鹽酸沙格雷酯控釋微丸的制備及其質(zhì)量評(píng)價(jià)

陳 超 1，黃春玉2，謝 俊 2，周建平1*

1中國藥科大學(xué)藥劑學(xué)教研室，南京 210009；2南京金陵藥業(yè)股份有限公司，南京 210009

鹽酸沙格雷酯（Sarpogrelate hydrochloride，SARP），是由日本三菱制藥株式會(huì)社開發(fā)的新型5-HT2受體阻滯劑類抗血小板藥物[1]。臨床上主要用于改善慢性動(dòng)脈閉塞癥引起的潰瘍、疼痛及冷感等缺血性癥狀。其結(jié)構(gòu)見圖1。

圖1 鹽酸沙格雷酯結(jié)構(gòu)式

20世紀(jì)九十年代開始SARP在全球范圍內(nèi)上市，其制劑類型包括片劑、顆粒劑等，規(guī)格有100 mg、50 mg。1998 年在我國批準(zhǔn)進(jìn)口片劑（100 mg）上市[2]，時(shí)至今日國內(nèi)生產(chǎn)品種仍以其普通片劑為主。由于SARP在人體內(nèi)消除半衰期較短，患者需一日服藥三次。因此為降低峰谷波動(dòng)，提高生物利用度，減少服藥次數(shù)，宜將其研制為緩控釋制劑。微丸，作為目前應(yīng)用較為廣泛的口服固體緩控釋劑型之一，具有釋藥穩(wěn)定，載藥范圍寬（可從1%至95%以上），生物利用度高，血藥濃度平穩(wěn)，有效濃度維持時(shí)間長等諸多優(yōu)點(diǎn)[3]。本文旨在研制具有緩控釋作用的SARP微丸，以期能夠使其平穩(wěn)釋藥，提高患者用藥依從性。此外，SARP控釋微丸的研究亦可為工業(yè)化生產(chǎn)提供一定參考。

1 儀器與試劑

1.1 儀器

E-35A型擠出機(jī)、R-250型拋圓機(jī) （重慶英格制藥機(jī)械有限公司）；流化床（重慶精工制藥機(jī)械責(zé)任有限公司）；TDTF RCZ-8M智能溶出儀 （天津天大天發(fā)科技有限公司）；320型pH酸度計(jì)（Mettler Toledo公司）；LabTech UV Blue Star紫外可見分光光度計(jì) （北京萊伯泰科儀器有限公司）；顯微鏡（Novel公司）；BT-1600圖像顆粒分析系統(tǒng)、百特粉體學(xué)性質(zhì)測(cè)定儀（丹東百特科技有限公司）。

1.2 藥品與試劑

SARP（純度＞95%，南京康然醫(yī)藥科技有限公司，批號(hào)：100608）；聚丙烯酸樹脂 Eurdragit NE30D（贏創(chuàng)德固賽特種化學(xué)有限公司，批號(hào)：B111112096）；羥丙基甲基纖維素 HPMC-E5（上?？房倒荆?hào)：PD357580）；聚乙二醇PEG 6000（廣東光華科技股份有限公司，批號(hào)：20111018）；檸檬酸三乙酯（阿拉丁化學(xué)試劑公司，批號(hào)：45523）；藥用滑石粉 （廣西龍勝華美滑石研發(fā)有限公司，批號(hào)：060821）；微晶纖維素PH-102（安徽山河藥用輔料股份有限公司，批號(hào)：101001）；藥用淀粉（江蘇昕宇藥業(yè)有限公司）；吐溫80（上海申宇醫(yī)藥化工有限公司，批號(hào)：100518）；檸檬酸（上海榮潤化工有限公司）；其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 載藥丸芯的制備

將處方量的SARP、微晶纖維素（MCC）、淀粉粉碎、混勻過80目篩，以1%HPMC溶液作為粘合劑制備軟材，采用擠出滾圓工藝制備載藥丸芯。所制備載藥丸芯置于60℃電熱鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)干燥6 h，過篩，取24～30目丸芯備用。

2.2 藥丸芯的質(zhì)量評(píng)價(jià)

2.2.1 圓整度微丸的圓整度反映了微丸的成球性，對(duì)微丸的包衣質(zhì)量、膠囊填充以及制劑的含藥均一性有很大影響。一般多采用投影球形度、長短徑比、形態(tài)因子等指標(biāo)評(píng)價(jià)微丸的圓整度[4]，通常大樣本采集操作繁瑣，計(jì)算工作量龐大，而小樣本測(cè)量的微丸數(shù)量又有限，不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。將圖像分析技術(shù)用于評(píng)價(jià)微丸圓整度[5]，操作簡便，運(yùn)算快捷，精確度較高。

本實(shí)驗(yàn)即采用圖像分析法評(píng)價(jià)微丸的圓整度，以圓整度值作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，圓整度值愈趨近于1，認(rèn)為微丸的圓整度愈好。實(shí)驗(yàn)中隨機(jī)抽取兩批微丸，每一批微丸約1000粒，其中一批微丸處方中含有表面活性劑，對(duì)微丸進(jìn)行顯微鏡觀察，采用BT-1600圖像分析軟件對(duì)樣本在線分析，以圓整度數(shù)值在0.9～1區(qū)間的顆粒百分比為計(jì)。結(jié)果含有表面活性劑的微丸的圓整度值在0.9～1的微丸占96.12%，均值為0.96；未含表面活性劑的微丸圓整度值在0.9～1的微丸占90.25%，均值為0.91。

2.2.2 粒徑分布采用篩分法評(píng)價(jià)微丸的粒徑分布，將干燥后所得微丸篩分，收集不同粒徑下的微丸，計(jì)算不同粒徑分布區(qū)間的百分比。結(jié)果微丸粒徑分布以24～30目最多，占92.53%，粒度分布范圍窄，粒度較均勻。

2.2.3 流動(dòng)性與堆密度采用粉體學(xué)性質(zhì)測(cè)定儀測(cè)定載藥微丸的休止角及堆密度評(píng)價(jià)微丸的流動(dòng)性。測(cè)得載藥微丸休止角α=27.5°，堆密度ρ=0.721 g·cm-3。說明微丸流動(dòng)性較好，有利于包衣和進(jìn)行膠囊灌裝。

2.2.4 脆碎度參照片劑脆碎度測(cè)定方法[6]。取6.5 g微丸及10粒直徑為7 mm的球形玻璃珠，置于脆碎度儀器中，25 r·min-1旋轉(zhuǎn)10 min，過篩收集細(xì)粉并稱量。計(jì)算微丸脆碎所損失細(xì)粉百分率為1.02%，表明微丸脆碎度良好，可用于流化床包衣。

2.2.5 收率收率是評(píng)價(jià)載藥微丸處方和工藝的重要指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)以24～30目微丸為目標(biāo)產(chǎn)品。通過篩分法，稱取目標(biāo)微丸的重量，計(jì)算目標(biāo)產(chǎn)品的得率，均在80%以上，處方中添加適當(dāng)比例的淀粉后，微丸收率可進(jìn)一步提高，達(dá)90%以上。

2.3 載藥丸芯的包衣

2.3.1 隔離衣采用流化床設(shè)備底噴技術(shù)進(jìn)行包衣。包衣液轉(zhuǎn)速 5 r·min-1，噴槍霧化壓力為 0.14 MPa，流化床床溫45～55℃，隔離衣選用HPMC E5，增塑劑為PEG6000，包衣增重約5%。

2.3.2 控釋衣稱取處方量滑石粉，加入適量水中，勻化，緩慢倒入攪拌狀態(tài)下的Eurdragit NE30D中，制得控釋包衣液，以轉(zhuǎn)速5 r·min-1，噴槍霧化壓力為0.14 MPa，流化床床溫25～35℃的條件對(duì)SARP隔離衣丸進(jìn)行流化包衣，包衣結(jié)束后于流化床中繼續(xù)流化干燥15 min。包衣厚度以隔離衣丸增重計(jì)。

2.4 藥物在釋放介質(zhì)中的穩(wěn)定性研究

SARP在中性及弱酸性環(huán)境中不穩(wěn)定，易降解。現(xiàn)考察SARP在釋放介質(zhì)中的穩(wěn)定性。取同一批樣品溶出液 1 份，分別于 0 h，1、2、4、6、8、12 h 照紫外分光光度法，在272 nm的波長處測(cè)定吸收度，測(cè)定結(jié)果見表1。

表1 藥物溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果表明，在室溫中放置12 h內(nèi)，被測(cè)溶液的吸收度沒有明顯變化，說明釋放度測(cè)定的樣品溶液穩(wěn)定。

2.5 釋放度測(cè)定

取自制SARP控釋微丸樣品6份，每份300 mg（約含 SARP 150 mg），按照《中國藥典》2010 年版二部附錄ⅩD釋放度測(cè)定法以及ⅩⅨD緩釋控釋和遲釋制劑指導(dǎo)原則等[6-9]進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。采用轉(zhuǎn)籃法，轉(zhuǎn)速100 r·min-1，溫度為（37±0.5）℃，釋放介質(zhì)為 900 mL的 pH 6.8 磷酸鹽緩沖液， 分別于 1、2、3、4、5、6、7、8、12 h時(shí)取溶液10 mL，立即經(jīng)0.45 μm微孔濾膜濾過，自取樣至濾過在30 s內(nèi)完成，同時(shí)補(bǔ)充等溫等體積介質(zhì)。濾液在272 nm處測(cè)量吸收度，計(jì)算藥物累積釋放度，繪制制劑釋放行為曲線。

2.6 包衣增重的篩選

經(jīng)過反復(fù)多次的包衣實(shí)驗(yàn)，隔離衣增重為含藥丸芯的5%時(shí)，隔離層既能很好地將主藥和控釋衣完全隔離開，避免藥物與離子型膜材直接接觸而影響藥物的穩(wěn)定性，又不致包衣層過厚影響藥物釋放。不同控釋衣增重的SARP微丸在pH6.8的磷酸鹽緩沖液中的累積釋放如圖2所示。由圖2可知，控釋衣增重為隔離衣丸重的7%時(shí)，控釋微丸在溶出介質(zhì)中可達(dá)到良好的釋藥行為。

圖2 不同控釋衣增重對(duì)微丸釋放度影響

當(dāng)控釋衣為隔離衣丸重的3%～5%時(shí)，由于不能在隔離衣丸表面形成完整連續(xù)的控釋衣膜而出現(xiàn)突釋。當(dāng)控釋衣增重大于10%時(shí)，由于控釋衣層較厚，控釋微丸在溶出介質(zhì)中釋放較慢，12 h后釋藥未超過60%。因此，本制劑以控釋衣層增重7%為優(yōu)選處方項(xiàng)目。

2.7 包衣后熱處理（膜的老化）

包衣結(jié)束后，將包衣微丸置于電熱干燥箱中進(jìn)行熱處理，以促進(jìn)衣膜愈合[6]。

由于采用的是水分散體包衣技術(shù)，包衣結(jié)束后的熱處理（包衣膜老化）對(duì)包衣膜的愈合影響較大，進(jìn)而影響藥物的釋放行為。本實(shí)驗(yàn)對(duì)包衣膜熱處理的溫度（40℃、50℃、60℃）和時(shí)間（12 h、24 h、48 h）進(jìn)行了考察。結(jié)果表明40℃老化48 h包衣膜不能完全愈合。50℃及60℃老化24 h可以完成膜的愈合過程，兩溫度下老化后的微丸釋放行為一致，繼續(xù)老化對(duì)膜愈合和釋放速率影響不大。因此，確定包衣膜老化工藝參數(shù)為50℃、24 h。

2.8 重復(fù)驗(yàn)證試驗(yàn)

根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)篩選結(jié)果，采用擠出滾圓工藝制備載藥丸芯，HPMC為隔離衣，Eurdragit NE30D為控釋衣，包衣膜50℃老化24 h，制備SARP控釋微丸3批，每批樣品6份，進(jìn)行釋放度檢測(cè)并繪制制劑釋藥行為曲線。結(jié)果如圖3所示。

圖3 不同批次SARP控釋微丸釋放行為

由圖3可知，SARP控釋微丸在釋放介質(zhì)中緩慢釋放，達(dá)到了12 h緩釋的目的。按處方工藝制備的不同批次的微丸釋放行為一致，重現(xiàn)性較好。

2.9 釋藥模型的擬合

對(duì)“2.8”項(xiàng)下重復(fù)驗(yàn)證試驗(yàn)得到的各釋放時(shí)間點(diǎn)的實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)分別與零級(jí)釋藥模型、一級(jí)釋藥模型、Higuchi方程進(jìn)行累積釋放度Mt/M∞（Mt為t時(shí)間釋放量，M∞為∞時(shí)累積釋放量）和時(shí)間（t）進(jìn)行擬合[6]，結(jié)果見表2。由表2可見釋藥曲線以零級(jí)釋藥方程擬合時(shí)，其擬合度最大，均方誤差最小，擬合最佳。因此，零級(jí)釋藥模型為該制劑釋放的最佳擬合模型，達(dá)到了控釋設(shè)計(jì)要求。

表2 體外釋放模型擬合結(jié)果

3 討 論

本實(shí)驗(yàn)以擠出滾圓法制備了含藥量70%的SARP載藥丸芯，丸芯圓整度較好，脆碎度佳，目標(biāo)粒徑收率較高，并以Eurdragit NE30D水分散體作為控釋衣膜材料制備了SARP控釋微丸。

3.1 載藥丸芯制備

擠出滾圓法制備微丸，軟材的性質(zhì)是決定載藥丸芯成型好壞的關(guān)鍵因素。MCC有 “分子海綿”之稱，被認(rèn)為是良好的“成球促進(jìn)劑”[7]，也是本實(shí)驗(yàn)處方中微丸主要的賦形劑。處方中MCC所占比例較大時(shí)制得的微丸圓整度較好，硬度較大，脆碎度較佳，但對(duì)于難溶性藥物而言比例較大可能會(huì)阻滯藥物的釋放。處方中添加適當(dāng)比例的淀粉可提高微丸收率，亦可改善藥物的釋放速率；表面活性劑可顯著改善軟材的性質(zhì)，使軟材具有良好的粘彈性，對(duì)提高微丸的圓整度有一定作用。

3.2 載藥丸芯質(zhì)量評(píng)價(jià)

載藥丸芯的質(zhì)量直接影響控釋微丸的釋放度。丸芯粒徑差異大，造成表面積不同，密度不同，含主藥比例不同，影響微丸釋放度和含量的均勻性。丸芯圓整度，影響控釋材料在微丸表面包裹的完整性和厚度差異進(jìn)而影響控釋微丸的釋放行為。因此在進(jìn)行包衣前應(yīng)對(duì)所制備載藥丸芯進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)。以丸芯的脆碎度、粒徑大小、粒徑均勻度和圓整度應(yīng)作為主要評(píng)價(jià)指標(biāo)。

3.3 緩釋微丸的制備

對(duì)于膜控性緩釋微丸，控釋膜包衣是影響微丸釋放行為的決定性因素。包衣膜材的種類，包衣增重以及包衣膜的熱處理溫度和時(shí)間均對(duì)藥物釋放有影響。

3.3.1 隔離衣主藥SARP對(duì)溶液pH敏感，遇水易發(fā)生水解反應(yīng)，為提高SARP載藥丸芯的穩(wěn)定性，對(duì)丸芯包隔離衣可起到一定的防潮作用，同時(shí)可減小微丸的脆碎度，進(jìn)而有利于控釋包衣，防止控釋微丸出現(xiàn)突釋現(xiàn)象。

3.3.2 控釋衣根據(jù)Ficks擴(kuò)散第一定律：-（dc/dt）=D·g·Q·（c1-c2）/d，其中 D 為藥物的擴(kuò)散系數(shù)，藥物釋放速率主要由微丸包衣膜的通透性（g）、衣膜厚度（d）、膜內(nèi)外的濃度梯度（c1-c2）決定。 包衣膜的通透性主要同增塑劑與致孔劑的用量有關(guān)，衣膜的厚度與包衣增重相關(guān)。

本實(shí)驗(yàn)中選用的控釋衣膜材Eurdragit NE30D無需外加增塑劑及致孔劑，因而藥物的釋放主要與包衣增重有關(guān)。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，包衣膜增重越大，藥物釋放越緩慢。這與Fick擴(kuò)散第一定律相一致。包衣增重較小時(shí)，包衣液不能完全包覆微丸表面或不能在微丸表面形成完整連續(xù)的衣膜，因而微丸釋放出現(xiàn)突釋現(xiàn)象。包衣增重較大時(shí)，微丸表面衣膜厚度較大，藥物從衣膜內(nèi)側(cè)向外側(cè)遷移的路徑增加，阻滯力增大，藥物釋放明顯變得緩慢。

3.3.3 包衣膜的熱處理水性分散體包衣液成膜時(shí)必須經(jīng)過膜愈合過程，使聚合物粒子相互融合形成連續(xù)致密的衣膜。雖然包衣過程中伴隨著膜的愈合，但并不能完全完成包衣膜的愈合，需在包衣結(jié)束后，作進(jìn)一步的熱處理，使衣膜愈合完全[8]。熱處理溫度與時(shí)間直接影響著微丸的釋放度，故在工藝研究時(shí)需對(duì)其進(jìn)行考察。衣膜的熱處理溫度因所選膜材而異，對(duì)于Eurdragit NE30D而言，溫度過高（＞70℃），粘連衣膜軟化，反而不利于膜的愈合和完整。溫度過低（＜40℃），不能達(dá)到衣膜愈合的最低溫度，衣膜不易愈合或所需熱處理時(shí)間較長，人力物力耗費(fèi)較大。

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