神木縣PRRSV與PCV-2的血清學調查

孟建斌，溫志醫(yī)，王興龍，穆國輝，賀生芳，王須田，李 梅，高子華，劉飛鵬，項艷龍，王治華，楊增岐＊

（1.神木縣動物疾病預防控制中心，陜西神木719300；2.西北農林科技大學動物醫(yī)學院，陜西楊凌712100）

豬繁殖與呼吸綜合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）屬于動脈炎病毒科動脈炎病毒屬，是單股RNA病毒，可分成美洲型和歐洲型2個基因型。近年來PRRS在國內廣泛流行，并且病毒不斷變異，新的流行毒株不斷涌現(xiàn)［1］。2006年出現(xiàn)的具有高致病性特征的PRRSV毒株，給我國養(yǎng)豬業(yè)帶來了巨大的危害［2］，因此，防控PRRS成為現(xiàn)階段穩(wěn)定豬場生產的關鍵之一。

豬圓環(huán)病毒（Porcine circovirus，PCV）屬于圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬的成員，可以分PCV-1和PCV-2兩種基因型［3］。PCV-2對豬具有致病性，1998年美國首次從發(fā)生斷奶后多系統(tǒng)綜合征（Post-weaning multisystemic wasting syndrome，PMWS）的病豬體內分離到PCV-2［4］。隨后多個國家和地區(qū)也報道成功分離到PCV-2，并證明其與多種疾病的發(fā)生有關，如豬腎病皮炎綜合征、豬繁殖與呼吸綜合征等［5］。近年來，PCV-2對各國養(yǎng)豬業(yè)造成的危害正在不斷加劇，國內多個省份和地區(qū)先后報道了PCV-2單獨感染以及與其他病原體混合感染的病例。

目前在我國豬群內PRRSV和PCV-2單獨感染及混合感染的情況相當普遍［6］，因其都具有免疫抑制的特性，更容易引發(fā)繼發(fā)感染或導致免疫失敗，因此對其感染及流行情況進行監(jiān)測，具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 材 料

1.1.1 血樣采集 從神木縣選取20家具有100頭以上存欄規(guī)模且未進行PRRSV和PCV-2疫苗免疫接種的養(yǎng)豬場。分別從母豬群和保育期豬群隨機選5頭豬，用前腔靜脈或耳緣靜脈采血的方法采3mL～5 mL血液，取室溫下自然析出的血清進行抗體檢測。

1.1.2 PRRSV，PCV-2ELISA檢測試劑盒及酶標儀 PRRSV和PCV-2抗體檢測試劑盒均為武漢科前動物生物制品有限公司產品；酶標儀為BIO-RAD 680M。

1.2 方 法

1.2.1 酶聯(lián)免疫吸附試驗 抗體檢測嚴格按照試劑盒操作說明進行，血清在使用前保存于4℃，未經(jīng)反復凍融。

1.2.2 結果判定 在陰陽性對照成立的前提下，PRRSV或PCV-2抗體檢測結果OD630nm值大于0.42時，判斷為陽性；OD630nm值大于0.38，小于0.42時，判斷為可疑；OD630nm值小于0.38，判斷為陰性。

2 結果

2.1 PRRSV抗體檢測結果

對20家未進行PRRSV疫苗免疫接種豬場，隨機抽檢10分血樣，共檢測200份血清樣品，結果顯示，部分豬場為陰性（2／20），個別豬場感染率較高（1／20），陽性值達80%，20家豬場平均陽性檢出率為26.8%。生產母豬平均陽性率為38.6%，高于保育期仔豬的15.3%（圖1）。

2.2 PCV-2抗體檢測結果

對20家豬場進行PCV-2感染抗體監(jiān)測，結果顯示，豬群普遍存在PCV-2感染情況 ，最高感染率100%（10／10），最低感染率為60%，平均感染率為85.5%（圖2）。

2.3 PCV-2和PRRSV混和感染檢測結果

分析PRRSV和PCV-2混合感染的情況，豬群混合感染較為普遍，14家豬場存在混合感染的情況，最高混合感染率為60%（圖3）。

圖1 PRRSV抗體陽性百分率Fig.1 Positive rate of PRRSV

圖2 PCV-2抗體陽性百分率Fig.2 Positive rate of PCV-2

圖3 PRRSV和PCV-2混合感染的百分率Fig.3 PRRSV and PCV-2co-infection rate

3 討 論

PRRS是危害我國養(yǎng)豬業(yè)的最主要的傳染病之一，為調查研究其在陜西省部分地區(qū)的流行情況，本研究以神木縣規(guī)?；B(yǎng)豬場為調查對象，用血清學方法調查了PRRSV和PCV-2在該地區(qū)的感染情況，結果發(fā)現(xiàn)PRRSV抗體陽性豬比例為26.8%。陽性檢出率低于2009年王波等［7］報道的46.6%，但其檢測的為發(fā)病豬群，所以PRRSV陽性檢出率較高。另外，本次調查還發(fā)現(xiàn)部分豬場PRRSV陽性率明顯高于同期調查的其他養(yǎng)殖場，這可能與該場的飼養(yǎng)管理或引種有關。據(jù)調查PRRSV陽性率較高的2和7號豬場分別于2009年秋和2010年春從湖北、江蘇等地區(qū)進行了引種。PRRS流行情況在地區(qū)間存在差異，曹斌等［8］對江蘇地區(qū)未免疫豬場進行了的血清學調查，發(fā)現(xiàn)PRRSV陽性率高達52%，而汪照雄等［9］對湖北省的調查結果為26.38%。因此，在PRRS防控中，應當加強對該病的引種檢疫，避免或減少引入該病。

對PCV-2感染情況的調查結果發(fā)現(xiàn)該地區(qū)PCV-2感染較為普遍，明顯高于胡慧等［10］對河南省PCV-2感染情況的調查結果53.1%。由于缺少以往對該地區(qū)PCV-2感染情況的調查資料，無法分析PCV-2在該地區(qū)流行的變化規(guī)律，但是根據(jù)其他學者的研究結果，PCV-2近年來在全國多個地區(qū)流行呈上升趨勢。趙津等［11］報道華東地區(qū)2008、2009和2010年送檢樣品PCV-2的陽性檢出率分別為53.4%、35.33%和80.63%。此次研究神木2011年PCV-2平均感染率為85.5%，大多數(shù)豬中存在較高的感染率。因此，針對PCV-2感染的防疫工作應作為下一階段防疫工作的重點。

PRRSV和PCV-2共感染往往能夠造成更大規(guī)模的發(fā)病，給養(yǎng)殖場帶來更嚴重的經(jīng)濟損失，同時會增加養(yǎng)殖場日常保健的工作量和保健藥物的花費。但在多數(shù)養(yǎng)豬企業(yè)密集的地區(qū)存在嚴重的混合感染的情況，如曹洪志等研究發(fā)現(xiàn)宜賓市PRRSV和PCV-2混合感染率為21.9%［12］。本次調查同樣發(fā)現(xiàn)PRRSV和PCV-2混合感染的情況在陜西神木縣也較普遍，調查的20家養(yǎng)豬場中有14家存在混合感染的情況，最高感染率可達60%，最低10%左右。

通過血清學方法調查了陜西省神木縣PRRSV和PCV-2的感染情況，發(fā)現(xiàn)豬群中PCV-2感染率極高，成為危害豬群健康的主要疾病，研究還發(fā)現(xiàn)PRRSV和PCV-2混合感染的情況也較為普遍，應當加強對這兩種疫病的防控工作。

［1］ 安同慶，田志軍，肖 燕，等.高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒變異株主要囊膜糖蛋白GP5的遺傳變異分析［J］.中國預防獸醫(yī)學報，2008，30（11）：44 45.

［2］ Zhou Y J，Hao X F，Tian Z J，et al.Highly virulent porcine reproductive and respiratory syndrome virus emerged in China［J］.Transbound Emerg Dis，2008，55（3）：152-164.

［3］ Magar R，Muller P，Larochelle R.Retrospective serological survey of antibodies to porcine circovirus type 1and type 2［J］.Can J Vet Res，2000，64（3）：184-186.

［4］ Allan G M，McNeilly F，Kennedy S.Isolation of porcine circoviruslike viruses from pigs with a wasting disease in the United States of America and Europe［J］.J Vet Diagn Invest，1998，10：3-10.

［5］ Chae，C.A review of porcine circovirus 2-associated syndromes and diseases［J］.Vet J，2005，169：326-336.

［6］ 賈 贇，蘆銀華，張素芳，等.豬圓環(huán)病毒2型、豬繁殖與呼吸綜合征病毒及細小病毒混合感染的流行病學調查［J］.中國病毒學，2004，19（5）：467-470.

［7］ 王 波，張 鵬，楊增岐，等.陜西省PRRSV與CSFV、PCV-2、PRV混合感染的檢測［J］.西北農業(yè)學報，2009，18（5）：27-30.

［8］ 曹 斌，周廣生，王海燕.規(guī)?；i場藍耳病血清學調查［J］.中國動物檢疫，2009，26（6）：54-55

［9］ 汪招雄，楊玉瑩.湖北省豬場圓環(huán)病毒和藍耳病的血清學和流行病學調查［J］.長江大學學報：自然科學版，2010，7（4）：31-33.

［10］ 胡 慧，王亞賓，陳麗穎，等.河南地區(qū)豬圓環(huán)病毒2型感染的血清學流行病學調查［J］。畜牧與獸醫(yī)，2010，42（10）：70-71.

［11］ 趙 津，張小敏，周 斌，等.2008～2010年華東部分地區(qū)豬圓環(huán)病毒2型感染血清學調查［J］。中國動物傳染病學報，2010，18（6）：49-52

［12］ 曹洪志，楊 丁，李成賢，等.宜賓市PRRSV和PCV-2感染的流行病學調查［J］.中國動物檢疫，2010，27（6）：50-51.