人工常規(guī)精液分析與計算機輔助精子質(zhì)量分析的比較研究

王軍 于靈

對精液質(zhì)量進行分析，是評價和檢測男性的生育功能重要的檢測項目，以前臨床實驗室多應(yīng)用經(jīng)典精液分析的方法。伴隨計算機技術(shù)應(yīng)用,計算機輔助精子質(zhì)量的分析：圖像處理技術(shù)和計算技術(shù)在精子質(zhì)量的檢測、觀察，及對精子靜 (動)態(tài)圖像的分析，為臨床精子質(zhì)量的各項檢測項目提供準確的數(shù)據(jù)。本文對計算機輔助精子質(zhì)量分析[1]：檢測系統(tǒng)對就診患者的精液標(biāo)本進行計算機輔助精液分析（CASA）的同時使用常規(guī)精液分析方法（SRA）分析，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

表1 CASA重復(fù)性測定的統(tǒng)計學(xué)分析

表2 CASA與人工檢測主要參數(shù)的相關(guān)性

1 材料與方法

1.1 材料

精液標(biāo)本均來自2011年8月～2011年11月行精液常規(guī)檢查的患者。囑患者禁欲3d～5d,用手淫方法取精,36.5℃～37℃孵育30min,液化后檢測。計算機輔助精子質(zhì)量分析與常規(guī)精液分析的對比性研究。

1.2 方法

SRA將整份的標(biāo)本液化,按WHO所規(guī)定的方法和標(biāo)準檢測分析,詳細的記錄精子活率、活力及密度。為降低誤差,CASA和SRA由一名檢驗師操作,檢測進行前，可先進行演習(xí)試驗,以達到操作過程規(guī)范。CASA在整份精液標(biāo)本中取10μl的樣品放置Macro子計數(shù)板上,將蓋玻片蓋好,將精子計數(shù)及精液標(biāo)本的環(huán)境溫度保持在36.5℃～37℃。一個精液樣本在×100倍放大，×250倍放大的顯微鏡下進行6次檢測,以證明系統(tǒng)重復(fù)性。記錄精子活率、活力和密度，如精子畸形率、精子動態(tài)運動指標(biāo)、圓細胞數(shù)量及一般特點。反復(fù)性分析及放大不同倍數(shù)檢測的數(shù)據(jù)一致性，采用獨立樣本t檢驗。人工精液分析各項指標(biāo)和CASA對比t檢驗相關(guān)性分析。

2 結(jié)果

2.1 CASA的一致性和重復(fù)性分析，一個標(biāo)本反復(fù)6次檢測, 精子活率、活力和密度等指標(biāo)的差異都很小,×100倍放大，×250倍放大顯微鏡下檢測數(shù)據(jù)無顯著性差異(P＞0.05),顯示該檢測系統(tǒng)有良好可重復(fù)性,放大倍數(shù)不同但一致性較好。詳細見表1。

2.2 人工檢測和CASA的相關(guān)性，進行彩色精子檢測系統(tǒng)，進行檢測精子活率、密度及a+b級的精子與人工精液的分析結(jié)果存在很大的相關(guān)性,r均＞0.9。詳細見表2。

3 討論

對精液進行分析是生殖醫(yī)學(xué)、計劃生育、男子不育等臨床診療及醫(yī)學(xué)研究工作中很重要的檢查項目。人工精液分析方法具有直觀、檢測面廣等優(yōu)點，最大不足是易受檢測操作者的主觀影響，同一人的反復(fù)精液檢測結(jié)果差異很大，排除患者自身原因，操作者的主觀影響很大。特別是精子活率和活力的統(tǒng)計大部分根據(jù)檢查者的主觀理論及經(jīng)驗來判斷，判斷的準確性直接影響到診療的方向及科研工作成果的準確性。精子質(zhì)量分析儀特點為客觀、易操作、快速、自動打印、簡便的優(yōu)點，可比性強，重復(fù)性好，降低了人工檢測誤差，為科研和臨床提供了規(guī)范化、標(biāo)準化和科學(xué)化的有利條件。

CASA技術(shù)避免了SRA的主觀影響因素,不但可以快速檢測精子活率、活力和密度等參數(shù),還可顯示運動軌跡,分析精子運動有關(guān)的數(shù)據(jù)。在保證規(guī)范操作的基礎(chǔ)上,CASA對精子的密度檢測結(jié)果是準確的。在行計算機輔助精液分析時計算機采集圖像檢測數(shù)據(jù)(范圍)為正常精液，所以對少、弱精子進行自動分析,參數(shù)設(shè)置有誤差,檢測數(shù)據(jù)就有差異。CASA系統(tǒng)對精子識別時,應(yīng)將閾值及灰度設(shè)置可全部采集精子而不進行卵+磷脂小體采集等非精子成份物質(zhì),這樣圖像上就可準確看到被分割來的精子,系統(tǒng)標(biāo)記精液的非精子物質(zhì),例如各類圓胞等,要精確統(tǒng)計,在圓細胞數(shù)顯示一欄輸入,更好計算分析時取舍。檢測精子活力時,CASA可克服其自身的缺陷。判斷精子的活率時,應(yīng)進行肉眼觀察，不能僅靠CASA。在精液CASA檢測時,可重點發(fā)揮精子動態(tài)運動數(shù)據(jù)檢測上的特點。使用兩種方法，對精液全面的統(tǒng)計分析，可為臨床提供準確的依據(jù)。

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