一種新的血清肝癌標(biāo)志物
——GP73

肖 瀟(綜述)，陳東風(fēng)(審校)

(第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所消化內(nèi)科，重慶400042)

肝癌是全球常見(jiàn)的十種惡性腫瘤之一，全世界每年約有25萬(wàn)人死于肝癌，中國(guó)因肝癌死亡的人數(shù)占全球死亡人數(shù)的45%～50%［1］。其特點(diǎn)為發(fā)病率高，病死率高，且日趨年輕化，如何早期診斷肝癌成為眾多學(xué)者研究的熱點(diǎn)。血清甲胎蛋白(a-fetoprotein，AFP)是目前應(yīng)用最廣泛的肝癌腫瘤標(biāo)志物，但仍有20%的肝癌血清AFP正常，所以尋找新的血清腫瘤標(biāo)志物仍是許多學(xué)者致力研究的方向［2］。隨著基因技術(shù)、蛋白質(zhì)組學(xué)、腫瘤免疫等相關(guān)研究的快速發(fā)展，學(xué)者們發(fā)現(xiàn)了一些可能有前景的肝癌血清標(biāo)志物，其中高爾基體糖蛋白73(Golgi protein 73，GP73)，又稱2型高爾基體膜蛋白，是最值得期待的血清標(biāo)志物之一。目前，已有多項(xiàng)研究證實(shí)了它的價(jià)值，并發(fā)現(xiàn)在肝癌患者中GP73較AFP出現(xiàn)更早、更靈敏［3-5］。

1 GP73概述

GP73因其在聚丙烯酰胺凝膠電泳中相對(duì)分子質(zhì)量為73 ×104，所以稱為 GP73［6］。2000 年，美國(guó)學(xué)者Kladney等［6］在研究成人巨細(xì)胞性肝炎時(shí)首次發(fā)現(xiàn)了定位在高爾基體上GP73蛋白。GP73基因位于第9號(hào)染色體，全長(zhǎng)3042 bp，根據(jù)基因序列推測(cè)其蛋白相對(duì)分子質(zhì)量為4.5×104。它是高爾基體順面膜囊上的一種整合膜蛋白，疾病狀態(tài)時(shí)可分泌到達(dá)細(xì)胞內(nèi)及表面，并可進(jìn)入血清。研究表明，GP73存在于人體的多個(gè)器官組織中，其表達(dá)水平各不相同，主要是在上皮細(xì)胞進(jìn)行表達(dá)［7］。結(jié)腸組織中，腺體表面高分化結(jié)腸細(xì)胞中GP73的表達(dá)最高;肺組織中，支氣管纖毛柱狀上皮細(xì)胞呈主要表達(dá);腎臟組織中，腎小球不表達(dá)，遠(yuǎn)曲小管和集合管表達(dá)較高;前列腺組織中，僅前列腺腺體上皮細(xì)胞有表達(dá)。上述研究表明，GP73主要存在于結(jié)腸、胃、前列腺、氣管等器官。對(duì)于肝臟，正常肝細(xì)胞不表達(dá)GP73，僅在少量位于匯管區(qū)周圍肝細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中可以檢測(cè)到，其特點(diǎn)為緊鄰膽管面的細(xì)胞質(zhì)中有GP73表達(dá)，緊鄰膜竇面的細(xì)胞質(zhì)中無(wú)表達(dá)。這種在不同組織中表達(dá)水平的明顯差異說(shuō)明該蛋白可能具備有效的調(diào)控能力以及多種功能。

2002年，Kladney等［8］通過(guò)對(duì)70例正常與非正常的肝組織研究后發(fā)現(xiàn)病變肝組織中的GP73表達(dá)水平超過(guò)正常肝組織的70倍，肝臟處于疾病狀態(tài)時(shí)，肝細(xì)胞必然表達(dá) GP73。2004年，Iftikhar等［9］研究也發(fā)現(xiàn)GP73在急性肝炎和活動(dòng)性肝硬化時(shí)表達(dá)明顯增高。隨后，Maitra等［10］提出GP73在急性及慢性肝臟疾病中都呈高水平表達(dá)。2009年，Wright等［11］研究發(fā)現(xiàn)在肝豆?fàn)詈俗冃缘母渭?xì)胞中，GP73表達(dá)升高，肝細(xì)胞修復(fù)后GP73逐漸恢復(fù)正常。綜上所述，GP73是一種可用于判斷肝臟疾病的血清標(biāo)志物。

2005年，Block等［12］研究發(fā)現(xiàn)，原發(fā)性肝癌患者血清中的GP73含量明顯升高。同年，Marrero等［3］通過(guò)對(duì)144例肝癌、152例肝硬化、56例正常血清標(biāo)本進(jìn)行處理分析后，發(fā)現(xiàn)GP73用于診斷肝癌的靈敏度和特異度均超過(guò)70%，診斷早期肝癌的靈敏度為AFP的2.55倍，在AFP＜20 ng/L的肝癌患者中，超過(guò)一半的人群GP73明顯升高。因此，對(duì)AFP陰性的肝癌患者，GP73的應(yīng)用能夠明顯提高肝癌的檢出率。

隨著蛋白組學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，學(xué)者們發(fā)現(xiàn)了另一種蛋白，其分子結(jié)構(gòu)在GP73的基礎(chǔ)上被巖藻糖基化，是GP73的異質(zhì)體。Drake等［13］在對(duì)80例存在肝病及正?；颊哌M(jìn)行對(duì)比研究后發(fā)現(xiàn)，巖藻糖基化GP73診斷肝癌的靈敏度及特異度均優(yōu)于GP73，前者的靈敏度為90%，特異度為100%，后者靈敏度僅為65%，特異度為90%;少數(shù)GP73正常的肝癌患者中也可檢測(cè)出多巖藻糖化GP73。因此，血清中多巖藻糖基化GP73是更好的肝癌血清標(biāo)志物。

2 GP73與腫瘤關(guān)系的研究進(jìn)展

2.1 GP73與肝癌的關(guān)系 近年來(lái)，國(guó)內(nèi)關(guān)于GP73與肝癌的研究報(bào)道逐漸增多。2008年，毛一雷等［14］對(duì)收集的173例血清中(健康人99例、非肝病患者12例、HBV攜帶者25例、乙型肝炎相關(guān)性肝癌患者37例)的AFP及GP73蛋白進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，GP73在健康人群和非肝病患者的水平相當(dāng)且均很低;HBV攜帶者的水平雖高于上述兩組人群，但遠(yuǎn)低于肝癌患者;肝癌患者中的水平最高;GP73診斷肝癌的靈敏度為76.9%，特異度為92.8%，AFP的靈敏度僅為48.6%。2009年，李利軍等［15］通過(guò)檢測(cè)分析45例原發(fā)性肝癌組織、癌旁組織(肝細(xì)胞癌39例、膽管細(xì)胞癌6例)及14例正常肝組織中的GP73、AFP及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)GP73高表達(dá)于原發(fā)性肝癌組織中，可成為原發(fā)性肝癌較好的診斷標(biāo)志物，聯(lián)合VEGF、AFP有助于原發(fā)性肝癌的診斷，尤其是AFP陰性的肝癌患者。2010年，張祖平等［16］研究了GP73聯(lián)合AFP對(duì)原發(fā)性肝癌的早期診斷價(jià)值，結(jié)果表明血清GP73可能是診斷肝癌一個(gè)血清標(biāo)志物，聯(lián)合檢測(cè)血清GP73和AFP對(duì)肝癌的早期診斷具有良好的臨床應(yīng)用價(jià)值。劉樹業(yè)等［17］通過(guò)定量技術(shù)檢測(cè)患者血清中GP73的含量，并對(duì)比AFP含量，證明了GP73用于診斷肝癌效果明顯，可以顯著提高肝癌診斷的靈敏度和特異度，而且GP73受炎癥影響較小。朱國(guó)民等［18］探討了定量測(cè)定血清中的GP73對(duì)肝癌診斷的臨床意義，發(fā)現(xiàn)GP73可以作為肝癌的獨(dú)立指標(biāo)與AFP互補(bǔ)應(yīng)用于臨床。付超等［19］分析了GP73在肝細(xì)胞癌患者血清中濃度及其對(duì)肝細(xì)胞癌的診斷價(jià)值，結(jié)果顯示肝細(xì)胞癌組GP73濃度顯著高于肝臟良性疾病組、其他惡性腫瘤組和對(duì)照組，證明GP73是一項(xiàng)較好的肝細(xì)胞癌診斷標(biāo)志物，與AFP聯(lián)合應(yīng)用可提高其診斷價(jià)值。2011年，李淑群等［20］通過(guò)觀察原發(fā)性肝癌組織中GP73的表達(dá)變化情況，發(fā)現(xiàn)癌組織中GP73陽(yáng)性率較AFP高，提示GP73是一種較AFP敏感性更高的腫瘤標(biāo)志物，兩者聯(lián)合檢測(cè)診斷肝癌的陽(yáng)性率高達(dá)90%，證明GP73是肝癌的一種新的腫瘤標(biāo)志物，可使肝癌患者得到早期診斷和及時(shí)治療。

2.2 GP73與其他腫瘤的關(guān)系 GP73對(duì)肝癌的特異性高，在其他惡性腫瘤組織中卻表達(dá)不一。前列腺癌的患者，其腺體組織中存在GP73，尿液中可檢測(cè)出GP73蛋白和mRNA，血清中未檢測(cè)出［21-23］。Fritzsche等［24］研究發(fā)現(xiàn)在大部分透明細(xì)胞腎癌組織中GP73的表達(dá)不高，因此用于腎細(xì)胞癌診斷價(jià)值不大。Block等［12］發(fā)現(xiàn) GP73在直腸癌中無(wú)表達(dá)。Fritzsche等［25］研究發(fā)現(xiàn)GP73在89.9%的精原細(xì)胞瘤中表達(dá)，特異性較高。Riener等［4］發(fā)現(xiàn)GP73在約85%的膽管癌組織中呈高表達(dá)。Zhang等［26］檢測(cè)178例肺癌組織發(fā)現(xiàn)所有腺癌組織中GP73都為強(qiáng)表達(dá)，與正常血清對(duì)照后發(fā)現(xiàn)肺癌患者血清中GP73比正常人高30%。

3 結(jié)語(yǔ)

GP73進(jìn)入臨床廣泛應(yīng)用還有一段時(shí)間，需要開展更廣泛的研究和臨床對(duì)照實(shí)驗(yàn)來(lái)確立其有效性。目前存在的問(wèn)題有:①GP73在肝癌、肝硬化進(jìn)展期或急性肝炎時(shí)均呈高表達(dá)，使得上述三種疾病難以區(qū)分。②GP73在其他系統(tǒng)腫瘤中表達(dá)也升高，干擾早期診斷肝癌的敏感性和特異性。GP73與AFP以及其他血清肝癌標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)用于診斷肝癌是未來(lái)的發(fā)展趨勢(shì)，是否會(huì)大幅度提高早期肝癌的診斷率，尚需更多的循證醫(yī)學(xué)證據(jù)。

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