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    回春丹的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)初步研究

    2013-03-02 10:10:04黃敏
    中國民族民間醫(yī)藥 2013年5期
    關(guān)鍵詞:木香浸出物鉤藤

    黃敏

    廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬瑞康醫(yī)院,廣西 南寧 530003

    回春丹系兒科較常用的中成藥。具清熱定驚,祛風(fēng)祛痰之功效,臨床上用于小兒驚風(fēng),感冒發(fā)熱,嘔吐腹瀉,咳嗽氣喘等癥,療效確切。收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第二冊[1]。處方由麝香、川貝母、全蝎、僵蠶、半夏、鉤藤、膽南星、木香、豆蔻、檀香、沉香、枳殼、甘草、朱砂、大黃、麥芽、槐花等32味藥材組成。其中槐花、車前子、側(cè)柏葉、厚樸等14味加水煎煮,濾液濃縮干燥粉碎成浸膏粉。麝香、半夏、大黃等18味藥材粉碎成粉末。兩者混勻,用水泛丸制成。原標(biāo)準(zhǔn)中只有性狀和檢查項(xiàng)目。為更好的控制藥品質(zhì)量我們對其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研究。采用顯微鑒別方法可檢出處方中的川貝母、豆蔻、檀香、甘草、全蝎、僵蠶、朱砂等7味,薄層色譜法可檢出鉤藤、木香、大黃等3味,同時(shí)增加[浸出物]測定,較好地控制了本品的質(zhì)量。現(xiàn)將試驗(yàn)方法與結(jié)果報(bào)道如下。

    1 儀器、試藥與樣品

    OLYMPUS生物顯微鏡、全自動式顯微照相儀,日本.奧林巴斯光學(xué)工業(yè)株式會社;0.3%氫氧化鈉羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板,作者自制;硅膠G薄層板、羧甲基纖維素鈉為黏合劑硅膠G薄層板,煙臺市化學(xué)工業(yè)研究所;化學(xué)試劑均為分析純,大黃酚對照品,鉤藤、木香、大黃對照藥材均為中國藥品生物制品檢定所;回春丹樣品為廣西某制藥有限公司生產(chǎn);陰性樣品為作者按本品處方、比例、工藝、方法制成。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 顯微鑒別 取本品粉末少許,用水裝片,置顯微鏡下觀察淀粉粒特征。取本品粉末加適量水,攪拌溶解,離心2次,取沉淀物,用水合氯醛裝片加熱透化,置顯微鏡下觀察其他組織特征。

    淀粉粒廣卵形、長圓形、腎形、橢圓形或貝殼形,直徑40~64μm,臍點(diǎn)短縫狀、人字形或馬蹄形層紋隱約可見,為川貝母的顯微特征 (圖1);內(nèi)種皮石細(xì)胞黃棕色或棕紅色,表面觀類多角形,壁厚,胞腔內(nèi)含硅質(zhì)塊,為豆蔻的顯微特征 (圖2);厚壁細(xì)胞長方形或類方形,直徑約45μm,木化,胞腔內(nèi)含草酸鈣方晶1~2塊,為檀香的顯微特征 (圖3);纖維成束,壁厚,微木化,薄壁細(xì)胞含草酸鈣方晶,形成晶纖維,為甘草的顯微特征 (圖4);體壁碎片淡黃色至黃色或綠黃色,表面有小圓孔、網(wǎng)狀紋理或圓形毛窩,有時(shí)可見棕褐色剛毛,為全蝎的顯微特征 (圖5);體壁碎片無色或淡黃色,表面有極細(xì)的菌絲體,為僵蠶的顯微特征 (圖6);不規(guī)則細(xì)小顆粒,暗棕紅色,有光澤,邊緣暗黑色,為朱砂的顯微特征 (圖7);

    2.2 薄層色譜鑒別

    2.2.1 鉤藤的薄層鑒別 取本品10 g,研細(xì),加80%乙醇100ml,加熱回流30分鐘,濾過,濾液蒸干,殘?jiān)?%鹽酸溶液10 ml使溶解,濾過,濾液用氨試液調(diào)節(jié)pH值至10,用氯仿振搖提取2次,每次10ml,合并氯仿液,蒸干,殘?jiān)勇确?.5ml使溶解,作為供試品溶液。另取鉤藤對照藥材3g,同法制成對照藥材溶液。再取缺鉤藤陰性樣品10g,同法制成缺鉤藤陰性溶液。照薄層色譜法試驗(yàn),吸取上述三種溶液各10~15μl,分別點(diǎn)于同一 以0.3%氫氧化鈉羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上,以二氯甲烷一丙酮一甲醇一濃氨試液 (10:16:0.5:0.1)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以稀碘化鉍鉀試液。供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的橙紅色斑點(diǎn),陰性對照無干擾 (見圖8)。

    2.2.2 木香的薄層鑒別 取本品10g,研細(xì),加石油醚(30~60℃)30ml,加熱回流30分鐘,濾過,濾液揮干,殘?jiān)哟姿嵋阴?ml使溶解,作為供試品溶液。另取木香對照藥材0.5g,同法制成對照藥材溶液。再取缺木香樣品10g,同法制成缺木香陰性溶液。照薄層色譜法試驗(yàn),吸取上述供試品溶液10~15μl,對照藥材溶液2~5μl分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上,以環(huán)己烷-丙酮 (10∶3)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以5%香草醛硫酸溶液,在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的藍(lán)色斑點(diǎn)。陰性對照無干擾 (見圖9)。

    2.2.3 大黃的薄層鑒別 取大黃對照藥材0.1g,加石油醚(30~60℃)30ml,加熱回流30分鐘,濾過,濾液揮干,殘?jiān)哟姿嵋阴?ml使溶解,作為對照藥材溶液。另取大黃酚對照品,加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液,作為對照品溶液。再取缺大黃陰性樣品粉末10g,同法制成缺大黃陰性溶液。照薄層色譜法 (中國藥典2010年版一部附錄ⅥB)試驗(yàn),吸取【木香鑒別】項(xiàng)下供試品溶液及上述對照藥材溶液、對照品溶液各5μl,分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上,以石油醚 (30~60℃)-甲酸乙酯-甲酸 (15∶5∶1)的上層溶液為展開劑,展開,取出,晾干,置紫外光燈 (365nm)下檢視。供試品色譜中,在與對照藥材及對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的黃色熒光斑點(diǎn)。陰性對照無干擾 (見圖10)。

    2.3 [浸出物]測定 乙醇浸出物。精密稱取本品粉末約3g,置250ml的錐形瓶中,精密加入乙醇100ml,塞緊,稱定重量,靜置1小時(shí)后,連接回流裝置,加熱至沸騰,并保持微沸1小時(shí)。放冷后,取下錐形瓶,密塞,稱定重量,用乙醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,用干燥濾器濾過。精密量取濾液25ml,置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中,在水浴上蒸干后,于105℃干燥3小時(shí),移置干燥器中,放置30分鐘,迅速精密稱定重量,以干燥品計(jì)算。經(jīng)測定本品6批的乙醇浸出物含量分別見下表。

    批號 A-01 A-02 A-03 A-04 A-05 A-06 平均值(%)乙醇浸出物(%)17.16 16.53 15.45 15.54 15.37 15.25 15.88

    考慮到本品藥味多,乙醇浸出物含量會因各原料藥材的產(chǎn)地、采收季節(jié)、加工方法的不同,有一定變化差異,故暫擬定本品乙醇浸出物不得少于15.0%。

    3 討論

    本品川貝母、全蝎、僵蠶、豆蔻、檀香、甘草、朱砂等7味藥材的顯微特征,經(jīng)過6批次樣品的觀察,專屬性強(qiáng)。本品試驗(yàn)中,還能觀察到草酸鈣針晶,為天麻、半夏、膽南星等共有特征,因?qū)傩圆粡?qiáng),不收入正文中。觀察到大黃的草酸鈣簇晶特征,但因草酸鈣簇晶分布量極少,在顯微鏡下較難觀察到,同時(shí)薄層鑒別中已有大黃的鑒別,故不將大黃粉末特征收入正文中。在鉤藤薄層色譜試驗(yàn)中,曾選用過二氯甲烷-甲醇-濃氨試液 (4∶1∶0.1)、二氯甲烷-甲醇 (23∶1)等展開劑,展開,但效果不理想。在薄層鑒別試驗(yàn)過程中,曾參考中國藥典2010年版及有關(guān)文獻(xiàn)的方法,對方中麝香、牛黃、天麻、半夏、膽南星、檀香、沉香、枳殼、陳皮、甘草、槐花、香附等10多味藥材,采用過不同的溶劑,不同的提前方法,不同的展開劑、顯色劑進(jìn)行摸索,因本品復(fù)方藥味太多,有的主斑點(diǎn)不清晰,或陰性有干擾,未獲得理想效果,無法收入正文中。曾采用高效液相法對本品進(jìn)行含量測試驗(yàn),因?yàn)楸酒诽幏剿幬遁^多,成分復(fù)雜,陰性干擾大等原因,未能建立含測方法。故暫測定其乙醇浸出物的含量,對本品的質(zhì)量控制有一定的現(xiàn)實(shí)意義。

    [1]中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會.中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑 (第二冊),1990,95.

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