香附舒經(jīng)軟膠囊治療痛經(jīng)作用及其機(jī)理研究

李松濤，車 勇，張 芳，馬麗虹，張利華，吳海峰

(1.山東醫(yī)藥技師學(xué)院，山東泰安271016;2.山東中醫(yī)藥大學(xué)，山東 濟(jì)南250335)

痛經(jīng)為婦女經(jīng)期常發(fā)病癥，傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)認(rèn)為痛經(jīng)的病因有四種類型，以氣滯血瘀型最為常見。西醫(yī)治療痛經(jīng)通常根據(jù)癥狀采用止痛、鎮(zhèn)靜和解痙類藥物及激素類藥物以緩解癥狀，但存在有服用周期長，復(fù)發(fā)率高，副作用大的弊端，難以達(dá)到根治的目的。香附舒經(jīng)軟膠囊在古方艾附丸(《澹寮集驗秘方》)的組方基礎(chǔ)上，結(jié)合多年的臨床應(yīng)用經(jīng)驗加減方研制而成，處方包括香附、赤芍、當(dāng)歸、艾葉、牛膝五味中藥，根據(jù)藥物特點及應(yīng)用需要制備成軟膠囊制劑，用于治療氣血瘀滯型痛經(jīng)。本研究通過香附舒經(jīng)軟膠囊對小鼠痛經(jīng)模型鎮(zhèn)痛作用及相關(guān)激素的影響，初步探討其作用機(jī)制，為今后臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。

1 實驗材料

1.1 藥品和試劑 香附舒經(jīng)軟膠囊藥物內(nèi)容物(由山東醫(yī)藥技師學(xué)院GMP車間提供，批號:201106171)。戊酸雌二醇(法國 DELPHARM LILLE S.A.S，批號 223A2);催產(chǎn)素注射液(上海禾風(fēng)制藥有限公司，批號120302);冰醋酸(天津天達(dá)凈化材料精細(xì)化工廠，批號XK13－201－00135);生理鹽水(0.9%氯化鈉，四川科倫藥業(yè)股份有限公司，批號120106);PGE測定試劑盒(紫外分光光度法，南京建生物工程研究所，批號20120305)。

1.2 受試動物 小白鼠:昆明種、雌性、健康適齡，體重18～22 g，購自山東大學(xué)實驗動物中心。合格證號:Scxk魯2011001。

1.3 試驗儀器 恒溫麥?zhǔn)显〔?南京分析儀器廠;DC－001型離體器官測定儀:南京分析儀器廠，GB303基本型電子天平:Mettler－Totado公司生產(chǎn);超級恒溫水浴:上海醫(yī)用電子設(shè)備廠。UV2100紫外－可見分光光度計:中美上海Unico色譜儀器公司。

2 實驗方法與結(jié)果

2.1 對催產(chǎn)素所致的小鼠痛經(jīng)模型的影響 取體重18～22 g雌性小鼠40只，隨機(jī)分為4組，以雌激素和催產(chǎn)素制造原發(fā)性痛經(jīng)模型［1］。連續(xù)灌胃給藥戊酸雌二醇10 d(第1天:2 mg·kg－1，第2 ～9 天:1 mg·kg－1，第10 天:2 mg·kg－1)，第6天開始，上午給藥戊酸雌二醇，下午灌胃給藥香附舒經(jīng)軟膠囊高、中、低劑量和蒸餾水，各組小鼠均按0.25 mL/10 g灌胃給藥，每日1次，連續(xù)給藥5 d。末次給藥戊酸雌二醇后24 h，灌胃給藥香附舒經(jīng)軟膠囊45 min后，腹腔注射催產(chǎn)素20 μ·kg－1，隨即記錄注射催產(chǎn)素后15 min內(nèi)小鼠發(fā)生扭體反應(yīng)的潛伏期、扭體次數(shù)，計算其抑制率，疼痛抑制率 =(空白對照組扭體次數(shù)－藥物組扭體次數(shù))/空白對照組扭體次數(shù)×100%。結(jié)果進(jìn)行組間統(tǒng)計學(xué)處理，見表1。

表1 香附舒經(jīng)軟膠囊對催產(chǎn)素所致小鼠痛經(jīng)模型的影響(n=10)

2.2 對痛經(jīng)模型小鼠子宮內(nèi)PGE2合成的抑制作用 將上述痛經(jīng)模型實驗后的小鼠迅速脫頸椎處死，剖腹剝離取出子宮，稱重后加入冰凍的生理鹽水，制成10%的混懸液，用組織均漿器制成均漿，以3 000 r·min－1低溫離心30 min;取上清液冷凍保存?zhèn)溆?。按試劑盒的說明操作，在波長278 nm處，用UV－2100紫外分光光度計測定其吸光度(A)值，進(jìn)行組間t檢驗，結(jié)果見表2。

3 試驗結(jié)論與討論

3.1 實驗研究結(jié)果顯示，在喂飼雌激素戊酸雌二醇，腹腔注射催產(chǎn)素后即可引起小鼠的扭體反應(yīng)，出現(xiàn)類似痛經(jīng)表現(xiàn)。香附舒經(jīng)軟膠囊高、中、低劑量可以明顯延長催產(chǎn)素誘發(fā)小鼠扭體反應(yīng)的潛伏期，減少30 min內(nèi)的扭體次數(shù)，其中高、中劑量與水對照組比較均有不同程度的顯著性差異，驗證了該藥物對痛經(jīng)模型小鼠具有較好的鎮(zhèn)痛作用。

表2 香附舒經(jīng)軟膠囊對小鼠子宮內(nèi)PGE2含量的影響(n=10)

3.2 原發(fā)性痛經(jīng)的發(fā)病機(jī)理較為復(fù)雜，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為原發(fā)性痛經(jīng)的發(fā)生與前列腺素有著密切關(guān)系［2，3］，子宮合成和釋放前列腺素增加，是痛經(jīng)的主要原因。香附舒經(jīng)軟膠囊能抑制小鼠子宮組織內(nèi)PGE2的合成，高、中劑量和低劑量與空白對照組比較分別有極顯著性和顯著性差異，其止痛作用機(jī)理與抑制子宮組織內(nèi)PGE2的生成有一定關(guān)系。

3.3 現(xiàn)代藥理研究證明，香附、當(dāng)歸、牛膝等藥均可抑制子宮收縮，降低平滑肌張力，抑制子宮內(nèi)膜合成和釋放PGE2，解除和減弱PG對子宮平滑肌產(chǎn)生痙攣，起到治療痛經(jīng)的作用。本實驗顯示香附舒經(jīng)軟膠囊具有治療痛經(jīng)的作用，可以明顯降低小鼠子宮組織內(nèi)PGE2含量，提示抑制前列腺素PG的合成是其鎮(zhèn)痛的機(jī)制之一。本實驗只從部分影響因素考察該制劑治療痛經(jīng)的機(jī)制，其治療痛經(jīng)完整的機(jī)理有待進(jìn)一步研究。

［1］孫海燕，曹永孝，劉靜，等.小鼠痛經(jīng)模型的建立［J］.中國藥理學(xué)通報，2002，18(2):233 －236.

［2］方玲，朱新冰，祝誠誠，等.經(jīng)前三劑止痛方治療原發(fā)性痛經(jīng)的機(jī)制研究［J］.中草藥，2010，41(4):615－617.

［3］鄭雪凌.痛經(jīng)及其藥物治療的研究進(jìn)展［J］.齊魯藥事，2006，25(8):491－492.