老年鼻咽癌組織增殖細(xì)胞核抗原、血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)與PET/CT顯像FDG攝取的相關(guān)性

郭立兵 石衛(wèi)民 宋維舒 范義湘 胡偉漢 金 廳

(廣東省第二人民醫(yī)院腫瘤一科，廣東 廣州 510317)

近十年來(lái)脫氧葡萄糖(FDG)正電子發(fā)射體層顯像CT(PET/CT)已經(jīng)廣泛地應(yīng)用于惡性腫瘤的診斷，分期，療效評(píng)估等，臨床研究發(fā)現(xiàn)18氟FDG(18F-FDG)/PET顯像對(duì)鼻咽癌的診斷也具有重要的價(jià)值，腫瘤組織較正常組織18F-FDG的攝取顯著增加〔1〕，但其機(jī)制并不清楚?？赡芷渑c腫瘤組織快速增殖有關(guān)〔2，3〕，也可能與腫瘤細(xì)胞微環(huán)境乏氧有關(guān)〔4，5〕。因此，本文探討老年鼻咽癌組織增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)過(guò)度表達(dá)與18F-FDG PET顯像攝取的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 資料 選擇2008年6月至2010年8月我院和中山大學(xué)腫瘤防治中心收治的38例老年鼻咽癌患者。病例納入標(biāo)準(zhǔn):年齡≥60歲、首程治療、無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的早期鼻咽癌患者;卡氏功能狀況評(píng)分(KPS)＞70分;自然生存期＞2年;能進(jìn)行語(yǔ)言及文字溝通。其中男34例，女6例，年齡60～78(平均65.7±5.2)歲;按鼻咽癌UICC 2002分期，Ⅰ期9例，Ⅱ期31例;T分期:T1 17例;T2 23例;全部采用6 MV加速器先行面頸聯(lián)合野照射，后縮野改耳前野照射，鼻咽部總劑量為68～72 Gy，頸部組織預(yù)防量為46～50 Gy，陽(yáng)性淋巴結(jié)推量18～20 Gy;患者均于放療前行PET/CT檢查。

1.2 方法

1.2.1 PET檢查 采用德國(guó)西門子公司產(chǎn)Biograph PET/CT掃描儀。檢查前禁食6 h以上，按150 μCi/kg靜脈給予FDG，給藥1 h后開(kāi)始采集。采用三維采集模式與全身PET采集程序，取5～6個(gè)床位，每個(gè)床位發(fā)射采集與透射掃描時(shí)間比較為7∶3。以迭代法重建圖像，層厚5 mm，測(cè)量腫瘤的最大標(biāo)準(zhǔn)攝取值(SUVmax)，用感興趣區(qū)(ROI)工具測(cè)量同一層面的平均攝取值(WUVmean)。

1.2.2 PCNA，VEGF表達(dá)檢測(cè) 采用免疫組化方法。腫瘤標(biāo)本經(jīng)過(guò)4%甲醛固定，石蠟包埋，應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)鏈霉菌抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶親和(SP)免疫組化法染色。SP染色試劑盒為福州邁新生物試劑公司產(chǎn)品。染色陽(yáng)性細(xì)胞率:由有經(jīng)驗(yàn)的病理醫(yī)生分別在顯微鏡上隨機(jī)選擇3個(gè)低倍視野(100倍)，計(jì)數(shù)每張切片上至少100個(gè)細(xì)胞中VEGF、PCNA染色陽(yáng)性的細(xì)胞數(shù)，計(jì)算其陽(yáng)性細(xì)胞的百分率;計(jì)數(shù)3次，取其平均值為染色陽(yáng)性細(xì)胞率。分為5級(jí)記錄:1級(jí)0～20%，2級(jí)21% ～40%，3級(jí)41% ～60%，4級(jí)61% ～80%，5級(jí)81% ～100%。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS14.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)資料以±s表示，計(jì)量資料比較采用t檢驗(yàn)，陽(yáng)性率比較采用χ2檢驗(yàn)，不同指標(biāo)之間的關(guān)系比較采用Pearson相關(guān)分析。

2 結(jié)果

2.1 PET檢查結(jié)果 40例患者的鼻咽癌原發(fā)灶在PET檢查中均顯影，見(jiàn)圖1。原發(fā)灶的 SUVmax與 SUVmean分別為9.45±1.87和6.04±1.09。T1期腫瘤原發(fā)灶的 SUVmax為8.95±1.91，T2期原發(fā)灶的 SUVmax為11.55±1.70，T1期原發(fā)灶SUVmax低于T2期(t=4.46，P＜0.001);非角化分化型腫瘤原發(fā)灶SUVmax為 9.64±1.72，非角化未分化型腫瘤原發(fā)灶SUVmax為9.74±1.82，非角化未分化型腫瘤原發(fā)灶SUVmax為10.44±2.16，兩者比較無(wú)顯著差異(t=1.230，P ＞0.05)。

2.2 腫瘤細(xì)胞PCNA及VEGF表達(dá) 40例鼻咽癌患者腫瘤組織的PCNA染色均為陽(yáng)性，陽(yáng)性細(xì)胞率為36.18%，其中1級(jí)8例，2級(jí)19例，3級(jí)6例，4級(jí)2例，5級(jí)1例。鼻咽癌組織PCNA染色陽(yáng)性細(xì)胞呈散在分布，無(wú)明顯區(qū)域性。PCNA陽(yáng)性信號(hào)為棕黃色，定位于細(xì)胞核，見(jiàn)圖2。40例鼻咽癌患者腫瘤組織VEGF染色均為陽(yáng)性，陽(yáng)性細(xì)胞率為60.8%，其中1級(jí)4例，2級(jí)6例，3級(jí)10例，4級(jí)16例，5級(jí)4例。VEGF陽(yáng)性表達(dá)部位在細(xì)胞質(zhì)，胞膜也有輕度染色，在壞死組織周圍和癌巢邊緣的表達(dá)明顯增強(qiáng)，并且在癌細(xì)胞向間質(zhì)浸潤(rùn)最明顯處表達(dá)最強(qiáng)。見(jiàn)圖2。

2.3 腫瘤原發(fā)灶的FDG攝取與PCNA、VEGF表達(dá)的關(guān)系鼻咽癌組織FDG攝取(SUV max)與PCNA表達(dá)陽(yáng)性率無(wú)相關(guān)(r=0.135，P=0.407)，與 VEGF 表達(dá)陽(yáng)性率相關(guān)(r=0.460，P=0.03)。見(jiàn)圖3，圖4。

圖1 鼻咽癌PET顯像

圖2 鼻咽癌的PCNA、VEGF表達(dá)

圖3 鼻咽癌組織FDG表達(dá)(SP法，×100)

圖4 鼻咽癌組織FDG攝取(SUVmax)與PCNA、VEGF表達(dá)陽(yáng)性率的相關(guān)性

3 討論

臨床研究表明，18F-FDG-PET顯像對(duì)鼻咽癌的診斷、鑒別診斷、分期均具有重要的價(jià)值，本研究發(fā)現(xiàn)，老年早期鼻咽癌患者癌組織的SUV值較高，高于其他部頸部惡性腫瘤〔6～9〕，說(shuō)明其高代謝和生長(zhǎng)增殖旺盛，腫瘤原發(fā)灶的FDG攝取與T分期相關(guān)，與腫瘤分化程度無(wú)明顯相關(guān)，與報(bào)道相似。

LEGF在腫瘤血管生成中處于核心地位，在多種實(shí)體瘤表達(dá)異常升高。缺氧誘導(dǎo)VEGF合成，促進(jìn)新生血管的形成，增加血管的通透性，進(jìn)而促進(jìn)了腫瘤的浸潤(rùn)發(fā)展和轉(zhuǎn)移〔10〕。本研究顯示，40例老年鼻咽癌患者的腫瘤組織VEGF染色均為陽(yáng)性，且染色陽(yáng)性細(xì)胞率集中于2～3級(jí)，與文獻(xiàn)報(bào)道一致〔11〕。有研究發(fā)現(xiàn)，小細(xì)胞肺癌和乳腺癌組織FDG-PET顯像的SUV值與腫瘤組織的微血管密度相關(guān)，與VEGF的表達(dá)相關(guān)，而與腫瘤分化、細(xì)胞增殖情況等與無(wú)關(guān)〔4，5〕。本研究顯示，鼻咽癌組織FDG攝取(SUVmax)與VEGF表達(dá)的陽(yáng)性率相關(guān)。

PCNA是DNA聚合酶δ的輔助蛋白，與細(xì)胞周期的增殖周期密切相關(guān)，其表達(dá)情況反映了細(xì)胞的增殖狀態(tài)。PCNA在鼻咽癌組織中常過(guò)表達(dá)，并且與腫瘤的臨床分期、頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)〔12〕。本研究中40例老年鼻咽癌組織標(biāo)本全部都有PCNA表達(dá)，陽(yáng)性細(xì)胞率為36.18%，與以往報(bào)道相似〔13〕。理論上腫瘤細(xì)胞的增殖會(huì)影響腫瘤18F-FDG的攝取，但既往的研究中二者的關(guān)系則存在爭(zhēng)議。在一些研究中，18F-FDG與腫瘤組織增殖相關(guān)〔2，3〕，而另外一些研究中發(fā)現(xiàn) FDG攝取與增殖無(wú)關(guān)〔14〕。本研究顯示，老年鼻咽癌組織18F-FDG攝取與腫瘤細(xì)胞的PCNA蛋白表達(dá)無(wú)相關(guān)。

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