郁李微型繁殖技術(shù)研究

宋洪文，周 鑫

（黑龍江林業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，黑龍江 牡丹江 157011）

1 引言

郁李（PrunusjaponicaThunb）屬薔薇科、櫻屬。落葉灌木，高約1.5m，小枝纖細，葉卵圓形，長3～7cm，寬1.5～2.5cm，先端漸尖，基部圓形，邊緣有淺重鋸齒，花先于葉或與葉同時開放，花梗長5～10mm，花直徑約2cm，倒卵形，花瓣粉紅色或近白色，核果近球形，直徑約1cm，暗紅色，光滑而有光澤，花期3～5月，是園林中重要的觀花、觀果樹種，常與棣棠、迎春等其他花木配植，也可作花籬栽植。郁李常規(guī)用種子繁殖，花色變化大，花色的不確定性加大了植物配置難度，限制了郁李的使用，而微型繁殖技術(shù)不但可以快速繁殖，同時使花色穩(wěn)定，利于園林利用。

2 材料與方法

2.1 材料

選取健壯的枝條，用飽滿而未萌發(fā)的側(cè)芽作為外植體，切成小段，每段長2～3cm。每段帶有1個側(cè)芽，用自來水沖洗15min，在無菌條件下用75%的酒精消毒30s，再用0.1%升的汞消毒7～8min，最后用無菌水沖洗6～8遍，在超凈工作臺上把它們接種于不同的培養(yǎng)基上。

2.2 方法

2.2.1 側(cè)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)

以MS為基本培養(yǎng)基，不同種類、濃度的生長調(diào)節(jié)劑組合形成1～48號側(cè)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基（表1），將外植體接種于不同的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)2周后，觀測生長情況。

表1 不同生長調(diào)節(jié)劑組合培養(yǎng)基編號

2.2.2 增殖培養(yǎng)

根據(jù)2.2.1實驗結(jié)果，將誘導(dǎo)培養(yǎng)中高達到1cm的側(cè)芽，接種于以MS為基本培養(yǎng)基，KT濃度分別為2.0mg／L、2.5mg／L、3.0mg／L、3.5mg／L、4.0mg／L，IBA濃度分別為0.1mg／L、0.5mg／L、1.0mg／L、1.5 mg／L的叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，培養(yǎng)2周后，觀測生長情況。

2.2.3 生根培養(yǎng)

將誘導(dǎo)培養(yǎng)中高達到1cm的側(cè)芽，接種于以1／2 MS為基本培養(yǎng)基，KT濃度分別為0.1mg／L、0.2mg／L、0.4mg／L，IBA濃度分別為0.5mg／L、1.0mg／L、1.5mg／L的生根培養(yǎng)基上，培養(yǎng)2周后，觀測生長情況。

3 結(jié)果與分析

3.1 側(cè)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)

外植體在不同的側(cè)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基生長15d，每種培養(yǎng)基隨機抽取10個樣本，統(tǒng)計分析誘導(dǎo)率結(jié)果，從表2可以看出NAA對側(cè)芽誘導(dǎo)結(jié)果有一定影響，但差異不顯著；IBA對側(cè)芽誘導(dǎo)結(jié)果有顯著影響，以0.1mg／L最好，0.5mg／L次之，1.0mg／L最差；BA 對側(cè)芽誘導(dǎo)結(jié)果有顯著影響；KT對側(cè)芽誘導(dǎo)結(jié)果有極顯著影響；NAA×BA的交互作用對側(cè)芽誘導(dǎo)不顯著；NAA×KT和IBA×BA的交換作用對側(cè)芽誘導(dǎo)均顯著；IBA×KT交換作用對側(cè)芽誘導(dǎo)極顯著。IBA與KT組合好于其他組合，從圖1可以看出IBA與KT組合的28號培養(yǎng)基側(cè)芽誘導(dǎo)率最高，達到87.9%，即 MS＋KT1.5＋IBA0.1側(cè)芽誘導(dǎo)效果最好。

表2 不同培養(yǎng)基側(cè)芽誘導(dǎo)率方差分析結(jié)果

圖1 不同培養(yǎng)基平均側(cè)芽誘導(dǎo)率統(tǒng)計

3.2 叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)

隨機抽取培養(yǎng)基樣品各40個，統(tǒng)計分析叢生芽有效（不含玻璃化或形成愈傷組織的芽）增值率（表3），KT濃度變化對叢生芽有效增值率影響顯著（P＜0.05），KT促進芽分化效果顯著（P＜0.05），過高濃度KT產(chǎn)生玻璃化或形成愈傷組織，使叢生芽有效增值率降低；IBA促進芽生長作用顯著（P＜0.05），在同一KT濃度下，隨著IBA濃度的升高芽的高生長加大，增值率降低，而 KT在3.0mg／L，IBA 0.10mg／L有效增值率最高，因而最佳叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS＋KT3.0mg／L＋IBA0.1mg／L，有效增值率5.9。

表3 不同培養(yǎng)基側(cè)芽有效增值率方差分析

3.3 生根培養(yǎng)

隨機抽取不同培養(yǎng)基各40個樣品，統(tǒng)計有效根發(fā)生率（表4），IBA促進生根效果顯著（P＜0.05），濃度低于1.0mg／L時隨著濃度增加促進生根效果明顯，濃度大于1.0mg／L時，形成愈傷組織、出現(xiàn)玻璃化現(xiàn)象增加，因而隨著濃度增加有效根數(shù)量減少；KT抑制根的發(fā)生，隨著濃度的增加有效生根率較低。最佳根誘導(dǎo)培養(yǎng)基為1／2MS＋IBA0.5，生根率達85%。

表4 不同培養(yǎng)基有效生根率方差分析

4 結(jié)語

郁李微型繁殖誘導(dǎo)側(cè)芽分化最佳培養(yǎng)基：MS＋KT1.5＋IBA0.1mg／L，誘導(dǎo)率達到87.9%；叢生芽誘導(dǎo)最佳培養(yǎng)基：MS＋KT3.0mg／L＋IBA0.1mg／L，增值率為5.9；生根最佳培養(yǎng)基：1／2MS＋IBA0.5mg／L，生根率85%。

［1］周以良，董世林，聶紹荃.黑龍江樹木志［M］.哈爾濱：黑龍江科技出版社，1986.

［2］譚文澄，戴策剛.觀賞植物組織培養(yǎng)技術(shù)［M］.北京：中國林業(yè)出版社，1991.

［3］谷瑞升，蔣湘寧.植物離體培養(yǎng)器官發(fā)生調(diào)控機制的研究進展［J］.植物學(xué)通報，1999（3）：238～294.