依普利酮片的有效成份檢測

夏宇洪

【摘 要】采用HPLC方法測定依普利酮片的含量。方法：采用KromasilC18（250mm×4.6mm，5μm），以乙腈-水（30：70）為流動相，檢測波長244nm，流速為1ml/min。結(jié)果 依普利酮在20.144～201.440μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，方法平均回收率為98.7%（RSD=0.63%）。結(jié)論 該方法簡便可靠，可用于依普利酮片的質(zhì)量控制。

【關(guān)鍵詞】依普利酮片；高效液相色譜法；測定

依普利酮（Eplerenone）為由輝瑞/法瑪西亞公司聯(lián)合開發(fā)的第一個獲準上市的新型選擇性醛固酮受體阻斷劑，具有對醛固酮受體選擇性強、降壓效果好、作用持久等優(yōu)點，并或逆轉(zhuǎn)、減輕醛固酮受體對心血管的許多不利影響，這對控制高血壓、預(yù)防與靶器官損害相關(guān)的心血管疾病、改善高血壓患者的防均有重要意義。為有效地控制本品質(zhì)量，本文采用HPLC法測定依普利酮的含量，結(jié)果表明，本法簡便準確。

1.儀器與試藥

LC-10AT島津高效液相色譜儀（日本島津公司）。

依普利酮原料藥（批號：20061116）、依普利酮對照品（批號：20061122，含量99.8%）均由本院合成室提供；依普利酮片（批號分別為：20070109、20070110、20070112，規(guī)格：25mg）由本院制劑室提供；乙腈為色譜純；其他試劑均為分析純。

2.方法與結(jié)果

2.1檢測波長的確定

取本品，加流動相溶解并稀釋制成每1ml含10μg的溶液，照紫外-可見分光光度法，在200～400nm波長處掃描。本品在244nm波長處有最大吸收。

2.2色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗

色譜柱Kromasil C18（250mm×4.6mm， 5μm）；流動相 乙腈-水（30：70）；流速1.0ml/min；檢測波長244nm；進樣量20μl；柱溫為20℃。在上述色譜條件下，按依普利酮峰計算理論板數(shù)不低于2000。

2.3線性試驗

取依普利酮對照品適量，精密稱定，用流動相溶解并稀釋制成每1ml含20.144、60.432、100.720、141.008與201.440μg的溶液，分別取上述各溶液20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以依普利酮濃度（C）對峰面積A進行線性回歸，得回歸方程A=8720.9C+354.33（r=0.9999），結(jié)果表明，依普利酮溶液濃度在20.144～201.440μg/ml范圍內(nèi)，進樣量與峰面積線性關(guān)系良好。

2.4空白試驗

精密稱取空白輔料適量（約140mg），置100ml量瓶中，用流動相振搖并稀釋至刻度，取續(xù)濾液適量，按"2.7"項方法操作，記錄色譜圖。在依普利酮的保留時間處未有雜質(zhì)峰，故輔料不干擾測定。

2.5精密度與穩(wěn)定性

取同一批號樣品（批號：20070109）的供試品溶液，重復(fù)性進樣6次，測得依普利酮的含量的RSD為0.39%。

取同一批號樣品（批號：20070109）的供試品溶液，分別于0、2、4、6與8h進樣，測得其平均峰面積為875427（RSD=0.21%），結(jié)果表明，依普利酮供試品溶液在8h內(nèi)穩(wěn)定。

2.6回收率試驗

按處方配比精密稱取空白輔料140mg，共9份，分別置100ml量瓶中，其中3份各精密加入依普利酮對照品20mg，3份各精密加入依普利酮對照品25mg，3份各精密加入依普利酮對照品30mg，同法配制供試品溶液。照含量測定方法測得平均回收率為98.7%（RSD=0.63%）。

2.7樣品測定

取本品20片，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當(dāng)于125mg），置25ml量瓶中，加流動相適量，振搖，使溶解，并加流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5ml置25ml量瓶中，加流動相定容至刻度，搖勻，作為供試品溶液，精密量取20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取依普利酮對照品適量，精密稱定，同法測定，按外標法以峰面積計算依普利酮的含量，3批樣品依普利酮的含量分別為99.4%、99.0%及99.7%，RSD分別為0.7%、0.9%和0.5%（n=3）。

3.討論

本品采用液相色譜法與分光光度法檢測依普利酮的含量結(jié)果基本一致，但液相色譜法重現(xiàn)性好，更為準確。

本品經(jīng)6個月的加速試驗（40℃±2℃，RH75%±5%）與12個月的長期留樣考察（25℃±2℃，RH60%±10%），有關(guān)物質(zhì)、溶液的pH與含量均未發(fā)現(xiàn)明顯變化，試驗結(jié)果表明本品在此條件下貯存較穩(wěn)定。

【參考文獻】

[1]周明慧，陳清江，孫國棟.依普利酮治療高血壓研究進展.中國實用醫(yī)藥雜志，2004，4（24）：2279.

[2]國家藥典委員會.中國藥典，2005年版.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005，附錄ⅤD：28.