中醫(yī)藥干預(yù)糖尿病腎病TGF-β／Smad通路的研究現(xiàn)狀

林 育 陳剛毅

（廣東省廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院，廣州510405）

中醫(yī)藥干預(yù)糖尿病腎病TGF-β／Smad通路的研究現(xiàn)狀

林 育 陳剛毅△

（廣東省廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院，廣州510405）

糖尿病腎病是糖尿病最常見并發(fā)癥之一，目前干預(yù)TGF-β／Smad通路治療糖尿病腎病已成為一個熱點，中醫(yī)藥在糖尿病腎病中干預(yù)TGF-β／Smad通路的研究已經(jīng)取得一定成果，向人們展現(xiàn)了其廣泛的應(yīng)用前景。

糖尿病腎??；中醫(yī)藥；TGF-β／Smad通路

糖尿病腎病（diabetic nephropathy，DN）是糖尿病最常見的微血管并發(fā)癥之一。DN可引起腎臟纖維化，最終導(dǎo)致慢性腎功能衰竭。DN的發(fā)病機制是以高血糖為啟動因素所誘導(dǎo)的各種血管活性物質(zhì)、生長因子、細胞介質(zhì)，化學(xué)趨化生長因子等綜合作用的結(jié)果，其中轉(zhuǎn)化生長因子（TGF-β）的作用尤為突出，而Smad蛋白是目前所知的惟一的TGF-β受體的胞內(nèi)激酶底物，介導(dǎo)TGF-β的胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。近年來，大量實驗［1-3］證明此通路的表達會導(dǎo)致和加速腎臟纖維化。西藥在治療DN方面存在靶點單一，副作用大等缺點，而中醫(yī)藥則具有多靶點，低毒副作用等優(yōu)勢。本文旨在介紹中醫(yī)藥對此通路干預(yù)的相關(guān)研究概況。以下從分別從單味中藥、中藥提取物、中藥復(fù)方和中成藥對TGF-β／Smad通路的影響四個方面加以闡述。

1 單味中藥對TGF-β表達的影響

熊智慧通過研究證明用受大黃干預(yù)的DN大鼠，其腎組織中TGF-β1的表達較其它未用大黃干預(yù)的DN大鼠明顯下降，同時三酰甘油和血總膽固醇也明顯下降［4］。施海濤等研究表明冬蟲夏草，可以顯著抑制DN大鼠TGF-β1mRNA的基因表達，從而達到延緩腎臟的纖維化［5］。王德軍等研究證明土茯苓可顯著提高DN大鼠NO水平和NO／ET值，不同程度地降低腎重和腎臟指數(shù)，抑制TGF-β1的表達，從而在一定程度上改善DN大鼠腎臟病理變化［6］。李冰等的研究證明蛹蟲草能顯著降低DN大鼠空腹血糖，腎臟指數(shù)，24h排尿量、尿微量白蛋白排泄率（UAER）和NAG排泄率；同時能夠降低血清中BUN、Cr、UA含量，下調(diào)TGF-β、CTGF的mRNA表達，減少TGF-β及IV型膠原蛋白的表達［7］。鄧文超等實驗證明黃芪可以降低DN大鼠24 h尿蛋白定量，減輕腎間質(zhì)病理損傷，下調(diào)wnt4、B-catenin及TGF-β1在腎間質(zhì)中的表達［8］。綜上所述，我們可將上述藥物大致可分為兩類，即益氣補腎類中藥如蟲草、黃芪和泄?jié)嶂兴幦绱簏S、土茯苓，兩者都能通過下調(diào)TGF-β的表達，為中醫(yī)藥治療DN提供了新思路。

2 中藥提取物對TGF-β表達的影響

劉穎慧等實驗證明大黃酸可通過下調(diào)AGE-BSA誘導(dǎo)的系膜細胞TGF-βmRNA和CTGFmRNA表達，達到防治糖尿病腎病的作用［9］。李文等實驗證明積雪草酸干預(yù)組使體外培養(yǎng)大鼠腎小球系膜細胞TGF-β1F、N、Col-IV分泌量較不干預(yù)組和高糖組減少，從而對糖尿病腎病大鼠起腎保護作用［10］。毛春譜等實驗證明靈芝多糖通過下調(diào)糖尿病大鼠腎臟中TGF-β和CO-IV的表達，減少細胞外基質(zhì)積聚，起到對糖尿病大鼠腎臟保護作用［11］。孫文等通過實驗證明三七總皂苷可使糖尿病大鼠腎組織TGF-βmRNA表達水平下調(diào)［12］。唐麗琴等實驗證明，小檗堿可降低DN大鼠腎小球系膜細胞TGF-β與1V-C蛋白的表達［13］。王輝等實驗證明虎杖總葸醌能顯著抑制NH小鼠DN模型腎皮質(zhì)Smad3蛋白表達［14］。馬艷春等實驗證明蚓激酶地龍成分對HMC增殖的抑制作用在一定范圍內(nèi)呈濃度、時間依賴關(guān)系，能夠降低TGF-β和CTGF的含量，以高劑量組最佳，優(yōu)于福辛普利組［15］。綜上所述，我們發(fā)現(xiàn)上述中藥提取物皆來源于化瘀、益氣的藥物，中醫(yī)強調(diào)氣滯血瘀，氣行則血行，同樣提示我們治療DN可多從益氣活血這個角度考慮。

3 中藥復(fù)方對TGF-β表達的影響

余紅等實驗證明丹芪合劑可使DN大鼠的TIMP-1、TIMP-2蛋白和TGF-βmRNA水平降低，F(xiàn)N沉積減少且血肌酐、蛋白尿減輕，腎臟指數(shù)降低且病理改變減輕，同時TGF-β蛋白減少與TIMP-1和TIMP-2蛋白呈顯著正相關(guān)［16］。周必發(fā)等實驗證明當(dāng)歸補血湯能直接抑制GMC增殖、GMC中TGF.TGF-βmRNA及NF-B蛋白表達增加，從而發(fā)揮預(yù)防和治療腎小球硬化和間質(zhì)纖維化的發(fā)生、發(fā)展，進而延緩DN的進展［17］。張威等實驗證明復(fù)方鬼箭羽合劑治療組能顯著上調(diào)Smad4和使smad 7蛋白的表達降低，說明復(fù)方鬼箭刊合劑可通過調(diào)節(jié)Smad4和Smad 7蛋白表達，從而降低TGF-β1的表達，達到防治糖尿病腎病腎小球硬化的作用［18］。李鳳婷等實驗證明固本通絡(luò)湯能夠改善腎小球肥大，減輕腎臟病理損害，顯著降低TGF-β1的表達［19］。宋春暉等實驗證明降糖益腎活血方能降低腎小球PKC活性。下調(diào)腎組織TGF-β蛋白的過度表達［20］。張江華等實驗證明益氣養(yǎng)陰消瘕通絡(luò)中藥對高糖聯(lián)合Ang 1培養(yǎng)大鼠腎小球系膜細胞分泌轉(zhuǎn)化生長因子B和結(jié)締組織生長因子的表達有抑制作用［21］。劉麗芳等實驗證明貞清方和地龍可抑制DN大鼠TGF-β表達，導(dǎo)致PAI-1表達下調(diào)，同時貞清方的作用強于單味藥地龍［22］。

從上述復(fù)方中，我們發(fā)現(xiàn)，抑制TGF-β表達的大部分是活血、益氣之品組成的復(fù)方，進一步證實了此類藥物在糖尿病腎病中的有效性。同時養(yǎng)陰亦不可忽視。

4 中成藥對TGF-β表達的影響

楊彥等實驗證明川芎嗪能下調(diào)DN大鼠腎小管間質(zhì)TGF-β表達，緩解腎小管間質(zhì)損害，從而達到對DN腎功能的保護作用［23］。陳云等通過實驗證明降糖三黃片可通過改善糖尿病模型大鼠血糖、血脂和胰島素抵抗，減少尿蛋白的排泄，抑制TGF-β1表達，從而保護腎功能，延緩糖尿病腎病的發(fā)展［24］。趙云芳等實驗證明降壓調(diào)脂膠囊能夠抑制腎臟TGF-β1、PKC表達［25］。烏格敦其其格等實驗證明糖腎平膠囊可使DN大鼠腎固有細胞胞漿內(nèi)TGF-β、p38MAPK、Caspase.3 mRNA及蛋白表達明顯減少［26］。高潔等實驗證明心肝寶膠囊可下調(diào)DN大鼠腎臟TGF-β、TIMP-1、PAI-l及Col-IV的表達，進而減少細胞外基質(zhì)，減少尿蛋白［27］。李娟等實驗證明益腎膠囊可上調(diào)SOCS3在DN大鼠腎組織中的表達，同時抑制了TGF-βl、MCP-1的表達［28］。上述所及中成藥成分大部分來自益氣活血中藥，或輔以養(yǎng)陰滋腎，或輔以瀉濁通絡(luò)。提示我們治療本病以益氣活血為主，靈活輔以其它方法。

5 回顧與展望

綜上所述，TGF-β1的過度表達是DN發(fā)病和發(fā)展的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，因此抑制其表達是治療甚至預(yù)防其發(fā)生、發(fā)展的關(guān)鍵，中藥治療此類疾病有其獨有的優(yōu)勢。通過對文獻的回顧發(fā)現(xiàn)益氣、活血藥物最為常用，提示日后在治療DN中，運用益氣活血的藥物可成為一個主要路徑。但是，對于TGF-β／Smad的抑制，是以活血為主還是益氣為主的研究目前還是相對較少，同時對于結(jié)合DN的各項理化指標的不同進行有針對性用藥的研究也較少。復(fù)方中中藥成分的不同比例配伍對于TGF-β／Smad通路抑制效果的研究還不夠深入，明確有效中藥里面那些中藥單體對TGF-β／Smad通路有抑制作用還有待挖掘。有效單體通過何種途徑抑制TGF-β／Smad通路還未完全清晰。此外目前在實驗中證明有效中成藥的毒副作用的臨床論證也缺乏大樣本的循證醫(yī)學(xué)的證據(jù)。故上述幾點，既是目前研究的缺陷，亦是日后中醫(yī)藥治療DN可能的突破口，但是同時我們可以看到中醫(yī)藥在治療DN上面具有廣泛的前景。

［1］McGowan TA，Dunn SR，F(xiàn)alkner B，et al．Stimulation of Urinary TGF-／beta｝and I～prostanes in Response to Hyperglycemia in Hu-marls［J］．Clin J Am Soc Nephrol，2006，1（2）：263-268．

［2］Koya D，Haneda M，Nakagawa H，et al．Amelioration of acce｜er-ated diabetic mesangial expansion by treatment with a PKC beta in-hibitor in diabetic db／db mice，a rodent model for type 2 diabetes［J］．J Faseb，2000，14（3）：43-47．

［3］Weigert c，Brodbeck K，Klopfer K，et al．AngiotensinⅡinduces human TGF-beta 1 promoter activation：similarity to hyperglycaemia［J］．Diabetogia，2002，45（6）：890-898．

［4］熊智慧．大黃對糖尿病腎病患者血脂及TGF-β1水平的影響研究［J］．海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2012，18（8）：1066-1068．

［5］施海濤，楊慶春，王雪峰，等．冬蟲夏草對延緩糖尿病腎病腎小球系膜細胞增殖的研究［J］．中國現(xiàn)代醫(yī)生，2011，49（22）：11．

［6］王德軍，壽旗揚，陳方明，等．土茯苓對糖尿病腎病大鼠腎組織形態(tài)學(xué)及相關(guān)因子ET、NO、TGF-β的影響［J］．中國中醫(yī)藥科技，2010，17（43）：320-322．

［7］李冰，王靜鳳，楊延村，等．蛹蟲草對糖尿病大鼠腎臟病程發(fā)展的抑制作用［J］．食品科學(xué)，2011，32（15）：255-259．

［8］鄧文超，方敬愛．黃芪對糖尿病腎病大鼠腎間質(zhì)Wnt／β-catenin及TGF-β信號通路表達的影響［J］．中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志，2012，13（7）：571-574．

［9］劉穎慧，周旦陽．大黃酸對AGE-BSA誘導(dǎo)的大鼠系膜細胞TGF-β和CTGF表達的影響［J］．中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2009，27（2）：432-434．

［10］李文，吳晨光，王麗，等．積雪草酸對高糖培養(yǎng)大鼠腎小球系膜細胞氧化應(yīng)激及細胞外基質(zhì)分泌的影響［J］．江蘇醫(yī)藥，2011，37（21）：2484-2486．

［11］毛春譜，李小毅，張紅梅，等．靈芝多糖對糖尿病大鼠腎組織TGF-β和CO-Ⅳ表達的影響［J］．時珍國醫(yī)國藥，2009，2（11）：2678-2680．

［12］孫文，馮麗園，趙宗江，等．三七總皂苷干預(yù)糖尿病腎病大鼠氧化應(yīng)激及足細胞凋亡機制的實驗研究［J］．中華中醫(yī)藥雜志（原中國醫(yī)藥學(xué)報），20l1，26（5）：1062-1067．

［13］唐麗琴，呂飛，劉圣，等．小檗堿對糖尿病腎病大鼠腎小球系膜細胞TGF-β與Ⅳ型膠原蛋白表達的影響［J］．中國中藥雜志，2011，36（24）：3494-3497．

［14］王輝，劉永生，李偉，等．虎杖總蒽醌對糖尿病腎病模型小鼠腎皮質(zhì)TGF-β，Smad3的影響［J］．中國實驗方劑學(xué)雜志，2012，18（4）：158-161．

［15］馬艷春，周波，宋立群，等．地龍成分對高糖刺激下人腎小球系膜細胞轉(zhuǎn)化生長因子和結(jié)締組織生長因子表達的研究［J］．中成藥，2011，3（33）：410-414．

［16］余紅，石明雋，肖瑛，等．丹芪合劑對糖尿病腎病大鼠腎臟組織TIMP-1，TIMP-2表達的影響［J］．時珍國醫(yī)國藥，2012，23（3）：667-669．

［17］周必發(fā)，張瑩．當(dāng)歸補血湯對高糖條件下系膜細胞增殖及TGF-β1 mRNA和NF-xB表達的影響［J］．中華中醫(yī)藥雜志（原中國醫(yī)藥學(xué)報），2010，25（6）：833-838．

［18］張威，甄仲，黃文政，等．復(fù)方鬼箭合劑對糖尿病腎病大鼠腎組織Smad 4、Smad 7的影響［J］．深圳中西醫(yī)結(jié)合雜志，2011，21（3）：129-132．

［19］李鳳婷，李夢，耿建國，等．固本通絡(luò)湯對DM大鼠早期腎損害及TGF-β1表達影響的實驗研究［J］．中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2010，16（11）：1001-1002．

［20］宋春暉，陳大舜．降糖益腎活血方對糖尿病腎病大鼠的干預(yù)作用及其機制研究［J］．時珍國醫(yī)國藥，2011，22（6）：1415-1417．

［21］張江華，陳志強，趙雯紅，等．益氣養(yǎng)陰消瘕通絡(luò)中藥對高糖聯(lián)合Ang 1培養(yǎng)大鼠腎小球系膜細胞分泌轉(zhuǎn)化生長因子β1和結(jié)締組織生長因子的影響［J］．北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2012，35（3）：174-177．

［22］劉麗芳，文秀英，許明旺，等．貞清方與地龍對2型糖尿病大鼠腎組織TGF-β及PAI-1表達的影響［J］．中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2011，31（7）：967-972．

［23］楊彥，謝春光，韓斌．川芎嗪對糖尿病腎病大鼠腎小管間質(zhì)病變及轉(zhuǎn)化生長因子β1的影響［J］．時珍國醫(yī)國藥，2008，19（8）：1937-1938．

［24］陳云，李賽美，王保華，等．降糖三黃片對糖尿病大鼠腎臟轉(zhuǎn)化生長因子-β1表達的影響［J］．廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2012，29（2）：154-158．

［25］趙云芳，耿宏偉，李瑞琴，等．降壓調(diào)脂膠囊對糖尿病早期腎損害大鼠PKC和TGF-β表達的影響［J］．中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2011，17（3）：284-286．

［26］烏格敦其其格，趙宗江，蔣玉鳳，等．糖腎平膠囊對STZ誘導(dǎo)糖尿病腎病大鼠腎臟保護及其對TGF-β1／p38MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響［J］．中華中醫(yī)藥雜志（原中國醫(yī)藥學(xué)報），2012，27（4）：1092-1097．

［27］高潔，范例，劉茂靜，等．心肝寶膠囊對STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠早期腎損傷的保護作用及其機制研究［J］．中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2012，32（4）：530-536．

［28］李娟，方敬愛．益腎膠囊對糖尿病腎病大鼠腎組織SOCS3TGF-β1、MCP-1表達的影響［J］．中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志，2011，12（4）：291-294．

10.3969／j.issn.1672-2779.2013.09.100

1672-2779（2013）-09-0156-03

張文娟

2013-04-02）

△指導(dǎo)老師