不同方法學(xué)檢測(cè)乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果評(píng)價(jià)

盧桂香

乙型肝炎在我國(guó)有很高的發(fā)病率，乙型肝炎血清標(biāo)志物的檢查是診斷該病的主要手段。傳統(tǒng)的檢測(cè)方法為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA），近年來(lái)時(shí)間分辨免疫熒光法（TRFIA）和電化學(xué)發(fā)光法（ECLIA）的應(yīng)用也越來(lái)越多[1]。筆者采用3種方法對(duì)乙型肝炎血清標(biāo)志物進(jìn)行檢測(cè)，比較3種方法的檢測(cè)靈敏度及精神度，現(xiàn)將結(jié)果總結(jié)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

90例病例均為我院2011年1月～2011年12月采用采用電化學(xué)發(fā)光法（ECLIA）證實(shí)的乙型肝炎病毒（HBV）感染患者，所有患者均符合乙型肝炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)，其中男性患者61例，女性患者29例；年齡18～55歲。同時(shí)選取45例體檢健康者的血清。

1.2 儀器試劑

ELISA檢測(cè)使用安圖生物公司PHOMO酶標(biāo)儀，試劑盒由珠海麗珠生物公司提供；TRFIA檢測(cè)使用上海新波生物技術(shù)公司生產(chǎn)的ANYTEST時(shí)間分辨免疫熒光分析儀，試劑盒由上海新波生物提供；ECLIA檢測(cè)使用德國(guó)LIAISON電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及配套的試劑。

1.3 結(jié)果判定

根據(jù)試劑盒中的說(shuō)明書(shū)中給出的Cut-off值對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行判斷。患者血液經(jīng)夾心法檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果＞Cut-off值為陽(yáng)性，經(jīng)競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果＜Cut-off值為陽(yáng)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)與分析，檢測(cè)結(jié)果的一致性使用Kappa檢驗(yàn)，抽樣誤差的影響通過(guò)μ檢驗(yàn)進(jìn)行排除。檢測(cè)結(jié)果一致性的程度分為6個(gè)區(qū)段：極強(qiáng)，Kappa系數(shù)0.81-1.0；高度，Kappa系數(shù)0.61～0.8；中度，Kappa系數(shù)0.41～0.6；弱，Kappa系數(shù)0.21～0.4；微弱，0～0.2；極差，Kappa系數(shù)＜0。

2 結(jié)果

2.1 ELISA與ECLIA方法檢測(cè)結(jié)果比較

所有患者的血清中的乙型肝炎標(biāo)志物采用ELISA與ECLIA方法檢測(cè)的結(jié)果比較見(jiàn)表1。

2.2 TRFIA與ECLIA方法檢測(cè)結(jié)果比較

所有患者的血清中的乙型肝炎標(biāo)志物采用TRFIA與ECLIA方法檢測(cè)的結(jié)果比較見(jiàn)表2。

表1 ELISA與ECLIA方法檢測(cè)乙型肝炎標(biāo)志物的結(jié)果比較

3 討論

目前，全球的乙型肝炎病毒攜帶者據(jù)報(bào)道有將近3億人，而我國(guó)的乙型肝炎病毒攜帶者大約有1.3億[2]，是世界上的乙肝高發(fā)國(guó)。乙型肝炎血清標(biāo)志物是乙肝患者的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)，其檢測(cè)方法是臨床技術(shù)人員一直以來(lái)高度重視的方面。其最早的檢測(cè)方法為免疫擴(kuò)散試驗(yàn)、對(duì)流免疫電泳試驗(yàn)等，目前比較常用的檢測(cè)方法為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、電化學(xué)發(fā)光法、時(shí)間分辨免疫熒光法、聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測(cè)以及更高級(jí)的免疫PCR檢測(cè)方法等[3]。其中電化學(xué)發(fā)光法是目前臨床上敏感性及特異性均最好的檢測(cè)方法。本組研究中，以電化學(xué)發(fā)光法作為參考方法，而酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)及時(shí)間分辨免疫熒光法的檢測(cè)與之進(jìn)行比較。

從本組研究結(jié)果可以得出，目前使用最多的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)與電化學(xué)發(fā)光法在HBeAG的檢測(cè)上具有極強(qiáng)的一致性，而其余四項(xiàng)的檢測(cè)為高度一致性。說(shuō)明酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)一直具有很好的特異性。但其敏感性仍有略微的不足[4]。本組研究顯示，時(shí)間分辨免疫熒光法和電化學(xué)發(fā)光法在HBsAg、HBeAg、抗HBe、抗HBc的檢測(cè)上具有極強(qiáng)的一致性，而在抗HBs的檢測(cè)上具有高度一致性。但在檢測(cè)健康者血清時(shí)反應(yīng)出時(shí)間分辨免疫熒光法的特異并不是十分理想。但目前時(shí)間分辨免疫熒光法的試劑已經(jīng)國(guó)產(chǎn)化，從而大大的降低了試驗(yàn)的成本，在一定情況下可以替代進(jìn)口的試劑[5]。

綜上所述，目前實(shí)驗(yàn)室中所使用的血清乙型肝炎標(biāo)志物的檢測(cè)方法具有較高的一致性，可以用于實(shí)驗(yàn)室之間的相互確認(rèn)試驗(yàn)。

[1]陳佑明,黃敬,熊符,等.時(shí)間分辨熒光免疫分析法和免疫放射分析法檢測(cè)HBsAg的對(duì)比分析[J].標(biāo)記免疫分析與臨床,2006,13(1):50-51.

[2]毛一雷，杜順達(dá).進(jìn)一步完善原發(fā)性肝癌的術(shù)前評(píng)估體系[J].中華外科雜志，2010，48（20）：1530-1533.

[3]奚錦芳.86名臨床檢驗(yàn)人員HBV血清標(biāo)志物結(jié)果分析[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué),2010,16(15):88-89.

[4]劉伶.乙型肝炎病毒(HBV)熒光定量檢測(cè)與免疫學(xué)標(biāo)志物檢測(cè)的比較與分析[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué),2009,15(16):61-62.

[5]趙秀英,陳俊梅,辛永梅,等.不同方法檢測(cè)乙型肝炎病毒血清標(biāo)志物的差異[J].肝臟,2008,13(4):303-305.