不同炮制方法對(duì)大黃有效成分的影響研究

葛亞寧 魏寶林 董明芝 劉 紅 單 敏 鄭方曄 西安正大制藥有限公司（西安710043）

大黃是指蓼科植物掌葉大黃（北大黃）、唐古特大黃或藥用大黃（南大黃）的干燥根及根莖。具有瀉下攻積、清熱瀉火、解毒、活血化瘀的功效［1］。主要是以蒽醌及其衍生物和游離苷元（如大黃酸、大黃素等）為主的一大類化合物［2］。

炮制方法的不同，導(dǎo)致大黃的有效成分發(fā)生變化，甚至改變其藥理作用和臨床治療效果，若不能正確掌握和應(yīng)用其炮制品，甚至?xí)a(chǎn)生毒副作用。《中國(guó)藥典》2010版一部中有11個(gè)處方含大黃的系列品種［3］，大黃在分清五淋丸方中起消炎作用，因此測(cè)定其游離蒽醌含量；大黃清胃丸等10個(gè)品種中大黃在方中起瀉下作用，因此測(cè)定其結(jié)合蒽醌含量。筆者就常用的大黃飲片（生大黃、熟大黃、酒大黃）的炮制方法對(duì)其化學(xué)成分的影響展開研究，以期為制藥企的業(yè)生產(chǎn)提供參考依據(jù)。

1 儀器與試藥 AgiLent 1260 高效液相色譜儀，MettLer ToLedo MS－105 分析天平，DHM 滅菌柜，大黃藥材（甘肅，批號(hào)120201、120302、120403、120504），對(duì)照品：大黃素、大黃酚、大黃酸、蘆薈大黃素、大黃素甲醚（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)分別為110756－201002、110796－201010、110757－201006、110795－200904、L10758－200509），甲醇為色譜純，水為三蒸水。

2 方法與結(jié)果 2.1 炮制方法 生大黃（a）：取大黃藥材洗凈，加水適量，淋潤(rùn)致軟，切塊或片，低溫干燥或晾干，篩去碎屑。

熟大黃：炮制方案1（b）：取大黃塊或片揀去雜質(zhì)，洗凈悶潤(rùn)10～12h，按10：3比例拌入黃酒拌勻，放入滅菌柜內(nèi)，溫度控制在100℃，保溫2h，停止加熱。放涼取出，置烘箱內(nèi)80℃以下干燥。

炮制方案2（c）：取大黃塊或片揀去雜質(zhì)，洗凈悶潤(rùn)10～12h，切厚片；將大黃厚片置于不銹鋼盒內(nèi)繼續(xù)加水悶潤(rùn)至無(wú)干心時(shí)，于20～30℃的條件下放置10～12h，按10：3比例加入黃酒拌勻，放入滅菌柜內(nèi)，溫度控制在100℃，保溫2h，停止加熱。放涼取出，置烘箱內(nèi)80℃以下干燥，片面呈黑褐色。

酒大黃（d）：取大黃塊或片，按10∶1比例加入黃酒，噴淋拌勻，稍悶，待酒吸盡，置炒制容器內(nèi)，文火炒干，待色加深，取出晾干，篩去碎屑。

2.2 HPLC 法測(cè)定大黃中有效成分［3］2.2.1色譜條件：參考《中國(guó)藥典》2010年版一部大黃項(xiàng)下，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動(dòng)相為甲醇－0.1%磷酸溶液（85：15）；檢測(cè)波長(zhǎng)為254.nm。理論板數(shù)按大黃素峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。

2.2.2對(duì)照品溶液的制備：精密稱取蘆薈大黃素對(duì)照品、大黃酸對(duì)照品、大黃素對(duì)照品、大黃酚對(duì)照品、大黃素甲醚對(duì)照品適量，加甲醇分別制成每1mL含蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚各80μg，大黃素甲醚40μg 的溶液；分別精密量取上述對(duì)照品溶液各2mL，混勻，即得。

2.2.3 供試品溶液的制備：分別取上述飲片粉末（過四號(hào)篩）約0.15g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25mL，稱定重量，加熱回流1h，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液5mL，置燒瓶中，揮去溶劑，加8%鹽酸溶液10mL，超聲處理2min，再加三氯甲烷10mL，加熱回流1h，放冷，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗滌容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷層，酸液再用三氯甲烷提取3次，每次10mL，合并三氯甲烷液，減壓回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状际谷芙?，轉(zhuǎn)移至10mL 量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：用以上色譜條件分別測(cè)定幾種大黃飲片中的有效成分含量，結(jié)果見表1。

表1 大黃炮制后有效成分含量變化表

從上表數(shù)據(jù)可以看出，經(jīng)過不同方法炮制的大黃飲片，總含量無(wú)明顯變化，結(jié)合蒽醌含量：酒大黃＞生大黃＞熟大黃1＞熟大黃2，游離蒽醌含量：熟大黃2＞熟大黃1＞酒大黃＞生大黃。

3 討 論 大黃經(jīng)不同的炮制，總含量無(wú)明顯變化，結(jié)合蒽醌與游離蒽醌隨著炮制方法的不同含量變化較大。生大黃挑揀、淘洗、烘干、粉碎后含量均有下降，變化較小，在合理的范圍內(nèi)。熟大黃在加工過程中悶潤(rùn)時(shí)間、溫度、加水量可直接影響熟大黃的炮制質(zhì)量。酒大黃在加工過程中直接用黃酒悶潤(rùn)效果較理想。大黃經(jīng)炮制后不僅是以前認(rèn)為的苷類水解及所含成分平行下降，而且發(fā)生了復(fù)雜的化學(xué)變化，原藥材中成分比例重新組合，從而導(dǎo)致療效、藥性發(fā)生變化。因此，要根據(jù)病情的不同選擇合適的大黃飲片入藥。

［1］ 張懷陽(yáng)，張丹陽(yáng).大黃不同炮制品的臨床應(yīng)用［J］.醫(yī)藥信息，2011，（09）：4960.

［2］ 袁常青，邢 亮.大黃的炮制及其藥理分析［J］.中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2011，4（9）：122.

［3］ 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典［M］.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010：22.