稱定，置100 mL的錐形瓶中，精密加65%乙醇50 mL，塞緊，稱定質量，靜置1 h后，連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸1 h。放冷后，取下錐形瓶，密塞，再稱定質量，用65%乙醇補足減失的質量，搖勻，用干燥濾器濾過，精密量取濾液25 mL，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3 h，置干燥器中冷卻30 min，迅速精密稱定質量，以干燥品計算供試品中醇溶性浸出物的含量(%)。10批樣品醇溶性浸出物測定結果平均值為35.9%，結果見表1。在實際配制中，因不同批次的藥材質量有差異等原因，會造成制劑成品浸出物測定結果隨產品批次不同而有差異，因此暫定香陳膠囊的浸出物標準為，照醇溶性浸出物測定法[1]項下的熱浸法測定，用65%乙醇作溶劑，不得少于32.0%。

表1 10批樣品醇溶性浸出物測定結果(%)

3 討論

香附、陳皮、白芍、延胡索、白術均為香陳膠囊中主要藥味，橙皮苷、延胡索乙素，芍藥苷均為其主要成分。為全面提高制劑質量標準，擬訂了香附、陳皮、延胡索、白芍、白術的薄層色譜鑒別，建立了專屬性強、操作簡便、快速準確的質量控制方法。限于基層醫(yī)院條件，依據(jù)照醇溶性浸出物測定法對香陳膠囊進行測定研究，對浸出物限量作了規(guī)定，結果準確可靠，可以作為產品的質量控制方法。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:附錄ⅥB，附錄ⅩA.