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    ?;撬釋Υ笫箬F利用和抗氧化能力的影響

    2013-02-19 06:53:00王芙蓉謝中國葉興乾鄧尚貴陳士國胡亞芹肖定福
    食品與生物技術(shù)學報 2013年5期
    關(guān)鍵詞:缺鐵?;撬?/a>補鐵

    王芙蓉, 謝中國, 葉興乾, 鄧尚貴, 陳士國*, 胡亞芹, 肖定福

    (1.舟山普陀海洋高科技園區(qū),浙江 舟山316100;2.浙江大學 生物工程與食品學院,浙江 杭州 310029;3.浙江海洋學院食品與藥學學院、醫(yī)學院,浙江舟山316000;4.湖南農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院,湖南長沙410128)

    鐵是人和動物必需的一種微量元素,在體內(nèi)參與血紅蛋白、肌紅蛋白、細胞色素及某些酶的合成,在機體代謝過程中起著極其重要的作用,缺鐵嚴重時會導致缺鐵性貧血(IDA)。IDA是常見的一種營養(yǎng)性貧血,其發(fā)病遍及世界各地。世界衛(wèi)生組織調(diào)查報告顯示,IDA患者占世界總?cè)丝?0%~30%左右[1]。研究發(fā)現(xiàn)IDA可引起機體的脂質(zhì)過氧化,導致機體抗氧化能力的下降[2]。

    牛磺酸是一種條件性必需氨基酸,具有抗氧化、提高免疫力等[3-4]多種功能。文獻報道,?;撬釋Ω纳曝氀幸欢ǖ男Ч鸞5],對鐵過載小鼠引起的心臟損傷有保護作用[6-7],牛磺酸對正常大鼠和缺鐵性貧血大鼠的抗氧化作用鮮有報道,本文主要探討?;撬釋Υ笫箬F利用及抗氧化作用的影響。

    1 材料與方法

    1.1 實驗材料與設(shè)備

    ?;撬幔徲跐摻腊菜帢I(yè)股份有限公司,質(zhì)量分數(shù)99%;FeSO4.7H2O,分析純,國藥集團產(chǎn)品;SD大鼠,購于上海斯萊克生物有限公司;UV-2550型分光光度計,日本Shimadzu公司產(chǎn)品;AA700型原子吸收分光光度計,美國Perkin Elmer公司產(chǎn)品。

    1.2 動物分組和喂養(yǎng)

    健康雄性 SD 大鼠 40只,體質(zhì)量(80±5)g,以基礎(chǔ)飼料適應(yīng)喂養(yǎng)3 d。隨即分為4組,其中16只整個實驗過程都飼喂正常飼料,另外24只喂缺鐵飼料,耗空28 d建造缺鐵性貧血模型。缺鐵飼料參照AIN-76飼料配方[8],其中的礦物元素添加劑不添加鐵劑。缺鐵大鼠根據(jù)Hb含量隨機分為3組:缺鐵組、缺鐵加?;撬峤M和補鐵加?;撬峤M。缺鐵組和缺鐵加牛磺酸組繼續(xù)飼喂缺鐵飼料,補鐵加?;撬峤M改喂正常飼料。整個實驗飼喂正常飼料的16只大鼠根據(jù)體質(zhì)量分為正常對照組和正常+?;撬峤M。添加牛磺酸組的大鼠每天灌胃?;撬?.5 g/kg,缺鐵組和正常對照組灌胃等體積去離子水,共21 d。

    動物飼養(yǎng)在不銹鋼籠中,環(huán)境溫濕度恒定((24±1) ℃,(55±5)%),自由采食、自由飲用去離子水,光照12 h/d,實驗過程避免鐵污染。灌胃結(jié)束后,40只大鼠分別用巴比妥鈉腹腔注射麻醉,在大鼠深度麻醉狀態(tài)下剖開腹部,從腹主動脈取血10 mL左右,從中取一部分全血測定Hb,另一部分取血清測血清鐵(SI)、血清鐵蛋白(SF)、總鐵結(jié)合力(TIBC)和血清抗氧化酶活性。

    1.3 檢測指標

    1.3.1 血液指標的測定 Hb的測定:氰化高鐵血紅蛋白法[9];血清SI和TIBC,采用南京建成生物工程研究所試劑盒測定。SF采用ELASA法測定,試劑盒購于美國R&D公司。

    1.3.2 肝臟和脾臟中鐵含量的測定 待測肝臟和脾臟樣品分別加混合酸(V(硝酸)∶V(高氯酸)=4∶1)10 mL緩緩加熱,待溶液變成無色時,蒸發(fā)余酸至近干,冷卻,定容,稀釋到合適的倍數(shù)后用美國Perkin Elmer公司AA700型火焰原子吸收分光光度計測定鐵含量。

    1.3.3 血清抗氧化指標的測定 總抗氧化能力(TAOC)、總超氧化物歧化酶(SOD)活力、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活力及丙二醛(MDA)含量用試劑盒測定。試劑盒購于南京建成生物工程研究所。

    1.4 統(tǒng)計分析

    采用SPSS18.0軟件中的單因子方差分析進行統(tǒng)計分析,并用Duncan氏新復極差法進行多重比較。

    2 結(jié)果與討論

    2.1 ?;撬釋Υ笫笱褐笜说挠绊?/h3>

    牛磺酸對大鼠血液指標的影響見表1。經(jīng)28 d的缺鐵造模,大鼠 Hb 含量為(86.07±3.40)g/L,說明大鼠已經(jīng)處于缺鐵性貧血狀態(tài)。對缺鐵性貧血大鼠補充?;撬?1 d后,缺鐵+?;撬峤M大鼠Hb含量已恢復正常,與缺鐵組比較差異顯著(P<0.05),但低于其他3組(P<0.05)。

    缺鐵組大鼠SI和SF含量顯著低于其他4組(P<0.05),缺鐵+?;撬峤M大鼠SI和SF含量低于正常組(P<0.05),補鐵+?;撬峤MSI和SF含量顯著高于缺鐵+牛磺酸組 (P<0.05),而正常組和正常+牛磺酸組大鼠SI和SF含量差異不顯著 (P>0.05)。缺鐵組大鼠TIBC顯著高于其他4組 (P<0.05)。

    表1 牛磺酸對大鼠血液指標的影響Table 1 Effect of taurine supplements on blood indexs of rats

    2.2 ?;撬釋Υ笫蟾闻K、脾臟中鐵含量的影響

    ?;撬釋Υ笫蟾闻K、脾臟中鐵含量的影響見表2。缺鐵組大鼠肝臟和脾臟中鐵的含量顯著低于正常組(P<0.05)。正常大鼠補充?;撬釋Υ笫蟾闻K和脾臟中鐵的含量有一定的提高,并可顯著提高脾臟鐵含量(P<0.05),缺鐵大鼠補充?;撬岷罂纱龠M肝臟和脾臟中鐵的含量,補鐵+?;撬峤M與缺鐵組比較可顯著提高肝臟和脾臟中鐵的含量(P<0.05)。

    2.3 ?;撬釋Υ笫笱蹇寡趸芰Φ挠绊?/h3>

    ?;撬釋Υ笫笱蹇寡趸芰Φ挠绊懸姳?。缺鐵組大鼠血清T-AOC、SOD和 GSH-PX活性均低于正常組大鼠,而MDA含量高于正常組(P<0.05),表明缺鐵可引起機體抗氧化能力的降低。正常+?;撬峤M與正常組比較對大鼠的抗氧化能力沒有顯著影響(P>0.05)。缺鐵+?;撬峤M和補鐵+牛磺酸組大鼠均可提高血清T-AOC、SOD和 GSH-PX活性,降低MDA含量,補鐵+?;撬峤M大鼠血清MDA含量和SOD活性與缺鐵組大鼠比較差異顯著 (P<0.05)。

    表2 ?;撬釋Υ笫蟾闻K、脾臟鐵含量的影響Table 2 Effects of taurine on iron contents of liver and spleen of rats

    表3 ?;撬釋Υ笫笱蹇寡趸芰Φ挠绊慣able 3 Effects of taurine on serum antioxidative ability of rats

    2.4 討論

    正常組大鼠添加牛磺酸對Hb含量影響不大,而缺鐵和缺鐵后補鐵大鼠添加?;撬峥商岣叽笫驢b含量,表明?;撬崮艽龠M缺鐵大鼠鐵的吸收,而對正常大鼠鐵吸收的促進效果不明顯。

    鐵蛋白是體內(nèi)含鐵最豐富的一種蛋白質(zhì),在鐵的代謝方面起著重要作用。SF能反映體內(nèi)鐵存儲量及機體的營養(yǎng)狀態(tài),是判定體內(nèi)鐵缺乏的有效指標[10]。TIBC代表血清鐵運鐵蛋白含量,缺鐵性貧血時血清總鐵結(jié)合力可升高[11]。IDA可引起機體SI、SF下降,TIBC含量偏高。缺鐵組大鼠添加?;撬岷骃I、SF含量升高,TIBC含量降低,說明?;撬峥商岣逫DA大鼠對鐵的利用。

    肝臟和脾臟是機體鐵主要的儲存部位,在機體鐵代謝平衡中具有重要作用。

    IDA大鼠肝臟和脾臟鐵含量與正常組比較顯著降低,說明缺鐵嚴重時可引起機體儲存鐵顯著降低。添加牛磺酸和補鐵后可提高IDA大鼠肝臟和脾臟鐵含量。

    SOD與GSH-Px構(gòu)成人體重要抗氧化酶系統(tǒng),二者協(xié)同作用以減少活性氧自由基的產(chǎn)生,防止脂質(zhì)過氧化及其中間代謝產(chǎn)物對機體的損害。MDA是脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物,測定MDA的量可反映機體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的程度,間接反映細胞損傷程度[12]。因此,檢測血清T-AOC、SOD、GSH-Px和MDA的變化,可以反映機體的抗氧化能力的變化。本實驗缺鐵組大鼠血清MDA升高,而SOD、GSH-Px和T-AOC下降,表明IDA大鼠體內(nèi)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)增強,抗氧化能力下降,存在明顯的脂質(zhì)過氧化損傷。通過灌胃?;撬峥梢种艻DA大鼠MDA的升高及SOD、GSH-Px、T-AOC的下降,表明?;撬峥杀WoIDA大鼠體內(nèi)的抗氧化酶活性,從而維持機體氧化及抗氧化系統(tǒng)的動態(tài)平衡,減少自由基對機體的損傷作用。前期也有研究發(fā)現(xiàn)缺鐵可加重脂質(zhì)過氧化,認為自由基的產(chǎn)生和清除均需要含鐵酶類的參與,而缺鐵時清除自由基的酶活性降低,自由基清除障礙,過多的自由基可引起脂質(zhì)過氧化[13]。?;撬峋哂锌寡趸饔?,因此IDA大鼠添加?;撬岷罂商岣邫C體的抗氧化能力,且補鐵+?;撬峤M大鼠改善IDA效果更佳。

    3 結(jié)語

    ?;撬峥娠@著提高缺鐵性貧血大鼠血紅蛋白、血清鐵、血清鐵蛋白和肝臟鐵含量,顯著降低血清總鐵結(jié)合力,提高血清抗氧化酶活性,降低脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛的產(chǎn)生,表明?;撬峥商岣呷辫F性貧血大鼠鐵的利用和抗氧化能力;?;撬釋φ4笫箬F利用和抗氧化能力的作用效果不顯著。因此,?;撬峥捎行У母纳迫辫F性貧血。

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