NS398對卵巢癌細胞系CAOV3免疫殺傷作用的體外研究

梁煜 劉志輝 王敏

NS398對卵巢癌細胞系CAOV3免疫殺傷作用的體外研究

梁煜 劉志輝 王敏

目的觀察和探討COX-2選擇性抑制劑NS398對卵巢癌細胞系CAOV3增殖抑制作用及對CTL細胞體外免疫殺傷作用的影響。方法放射免疫法測定CAOV3細胞及經(jīng)NS398處理的CAOV3細胞培養(yǎng)上清液中的PGE2含量，流式細胞儀分析CTL細胞表型，MTT比色法檢測CTL細胞殺傷活性。結(jié)果NS398能抑制CAOV3細胞分泌PGE2；經(jīng)NS398處理的CAOV3刺激誘導產(chǎn)生CTL細胞對CAOV3細胞的殺傷活性顯著增加。結(jié)論NS398可能成為卵巢癌預防與治療的新靶點。

NS398;CTL;卵巢癌

卵巢癌起病隱匿，五年生存率在30%左右[1]。NS398是一種磺胺類藥劑的衍生物，是COX-2選擇性抑制劑[2]。特異性細胞毒性T細胞(CTL)殺傷腫瘤作用是抗原特異性的[3]，本研究旨在探討NS398對卵巢癌細胞系CAOV3增殖抑制及對CTL細胞體外免疫殺傷作用的影響，為卵巢癌的預防和治療提供新的理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1材料 卵巢漿液性癌細胞系CA0V3由中國醫(yī)科大學細胞生物實驗室提供。NS398為美國Cayman公司產(chǎn)品。PGE2放免測定試劑盒由蘇州醫(yī)學院血液研究所提供。

1.2放射免疫法測定CAOV3細胞及經(jīng)NS398處理的CAOV3細胞培養(yǎng)上清液中的PGE2含量。

1.3卵巢癌CAOV3細胞體外刺激外周血單個核細胞(PBMC)誘導特異性細胞毒性T細胞(CTL)；流式細胞儀分析CTL細胞表型。

1.4CTL殺傷活性檢測：采用MTT比色法檢測CTL細胞殺傷活性。

2 結(jié)果

2.1PGE2放射免疫結(jié)果顯示，經(jīng)NS398處理后，CAOV3細胞培養(yǎng)液中PGE2含量減低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

2.2在IL-2存在的條件下，PBMC經(jīng)NS398處理的CAOV3細胞兩次抗原刺激成功誘導產(chǎn)生CTL，表達CD3+CD8+陽性率分別為41%、64%，而未經(jīng)處理的PBMC CD3+CD8+陽性率僅為25%。

2.3MTT比色法檢測CTL殺傷活性結(jié)果顯示，CTL細胞對CAOV3細胞具有明顯的殺傷活性，實驗組CTL細胞對CAOV3的殺傷率顯著高于對照組(P<0.05)。

3 討論

環(huán)氧合酶是前列腺素合成過程中的重要限速酶，COX-2及其代謝產(chǎn)物與包括卵巢癌在內(nèi)機體多種惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關。機體存在多種免疫監(jiān)視機制，發(fā)揮著重要的抗腫瘤作用，細胞免疫是抗腫瘤的主力，特異性細胞毒性T細胞(CTL)能特異性殺傷腫瘤細胞。但腫瘤在人體免疫監(jiān)視下仍能發(fā)生、發(fā)展并且發(fā)生轉(zhuǎn)移，原因可能在于腫瘤具有免疫抑制和/或免疫逃逸能力。

本研究表明COX-2選擇性抑制劑NS398作用于卵巢癌細胞，能明顯抑制腫瘤細胞增殖，呈劑量和時聞依賴關系。并且能明顯抑制腫瘤細胞分泌PGE2。另外，經(jīng)NS398處理的CAOV3細胞刺激誘導產(chǎn)生CTL對CAOV3細胞的殺傷活性顯著增加。提示卵巢癌細胞分泌PGE2增加對免疫的影響可能與其影響APC提呈抗原有關。本實驗研究從一個新的角度探討NS398對免疫的調(diào)節(jié)作用。Stolina M等[6]研究的COX-2選擇性抑制劑可減少前列腺素生成，部分逆轉(zhuǎn)腫瘤免疫抑制作用的結(jié)論亦與本研究相一致。本研究為NS398用于卵巢癌的預防及治療開辟了光明前景。

[1] 連立娟.林巧稚婦科腫瘤學.第2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，1996:449.

[2] Futaki N. NS398， a novel non-steroidal anti-inflammatory drugwithpotent analgesic and antipyretic effects， which causes minimal stoach lesions. Gen Pharmacy，1993 24：105-1 103.

[3] 陳慰峰.醫(yī)學免疫學.第3版.人民衛(wèi)生出版社，2000:230.

110021 沈陽市維康醫(yī)院婦產(chǎn)科(梁煜)；沈陽市婦嬰醫(yī)院(劉志輝)；中國醫(yī)科大學附屬盛京醫(yī)院婦產(chǎn)科(王敏)