秦利強(qiáng) 李芳俠
大理學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,云南大理 671000
血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)早期亦稱作血管通透因子(VPF),是對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞具有特異性的肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子,可在體內(nèi)誘導(dǎo)血管新生。有研究表明,血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)和腎臟疾病是密切相關(guān)的[1]。本研究通過(guò)觀察血清的變化及VEGF指標(biāo)的監(jiān)測(cè),討論其在疾病發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制。
2008年6—12月收治于該院腎內(nèi)科的住院患者111例,分為治療組(58)和免疫抑制治療組(53)。主要原發(fā)性腎小球疾病患者(GD)94例,臨床分類:腎病綜合征(NS)39例,其中 22例為腎病期,17例為有效緩解期,24例為慢性腎炎(CGN),7例為隱匿性腎炎(LGN)。17例為繼發(fā)性腎小球腎炎(GD),其中11例為紫癜腎炎(HSPN),6例為狼瘡性腎炎(LN)。兩組的人口學(xué)資料(除了LN組)類似(P > 0.05)。
1.2.1 標(biāo)本采集和保存 對(duì)照組和患者早晨禁食采集靜脈血(沒(méi)有抗凝),冷藏 3 h(4℃),在 2500 r/min的速度下分離血清,時(shí)間為10 min,在-40℃冰箱保存,同批測(cè)定血清VEGF質(zhì)量濃度。
1.2.2 VEGF的測(cè)定 采用雙抗體夾心ABCELISA方法。將標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品加入相應(yīng)孔中,置37°C水浴箱孵育120 min,洗板。每個(gè)孔加入第一抗體溶液在50 uL混合好,設(shè)置為37°C水浴孵育60 min,洗板。每個(gè)孔再加上100 uL酶抗體工作液,在37°C水浴孵育60 min,洗板。每一個(gè)孔板添加底物工作液100 Ul,在37°C暗環(huán)境中反應(yīng)5~10 min。每孔加入1滴終止液,均勻混合,終止5 min,用自動(dòng)酶標(biāo)儀以492 nm波長(zhǎng)讀板。
用SPSS 10.0進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。
對(duì)照組的濃度血清 VEGF質(zhì)量濃度為(21.32±13.97)ng/L,患者為(57.89±93.87)ng/L,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P < 0.01)。
臨床各組間 CGN、LGN、HSPN、LN血清 VEGF高于對(duì)照組(P <0.05或 P < 0.01),NS組與對(duì)照組,差異不顯著(P > 0.05),低于其他臨床組(P<0.05或P<0.01);除了NS組,其余的臨床分組血清VEGF之間,無(wú)顯著性差異(P>0.05)。
NS腎病患者血清VEGF濃度NS(42.53±52.70)ng/L,緩解(17.75±14.08)ng/L,P<0.05,與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
VEGF是血管內(nèi)皮細(xì)胞促有絲分裂原,它的生物功能包括:①?gòu)?qiáng)大的促進(jìn)血管形成和增長(zhǎng),增加血管通透性和容量,它促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞遷移和發(fā)芽增長(zhǎng)和形成管狀結(jié)構(gòu),增加了內(nèi)皮滲透性,促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)堆積在血管內(nèi)皮細(xì)胞;②VEGF能刺激內(nèi)皮細(xì)胞己糖運(yùn)輸,并促進(jìn)細(xì)胞黏附分子(ICAM-1)、血管細(xì)胞粘附分子(VCAM-1)在內(nèi)皮細(xì)胞的表達(dá),促進(jìn)單核趨化性、誘導(dǎo)粒-巨系原始細(xì)胞克隆形成,抑制不成熟的抗原呈遞細(xì)胞的成熟等。腎小球足突細(xì)胞分泌的VEGF、腎小球血管內(nèi)皮細(xì)胞表面VEGF受體,因子相互作用,共同維護(hù)基底膜的完整性和正常的功能[2]。
在一些病理情況下,VEGF的異常表達(dá)可能與腎臟疾病有關(guān),可推測(cè)早期腎組織炎癥反應(yīng)廣泛的破壞腎小球內(nèi)臟上皮細(xì)胞,造成細(xì)胞內(nèi)存儲(chǔ)的VEGF釋放巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)的腎小球MC能釋放和激活VEGF,腎小球滲透率增加,蛋白尿生成和增加炎癥反應(yīng)。隨著病情的發(fā)展,細(xì)胞損傷或腎小球會(huì)降低一系列的沉積功能障礙。VEGF不利于腎小球毛細(xì)血管的修復(fù)和其他病理改變及腎功能惡化,所以可通過(guò)阻斷VEGF的表達(dá)來(lái)減輕腎組織損傷,臨床上可能有積極作用。
[1]孫晨,吳學(xué)敏,戴芳.血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子與腎臟疾病關(guān)系的研究[J].河北醫(yī)藥,2010(10):1294-1296.
[2]鐘曉容,莊永澤.血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子及其受體在腎臟疾病中的研究進(jìn)展[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志,2009,10(7):642-644.