石河子墾區(qū)豬場五種病原混合感染的血清學調查

李 劼，周 霞，潘譜寧，王文太，李 石，岳遠孟

（1.新疆石河子大學動物科技學院，新疆石河子832003；2.新疆兵團農八師142團獸醫(yī)站，新疆石河子832029）

豬圓環(huán)病毒（Porcine circovirus，PCV）是一種極小的動物病毒，分為PCV-1和PCV-2兩個血清型［1］。研究發(fā)現(xiàn)PCV-2具有致病性，與豬的多種疾病綜合征，如斷奶豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）、豬皮炎腎病綜合征（PDNS）、豬呼吸道綜合征（PRDC）等有關［2-3］。PCV-2感染后能誘導機體B淋巴細胞凋亡，引起免疫抑制，常導致病情復雜、繼發(fā)感染嚴重［4］。

可見，PCV-2的感染打開了其他細菌性和病毒性疾病感染的門戶，加重了病情的嚴重性和復雜性。PCV-2感染已是威脅當前世界養(yǎng)豬業(yè)的一個重要疾?。?］，給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經濟損失，已受到獸醫(yī)工作者的高度重視。

為了解石河子墾區(qū)規(guī)模豬場PCV-2混合感染其他傳染病的情況，進行了PCV-2與 Mhp、App、Hps、鏈球菌2型（SS2）4種細菌性呼吸道病混合感染的血清學調查，以期為墾區(qū)PCV-2及呼吸道綜合征 （PRDC）的綜合防控提供參考依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣品來源 2010年11月～2011年4月，隨機無菌采集石河子墾區(qū)16個規(guī)模豬場不同年齡段豬血清，共420份。其中小豬為40日齡～60日齡，育肥豬為3月齡～4月齡。

1.1.2 試劑 PCV-2、App、SS2抗體檢測ELISA試劑盒為武漢科前動物生物制品有限公司產品；Mhp抗體檢測ELISA試劑盒為北京IDEXX產品；Hps抗體間接血凝檢測試劑盒為蘭州獸醫(yī)研究所生產。

1.2 方法

1.2.1 采樣 從前腔靜脈無菌采集豬血（勻未接種過PCV-2、Mhp、App、Hps、SS2疫苗），待靜置凝固后，4 000r／min離心10min，收集血清，置-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 PCV-2血清抗體檢測 按PCV-2抗體檢測ELISA試劑盒說明書操作，檢測血清抗體。

1.2.3 混合感染情況血清學調查 對PCV-2抗體陽性血清進行Mhp、App、Hps、SS2抗體檢測，均按試劑盒說明書操作。對檢測結果進行PCV-2與Mhp、App、Hps、SS2雙重感染和多重感染分析。

2 結果

2.1 PCV-2血清抗體檢測結果

來自16個豬場的血清樣品，均檢出了PCV-2抗體陽性。墾區(qū)PCV-2感染情況比較嚴重，育肥豬陽性率最高（表1）。

表1 PCV-2血清抗體檢測結果Table 1 The results of PCV-2serum antibody detection

2.2 混合感染情況血清學調查結果

2.2.1 PCV-2分別與 Mhp、App、Hps、SS2混合感染檢測結果 PCV-2與 Mhp、App、Hps、SS2雙重混合感染情況中，以母豬混合情況最嚴重，尤其是PCV-2＋Mhp的混合感染率母豬達到100%（表2）。2.2.2 PCV-2與 Mhp、App、Hps、SS2多重混合感染檢測結果 三重混合感染情況以PCV-2＋Mhp＋SS2、PCV-2＋Mhp＋Hps、PCV-2＋ Hps＋SS2較嚴重；四重混合感染中以PCV-2＋ Mhp＋ Hps＋SS2較嚴重，而PCV-2＋ Mhp＋App＋Hps＋SS2混合感染達10.59%。

表2 PCV-2分別與Mhp、App、Hps、SS2混合感染檢測結果Table 2 The results of mixed infection of PCV-2and Mhp，App，Hps，SS2

表3 PCV-2與Mhp、App、Hps、SS2多重混合感染檢測結果Table 3 The results of multiple mixed infection of PCV-2and Mhp，App，Hps，SS2

3 討論

李龍等［6］對286份農村散養(yǎng)戶豬血清ELISA檢測表明PCV-2抗體陽性率為79.0%；吳俊等［7］報道四川省規(guī)模場的PCV-2抗體陽性率為69.57%，其中經產母豬陽性率為97.87%，保育豬陽性率為43.75%。本研究對16個規(guī)模豬場420份血清樣品進行PCV-2抗體檢測，結果顯示，墾區(qū)豬場PCV-2抗體陽性率達80.95%，育肥豬感染率最高，其次是母豬和小豬，結果與以上報道基本一致。

Ellis J等［8］從一例豬增生性壞死性肺炎的病例中分離得到PCV-2，人們由此推測PCV-2可能是豬呼吸道綜合征的主要致病因子。雖然尚不清楚PCV-2在引起PRDC中所起的作用是主要病原、協(xié)同病原還是繼發(fā)或機會性病原，但可以肯定的是PCV-2在PRDC中起著重要作用［9］。

Engle J等［10］對美國101個豬場中PMWS相關因素進行研究發(fā)現(xiàn)，PMWS陽性樣本中最普遍的混合感染為豬藍耳病病毒（72%）、豬肺炎支原體（69%）、豬鏈球菌（69%）和豬流感病毒（55%）。

近年我國有關PCV-2混合感染的調查多限于病毒病，本文主要針對細菌性疾病的混合感染情況做了檢測，結果顯示，在PCV-2與 Mhp、App、Hps、SS2雙重感染情況中，PCV-2＋Mhp（53.82%）的混合感染具有隨年齡增長而增長的趨勢，母豬高達100%，研究表明，PCV-2常見于 Mhp感染的支氣管周圍淋巴組織區(qū)域，且Mhp可促進PCV-2的感染，另有研究發(fā)現(xiàn)，在PRDC的臨床病例中常見Mhp與PCV-2混合感染，而不一定有豬藍耳病病毒或豬流感病毒的存在［11］。

PCV-2＋App（43.82%）的混合感染，母豬的感染率高于小豬和育肥豬；PCV-2＋Hps（64.42%）的混合感染，小豬、育肥豬、母豬的感染率均較高，Hps屬于中等毒力的菌株，單獨感染造成的病死率不高，但PCV-2＋Hps混合感染在豬場中廣泛流行和持續(xù)存在，往往造成豬群極高的發(fā)病率和死亡率［11］；PCV-2＋SS2（45.1%）混合感染中，小豬感染率明顯低于育肥豬和母豬，可能與SS2的水平傳播很嚴重，存在于環(huán)境中的病原主要通過空氣浮塵進行傳播［11］有關。三重混合感染情況中，以PCV-2＋Mhp＋SS2（36.47%）、PCV-2＋Mhp＋Hps（36.18%）、PCV-2＋Hps＋SS2（31.76%）比較嚴重；四重混合感染中以PCV-2＋Mhp＋Hps＋SS2最嚴重，達25.88%；PCV-2＋ Mhp＋ App＋Hps＋SS2混合感染率為10.59%。

因此，墾區(qū)規(guī)模豬場PCV-2感染情況及其與Mhp、App、Hps、SS2的雙重混合感染情況已相當普遍，尤其是母豬；PCV-2與 Mhp、App、Hps、SS2的三重、四重混合感染情況也比較普遍?；旌细腥镜钠毡樾钥赡芘cPCV-2感染導致免疫抑制有關，感染豬血液中單核細胞增加，T細胞（主要是CD4＋）和B細胞數量減少，并出現(xiàn)低密度的未成熟粒細胞，導致免疫抑制［12］。由于PCV-2發(fā)病豬細胞免疫功能顯著降低，缺乏有效的免疫應答能力，必然出現(xiàn)嚴重的繼發(fā)感染。

本次調查研究結果提示墾區(qū)豬場在進行PCV-2的防控時，要制定合理的免疫程序，提高豬的免疫水平，制定控制細菌源性的混合感染或繼發(fā)感染等綜合性防控措施。

［1］ 劉金鑫，孫孟嬌，陳 磊，等.豬圓環(huán)病毒研究進展［J］.動物醫(yī)學進展，2012，33（2）：94-97.

［2］ Allan G，Meehan B，Todd D，et al.Novel porcine circovirus from pigs with wasting disease syndrome［J］.Vet Rec，1998，142：467-468.

［3］ Meehan B M.Isolation and characterization of porcine circovir-us 2from cases of sow abortion and porcine dermatitis and nephropathy syndrome［J］.Arch Virol，2001，146（4）：835-842.

［4］ Shibahara T，Sato K，Ishikawa Y，et al.Porcine circovirus induces B lymphocyte depletion in pigs with wasting disease syndrome［J］.Med Vet Sci，2000，62：1125-1131.

［5］ 何后軍，陸承平，羅詠梅.PCR檢測臨床病例中PCV-2、PRRSV和CSFV的混合感染［J］.中國獸醫(yī)學報，2010，30（2）：177-179.

［6］ 李 龍，張 奎.豬圓環(huán)病毒2型的血清流行病學調查［J］.中國畜牧獸醫(yī)，2010，37（1）：182-183.

［7］ 吳 俊，朱 玲，易 悅，等.四川省部分豬場PCV-2感染的血清學調查［J］.黑龍江畜牧獸醫(yī)，2010（9）：107-110.

［8］ Ellis J，Krakowka S，Allan G M，et al.The clinical scope of porcine reproductive and respiratory syndrome virus infection has expanded since 1987；an alternative perspective［J］.Vet Pathol，1999，36：262-265.

［9］ 陳 益，吳鳳筍，蘭國俊.規(guī)?；i場母豬外傷情況的調查分析及防控［J］.中國畜牧獸醫(yī)，2009，36（9）：152-155.

［10］ Engle M J，Bush E.Risk factors associated with the diagnosis of PMWS during a US case investigation pilot project［R］.Proceedings of 12th AASV Annum Meeting pre-conference seminar：Understanding factors that impact disease expression and control，2006：39-54.

［11］ 斯勞特，阿萊爾，蒙加林，等.豬病學［M］.趙德明，張中秋，沈建忠，等，譯.北京：中國農業(yè)科技出版社，2008：635-879.

［12］ Liu J，Chen I.Characterization of a previously unidentified viral protein in porcine circovirus type 2infected cells and its role in virus-induced apoptosis［J］.J Virol，2005，79 （13）：8262-8274.